CN1688293A - 多肽治疗剂口服给药的缓释配方及其使用方法 - Google Patents

多肽治疗剂口服给药的缓释配方及其使用方法 Download PDF

Info

Publication number
CN1688293A
CN1688293A CNA038236699A CN03823669A CN1688293A CN 1688293 A CN1688293 A CN 1688293A CN A038236699 A CNA038236699 A CN A038236699A CN 03823669 A CN03823669 A CN 03823669A CN 1688293 A CN1688293 A CN 1688293A
Authority
CN
China
Prior art keywords
pharmaceutical composition
polypeptide
rhil
compositions
contain
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CNA038236699A
Other languages
English (en)
Inventor
尼古拉斯·W·沃内
丽贝卡·科瓦尔
阿温德·S·纳吉
拉玛奥·S·查特拉帕利
埃里克·J·本杰明
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Wyeth LLC
Original Assignee
Wyeth LLC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Wyeth LLC filed Critical Wyeth LLC
Publication of CN1688293A publication Critical patent/CN1688293A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/20—Interleukins [IL]
    • A61K38/2073—IL-11
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/28—Dragees; Coated pills or tablets, e.g. with film or compression coating
    • A61K9/2886—Dragees; Coated pills or tablets, e.g. with film or compression coating having two or more different drug-free coatings; Tablets of the type inert core-drug layer-inactive layer
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5073—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals having two or more different coatings optionally including drug-containing subcoatings
    • A61K9/5078—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals having two or more different coatings optionally including drug-containing subcoatings with drug-free core
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/28—Dragees; Coated pills or tablets, e.g. with film or compression coating
    • A61K9/2806—Coating materials
    • A61K9/2833—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/284—Organic macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyvinyl pyrrolidone
    • A61K9/2846—Poly(meth)acrylates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/5026—Organic macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyvinyl pyrrolidone, poly(meth)acrylates

Abstract

适合口服给药、含有多肽的组合物，其中包括治疗性多肽，例如白介素－11。

Description

多肽治疗剂口服给药的缓释配方及其使用方法
发明领域
本发明涉及适合口服给药、含有多肽的组合物，其中包括白介素-11。
发明背景
重组人类白介素-11(rhIL-11)是含有177个氨基酸的非糖基化多肽。多肽不含有半胱氨酸残基，并是高碱性的(PI＞10.5)。rhIL-11是一组人类生长因子，其中包括人生长激素(hGH)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)。
rhIL-11可以用做化学治疗支持剂，并且与其它癌症治疗结合给药，以增加血小板含量。经证实，rhIL-11还具有炎效果，可以用于治疗多种病症，例如节段性回肠炎和溃疡性结肠炎。通常，IL-11通过皮下注射方式给药。皮下注射配方必须是无菌的，相对于其它给药线路价格昂贵。此线路既不方便施用，又会造成受试体不适。此外，皮下注射还与多种并发症有关，例如注射区域的局部组织损伤与感染。
发明概述
本发明部分基于可口服给药受试体rhIL-11组合物的发现。
一方面，本发明提供了具有治疗效果的、缓释口服药剂组合物，其中含有生物活性多肽、肠溶衣(例如甲基丙烯酸共聚物)，任选含有至少一种赋形剂。在一些具体实施方式中，生物活性多肽具有下述一种或者多种特性：不含有N-连接糖基化位点、含有不多于一个半胱氨酸、具有碱性的pI值；在一些具体实施方式中，多肽不含有半胱氨酸残基。
优选的多肽是IL-11。本发明文中所用指的是生物活性多肽IL-11。然而，可以理解，有关IL-11的本发明技术特征也适用于含有其它生物活性多肽的组合物与方法。
在一具体实施方式中，本发明组合物还含有惰性核。惰性核可以是，例如，由糖、淀粉、微晶纤维素或者其它药用可接受的惰性赋形剂构成的颗粒、小球或者珠子。优选的惰性核是碳水化合物，例如单糖、二糖、或者多糖，即含有三个或者多个糖分子的聚合物。适合的碳水化合物实例是蔗糖。在一些具体实施方式中，蔗糖占到组合物的60-75重量％。
当生物活性多肽是IL-11，IL-11层优选配有稳定剂，例如甲硫氨酸、甘氨酸、聚山梨醇酯80和磷酸盐缓冲液，和/或药用可接受粘合剂，例如羟丙基甲基纤维素、聚烯吡酮或者羟丙基纤维素。本发明组合物还含有一种或者多种药用赋形剂。药用赋形剂包括，例如粘合剂、崩解剂、填充剂、增塑剂、润滑剂、助流剂、包衣、和悬浮剂/分散剂。
优选的粘合剂是羟丙基甲基纤维素(HPMC)。HPMC优选占到本发明组合物的3-7重量％。
优选的助流剂是滑石粉。在一些具体实施方式中，助流剂占到本发明组合物的5-10重量％。
增塑剂可以包括，例如柠檬酸三乙酯、聚乙二醇、邻苯二甲酸二丁酯、三乙酸甘油酯、dibutyl sebucate、丙二醇。优选的增塑剂是柠檬酸三乙酯。例如，柠檬酸三乙酯可以占到本发明组合物的1-2重量％。
优选的表面活性剂是聚山梨醇酯80。聚山梨醇酯80可以占到本发明组合物的0.015-0.045重量％。
在一些具体实施方式中，本发明组合物可以用做多层微粒系统，其中包括采用胶囊药剂形式的多层肠溶衣与IL-11层包裹的颗粒。肠溶包衣的IL-11颗粒包括惰性核、例如碳水化合物小球，IL-11层与肠溶衣层。肠溶衣层含有例如PH值决定的共聚物、增塑剂、防粘剂/助流剂。优选的聚合物包括，例如甲基丙烯酸共聚物、苯二甲酸醋酸纤维素、苯二甲酸羟丙甲基纤维素、苯二甲酸聚乙酸乙烯酯、紫胶、琥珀酸乙酸羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素。
优选的是，惰性密封层出现在本发明组合物中做为IL-11层与肠溶衣层的屏障。惰性密封涂层可以是，例如羟丙甲基纤维素、紫烯吡酮、羟丙基纤维素、或者另一种药用可接受的粘合剂。
适合的缓释聚合物包括，例如氨基甲丙烯酸共聚物(EudragitRL，Eudragit RS)、乙基纤维素、或者羟丙甲基纤维素。在一些具体实施方式中，甲基丙烯酸共聚物是pH值决定的阴离子共聚物，在pH大于5.5条件下溶解。甲基丙烯酸共聚物以悬液方式使用，并且占到本发明组合物的10-20重量％。优选的甲基丙烯酸共聚物是EUDRAGITL 30 D-55。
在优选的具体实施方式中，肠溶包衣的片剂形式包括IL-11、填充剂微晶体纤维素(微晶纤维素PH 102)、崩解剂Explotab、磷酸钠缓冲液、抗氧化剂甲硫氨酸、表面活性剂聚山梨醇酯80、润滑剂硬脂酸镁、肠溶衣涂层。
在一优选具体实施方式中，缓释片剂药剂形式包括IL-11、填充剂(例如微晶体纤维素(微晶纤维素PH102)和蔗糖)、基质生成聚合物(羟丙甲基纤维素Methocel K4M Prem，MethocelK100LV，LH，CR，Premium)、助流剂(例如硅酸盐)、磷酸钠缓冲液、抗氧化剂甲硫氨酸、表面活性剂(例如聚山梨醇酯80)、润滑剂(例如硬脂酸镁)。
在另一具体实施方式中，本发明组合物含有甘氨酸。在一些具体实施方式中，甘氨酸占到本发明组合物的1-4重量％。
本发明组合物还任选含有抗氧化剂。适合的抗氧化剂实例是甲硫氨酸。在一些具体实施方式中，甲硫氨酸占到本发明组合物的0.1-0.5重量％。
IL-11可以采用由天然IL-11离析的提纯蛋白形式。此外，IL-11多肽还可以采用多肽的重组形式，例如重组的人类IL-11(rhIL-11)。
在另一方面，本发明提供了具有治疗效果的、缓释口服剂型的多层微粒组合物，其中包括IL-11多肽、第一密封层、肠溶衣层、第二密封层。优选的密封层是HPMC。本发明组合物的肠溶衣层可以是，例如甲基丙烯酸共聚物。优选的甲基丙烯酸共聚物在pH大于5.5的条件下可溶，例如EUDRAGITL 3。
本发明还提供了一种缓释组合物，其中含有IL-11多肽、肠溶衣(例如甲基丙烯酸共聚物)，还任选含有至少一种赋形剂。在一具体实施方式中，本发明组合物还含有惰性核。惰性核可以是，例如由糖、淀粉、微晶纤维素或者其它药用可接受的惰性赋形剂构成的颗粒、小球或者珠子。优选的惰性核是碳水化合物，例如单糖、二糖、或者多糖，即含有三个或者多个糖分子的聚合物。适合的碳水化合物实例是蔗糖。在一些具体实施方式中，蔗糖占到组合物的60-75重量％。
本发明还提供了将IL-11多肽给药受试体的方法，该方法通过将用量上足以引发受试体生理反应的含有文中所述IL-11多肽的药用组合物口服给药于受试体。在一些具体实施方式中，在受试体小肠内引发反应。
上述方法中所用的受试体可以是，例如人，非人类的灵长类动物，狗，猫，马，奶牛，猪，羊，兔，大鼠，或者小鼠。
另一方面，本发明提供了一种治疗或者预防受试体炎症的方法，该方法通过将含有IL-11的口服组合物给药于受试体。在一些具体实施方式中，所述炎症与溃疡性结肠炎、节段性回肠炎有关。
除非另有说明，本说明书所用的全部技术与科技名词具有与本领域普通技术人员通常理解的相同含义。尽管在实施或者检测本发明中可以使用与文中所述等同或者相似的方法与材料，适合的方法与材料将在下文进行描述。文中所述的所有文献、专利申请、专利以及其它参考资料的全部内容通过引述合并于本文。在发生冲突的情况下，以含有定义的本发明说明书为准。此外，材料、方法和实例仅对本发明进行说明，并非对本发明加以限制。
参见下文的详细说明与权利要求，本发明的其它技术特征与优点将会显而易见。
附图说明
图1是适合口服给药的多层微粒IL-11配方的示意图。
图2是适合口服给药多层微粒IL-11配方制备过程的示意图。
发明详述
本发明提供了适合口服给药生物活性多肽的配方。在一些具体实施方式中，生物活性多肽不含有糖基化位点(例如既缺少氮连接的糖基化位点，又缺少氧连接的糖基化位点，或者同时缺少两种位点)，不含有半胱氨酸残基，和/或具有碱性的pI值。糖基化缺乏的原因既可以是天然多肽缺乏糖基化位点，也可以是蛋白被设计成为缺少这些位点。此外，还可以使用例如糖基化酶处理这些多肽，从而减少或者去除糖基化残基。相似的是，半胱氨酸残基的缺乏可以出现在天然多肽序列中，也可以出现在天然半胱氨酸残基已经被删除或者由非半胱氨酸残基替代的多肽变异体中。
配方中使用的优选多肽是白介素-11(IL-11)。此蛋白是多效性的细胞因子，可以刺激原始淋巴造血前体细胞，并且可以与其它造血生长因子协同作用，从而刺激巨核细胞的增殖与成熟。IL-11详细记录在1991年3月30日公开的国际申请PCT/US90/06803，以及1993年6月1日公开的美国专利No.5215895。克隆的人类IL-11以前记录在1990年3月30日出版的ATCC，10801University Boulevard，Manassas，Va 20110-2209，under ATCC No.68284。此外，如1993年12月14日公开的美国专利No.5270181所述，以及1994年3月8日公开的美国专利No.5292646所述，IL-11还可以与另一种蛋白重组制成融合蛋白。采用现有常规的基因工程技术，可以在多种宿主细胞中制备IL-11。此外，可以从多种细胞系获得IL-11，例如人类肺成纤维细胞系、MRC-5(ATCC Accession No.CCL 171 and Paul et al)、人类滋养层细胞系、TPA30-1(ATCC Accession No.CRL 1583)。在Proc Natl AcadSci USA 87：7512(1990)中记载的是编码人类IL-11的cDNA，以及推导出的氨基酸序列(氨基酸1-199)。美国专利No.5292646记载了去脯氨酸型的IL-11，其中成熟型IL-11(氨基酸22-199)的N末端脯氨酸已经被去除(氨基酸23-199)。本领域技术人员可以理解，按照本发明可以使用保留IL-11活性的任何形式IL-11。
除了重组技术外，还可以通过公知常规的化学合成方法制备IL-11。以合成方式构造本发明多肽的方法在本领域技术人员中众所周知。由于具有与天然细胞因子多肽相同的第一、第二或者第三结构和构象特征，可以预料合成构造的细胞因子多肽序列拥有通常所具有的生物活性。在本发明方法中，还可以使用复制或者部分复制其功能的、合成构造的细胞因子多肽序列或者其片段。因此，可以使用本发明所用天然提纯细胞因子的生物活性替代品或者免疫替代品。
对于蛋白、肽或者这些细胞因子的DNA序列、或者其活性片段的修饰也可以产生应用于本发明方法的蛋白。本领域技术人员可以使用公知的技术，制备此类修饰的细胞因子。在细胞因子序列中，例如IL-11序列中，重要的修饰可以包括在编码序列中替换、插入、或者删除一个或者多个选定的氨基酸残基。关于替换、插入或者删除的诱变技术在本领域技术人员中众所周知(参见美国专利No.4,518,584)。
如文中所述具有治疗效果的、细胞因子多肽序列的其它特定变异可以包括，例如插入一个或者多个糖基化位点。通过删除、取代、或者向肽序列或者核苷酸或者DNA序列加入氨基酸，可以向序列插入天冬门酰胺连接的糖基化识别位点。可以在通过加入氧连接碳水化合物进行修饰的分子内任何位点实现上述变化。此类修改的核苷酸或者肽序列的表达生成了在上述位点糖基化的变异体。
本领域技术人员可以很容易地制成所选细胞因子序列的其它类似物与派生物；经认定，此类似物与派生物全部地或者部分地保留或者延长了其活性。此类的一种修饰是在细胞因子序列上现有的赖氨酸残基上附着聚乙二醇(PEG)，或者使用常规技术向序列插入一个或者多个赖氨酸残基、或者可以与PEG或者PEG衍生物反应的其它氨基酸残基，从而确保附着PEG部分。
这些选定细胞因子的其它类似物还可以是以编码细胞因子DNA序列的等位变异为特征，或者以编码细胞因子DNA序列的诱导变异为特征。可以认定，上述参考文献中公开的所有类似物都类似地适用于本发明，其中包括以能够在严格杂交条件下或者非严格杂交条件下杂交所述细胞因子序列的DNA序列为特征的类似物(Sambrook et al，Molecular Cloning.A Laboratory Mannual，2d edit，Cold Spring Harbor Laboratory，New York(1989))。
还可以认定，融合分子适用于本文公开的组合物与方法，融合分子是通过将一种细胞因子的序列或者序列的生物活性片段融合到另一种细胞因子或者似蛋白质治疗剂，例如融合到IL-6的IL-11(参见，例如在1992年3月19日公开的PCT/US91/06186(WO92/04455)中记录的融合方法)。此外，按照本发明方法，细胞因子组合可以结合给药。
因此，在本发明方法的说明中IL-11只作为名称提及，本领域技术人员可以理解，IL-11包括由本领域当前公开序列制成的蛋白，以及以充分保留相似活性的上述修饰为特征的蛋白。
图1展示了优选多层微粒IL-11配方的示意图。在中心糖球表面上包裹了一个含有rhIL-11的涂层。按顺序将羟丙甲基纤维素(HPMC)密封层包裹在rhIL-11药物涂层上。此HPMC密封层由甲基丙烯酸共聚物(例如，Eudragit L20D-55)与肠溶衣层包裹，并且整个小球由第二或者最终的HPMC密封层包裹。
可以采用任何业内公知的方法制备口服IL-11配方。适合方法的实例包括对蔗糖小球实施流化床喷雾，直接压缩，湿颗粒合成法。在下文的实施例中对本发明组合物的制备方法进行说明。
图2展示了制备适合口服给药多层微粒IL-11颗粒优选方法的流程图。在流化床涂布机中，按顺序施加药物层、密封层、肠溶衣层和第二密封层。优选检测每个步骤的温度与配方质量。
流程图说明，将糖球加入流化床涂布机后，再用含有rhIL-11、二元磷酸钠、一元磷酸钠、甘氨酸、聚山梨醇酯80、甲硫氨酸、羟丙甲基纤维素(HPMC)和纯净水的药物层包裹，形成涂层。接着，施加含有Eudragit、滑石粉、氢氧化钠、柠檬酸三乙酯和纯净水的肠溶衣层。然后，施加HPMC和纯净水构成的密封涂层，随后施用滑石粉作为抗静电剂。后续的步骤包括，例如在2-8摄氏度下储存180天。
合成适合口服给药配方的工艺在本领域众所周知，并且记载在下列文献中：例如Bergstrand等人的美国专利No.6428810，Chen等人的美国专利No.6077541，Ullah等人的美国专利No.6331316，Chen等人的美国专利No.6174548和Anderson等人的美国专利No.6207682。
本发明配方可以以任何适当的形式给药，例如以胶囊、药袋、片剂或者悬液形式使用。
本发明配方可以用于治疗经证实IL-11具有疗效的多种症状。优选的症状是炎性肠疾病(IBD)。此症状是以造成下述临床症状的慢性肠炎为特征的：例如腹泻、出血、腹痛、发烧、关节疼痛和重量减轻。对于这些症状，范围既包括轻微症状又包括严重症状，既可以从初始的轻微不适逐渐温和地发展加重，又可以剧烈强度的方式忽然爆发。
在大部分病人群体中IBD是慢性疾病的普遍原因。IBD表现出两种不同的形式：溃疡性结肠炎(UC)和节段性回肠炎(CD)。尽管两种病症的临床表现非常相似，与上部胃肠道相反UC主要涉及结肠与直肠的炎症。相反的是，节段性回肠炎影响上部小肠消化段的大部分区域，因此更大可能地引发吸收障碍，并且伴随慢性维生素与营养物质的缺乏。
文中所述的口服IL-11配方可以与治疗炎性肠疾病的其它药剂结合给药。其它药剂包括，例如皮质类固醇，免疫抑制剂，英夫利昔单抗，和有助于控制炎症的美沙拉秦。美沙拉秦包括例如抑氮磺胺吡啶和5-ASA试剂，例如安萨科、奥柳氮钠、或者颇得斯安。此外，口服IL-11配方还可以与抗生素结合给药，其中包括例如氨必西林、磺胺、头孢菌素、四环素、或者甲硝哒唑。
考虑改变药物作用的各种因素，例如病人身体状况、体重、性别、膳食以及病症的严重程度、给药时间与其它临床因素后，主治医生可以决定涉及治疗上述症状方法中的服药方式。通常，每日服药应该在1-30毫克多肽范围内。
在下述非限定的实施例中对本发明进行深入阐述。
具体实施方式
实施例1.rhIL对于各种配方赋形剂与抗氧化剂的相容性
对于含有表1所列配方赋形剂与抗氧化剂的rhIL-11片剂，进行相容性研究。研究的赋形剂包括填充剂、崩解剂、缓冲剂、助流剂和润滑剂。采用直接压缩方式，制备含有上述赋形剂的rhIL-11片剂。收集冻干的rhIL-11，再使用#30筛目的筛子过滤，再转移到盛有其它所有赋形剂、大小适中的小瓶中。通过旋转小瓶2-3分钟混合材料。对于包括硬脂酸镁的配方(F1、F2、F4-F8)，此时加入硬脂酸镁后，再持续混合0.5-1分钟。
每个片剂称重为150mg，含有2.5mg的rhIL-11(加入由冷冻干燥小瓶中冷冻浓缩物制备成的冻干粉末，该浓缩物含有数量上相当于5mg的rhIL-11以及磷酸钠和甘氨酸)。在40℃/75％RH条件下静止放置片剂，在初始、2周与4周时间点采用反相HPLC法，测定其强度与Met58氧化％。通常，研究的所有配方显示出Met58氧化％的增长。当在40℃/75％RH条件下静止放置4周时，含有硬脂酸的配方(F3)中rhIL-11的强度降低，由初始的90.4％降低到64.1％。对于此配方，在此过程中Met58氧化％还是从4.4％增加到18.8％。与不含交聚维酮的配方(F1)相比，含有交聚维酮的所有配方(F4，F7和F8)获得了更高的Met58初始氧化％。在40℃/75％RH条件下经过4周储存后，在含有交聚维酮的配方中检测出Met58氧化％又增长10％。
设计第二种研究，用于检测抗氧化剂的潜在优点。研究评价的抗氧化剂是甲硫氨酸、抗坏血酸和EDTA。研究的片剂配方含有作为浓缩物加入的2.5mg rhIL-11、磷酸钠、微晶纤维素、和硬脂酸镁。其它成份汇集在表2。先采用高切力颗粒法，再压缩制备片剂。在40℃/75％RH条件下静止放置片剂，在初始、2周与4周时间点测定其Met58氧化％。含有交聚维酮、但不含任何其它抗氧化剂的配方(W1)获得了最高的Met58氧化％。配方W2、W4和W5含有作为抗氧化剂的甲硫氨酸。在40℃/75％RH条件下静止放置4周后，这些配方表现出Met58氧化％的3-4％小幅增长。EDTA未表现出可以对氧化作用提供额外保护(W5)。经发现，抗坏血酸不具有与甲硫氨酸(W3)相同的效果。在rhIL-11片剂配方中甲硫氨酸表现为最有效的抗氧化剂。
基于赋形剂的相容性与抗氧化剂的研究结果，选择出最终的片剂配方。表3显示了所用的配方。为了防止高切力颗粒的药物缓慢释放，采用流化床颗粒法制备此配方的rhIL-11片剂。片剂首先由HPMC层密封，再由含有EudragitL30D、滑石粉、柠檬酸三乙酯的水性悬液肠衣层包裹，最后再次由HPMC层密封。
    实施例2：在片剂制备过程中rhIL-11胶囊的完整性
在片剂加工过程中检查施加压力下rhIL-11的完整性。使用不同的压力，用于评价片剂制备压力对rhIL-11完整性的效果。这些片剂的重量为150mg，含有2.5mg rhIL-11(冻干粉末)、EXPLOTAB、微晶纤维素、NU-TAB、硅酸盐和硬脂酸镁。直接将片剂压缩成2.4、4.0、7.5或者12.5KP的硬度。通过测定恢复％、多体％、Met58氧化％、相关％，以及通过T-10生物测定法测定rhIL-11的特定活性，可以测定出蛋白的完整性。表4的检测结果表明，对于压缩成不同硬度等级的rhIL-11片剂，恢复％、多体％、Met58氧化％、相关％未发生变化。相似的是，不同配方混合物与片剂的特定活性都在说明书表述的范围内(表5)。这说明，压力并未造成研究配方中rhIL-11化学或者物理的不稳定性。
       实施例3：肠溶包衣的rhIL-11片剂的稳定性
在40℃/75％RH与室温条件下，使用HDPE瓶测定采用流化床颗粒法制备的肠溶包衣片剂的稳定性。稳定性实验包括恢复％、Met58氧化％、相关％的测定。测定结果汇集在表6中。当在室温与40℃/75％RH条件下储存时，不同时间点下测定得出，rhIL-11的强度、肠溶包衣片剂的Met58氧化％、相关％未发生改变。
在微溶解装置中，搅拌速度在50或者100rpm条件下，使用50ml甘氨酸/磷酸盐溶解介质，进行溶解实验。先将涂布片剂放置在0.1N HCl中2小时，再放置在甘氨酸/磷酸盐溶解介质中1小时，然后，检测涂布片剂对rhIL-11的释放。溶解结果表明，在0.1N HCl中的两小时内rhIL-11的释放量小于1％。这表明，5％的肠溶衣层充分提供了对抗胃消化的保护。当在pH7的甘氨酸/磷酸盐缓冲溶液介质中进行溶解实验时，肠溶衣溶解并且rhIL-11得到释放。如前文对未经涂布片剂所述，在50rpm下药物未得到完全释放。
                实施例4：直接压缩配方
此研究的目的聚焦在开发大约5小时内释放IL-11的持续释放片剂配方。按下述步骤制备直接压缩配方。收集冻干的rhIL-11，再使用#30筛目的筛子过滤，然后，转移到盛有除硬脂酸镁外其它所有赋形剂、大小适中的小瓶中。通过旋转小瓶2-3分钟混合材料。在此时加入硬脂酸镁，再持续混合0.5-1分钟。称重用量等同于2.5mg rhIL-11的最终混合物，再使用KiKusowi片剂挤压机压缩。硬度调节在7-10kp。
在含有甲硫氨酸、甘氨酸、聚山梨醇酯80的pH7.0、37℃的150ml磷酸盐缓冲液中，使用50RPM的USP搅拌法，实施溶解。在预定时间间隔内取出1ml样品，再用新鲜介质进行更换。室温下使用Vydac C4柱(2.1×150mm，窄口径)，进行分析。流速是0.5ml每分钟。在214nm处进行检测。使用梯度系统，0.1体积％TFA作为流动相A，含有0.1体积％TFA的80％乙腈作为流动相B。
表7展示了由直接压缩制备的片剂配方。视觉测定这些配方的溶解过程，从而使片剂在溶解介质中的物理行为特征化。与配方2和3的片剂相比，配方1片剂表现出更快的侵蚀过程。配方2片剂表现出最慢的侵蚀过程。所有配方的片剂都显著膨胀。溶解5-6小时后，配方1片剂近乎完全侵蚀。在相同的期间内，侵蚀掉大约2/3的配方2片剂与1/3的配方3片剂。
对于上述检测结果的一种解释是由于片剂的HPMC含量造成的。当HPMC水合物形成凝胶时，就可以起到屏障作用，控制基质的溶解与侵蚀。当HPMC含量增高时，凝胶结构会变得更加坚固与紧密。这样就增加了片剂表面凝胶层的粘度与厚度。因此，基质片剂的溶解速度放慢。这些实验结果说明，从配方1和2的释放药物是最佳选择。
                 实施例5：湿颗粒配方
采用高切力法或者流化床法，制备湿颗粒配方。除了持续释放的聚合物与硬脂酸镁外，可以在其它赋形剂中加入rhIL-11溶液。颗粒经干燥后，使用#30筛目的筛子过滤，再与聚合物与硬脂酸镁混合。称重用量等同于2.5mg rhIL-11的最终混合物，再使用KiKusowi片剂挤压机压缩。将硬度调节在7-10kp。
在含有甲硫氨酸、甘氨酸、聚山梨醇酯80的pH7.0、37℃的150ml磷酸盐缓冲液中，使用50RPM的USP搅拌法，实施溶解。在预定的时间间隔内取出1ml样品，再更换新鲜介质。室温下使用Vydac C4柱(2.1×150mm，窄口径)，进行分析。流速是0.5ml每分钟。在214nm处进行检测。使用梯度系统，0.1体积％TFA作为流动相A，含有0.1体积％TFA的80％乙腈作为流动相B。
参见图8，使用由高切力技术获得的颗粒，制备持续释放配方。将部分药溶液加入除了聚合物与硬脂酸镁外的所有其它赋形剂的混合物中。接着，对湿混合物进行干燥。重复3次上述循环，从而获得目标药物的加载量。然后，将聚合物加入混合物中，接着加入硬脂酸镁。经发现，由此配方制成片剂在溶解介质中的物理行为与含有相似HPMC含量的直接压缩配方表现出的物理行为相似。对由高切力颗粒制备的直接释放片剂的研究表明，获得rhIL-11的完全释放是很困难的。对由流化床颗粒制备的片剂研究表明，在检测制备并释放rhIL-11的所有技术中，此方法最适用于rhIL-11颗粒。
表9展示了由流化床颗粒制备的3种持续释放片剂组合物。流化床颗粒含有rhIL-11混合物、微晶纤维素PH102、一元磷酸钠、二元磷酸钠、甲硫氨酸、聚山梨醇酯80。在这些研究中，由于发现蔗糖是造成储存过程中直接释放片剂脱色的原因，因此在直接压缩与高切力颗粒配方中使用甲硫氨醇替代蔗糖。
      实施例6：缓冲液浓度对rhIL-11溶解的影响
研究缓冲液浓度50mM和100mM对rhIL-11溶解的影响。保持在溶解介质中甘氨酸、甲硫氨酸、聚山梨醇酯80的浓度不变。在两种介质中进行配方6-8(表9)片剂的溶解实验。在100mM介质中，溶解速度明显更快，并近乎完全溶解。另一方面，在50mM介质中，5小时后从片剂释放了仅15％的rhIL-11。
为了理解上述检测结果，继续观察两种介质中溶解片剂出现的变化。在100mM介质中片剂表现出显著的膨胀与快速的侵蚀。片剂大约在溶解5小时后消失。另一方面，在50mM介质中片剂膨胀，但是经过5小时溶解后表现出极小程度的侵蚀。这应该归因于HPMC凝胶结构强度敏感于离子浓度的事实。在溶解介质中磷酸盐缓冲液浓度的增加，造成了离子浓度的增长，从而降低了HPMC凝胶结构的强度与紧密度。
        实施例7：聚合物及其粘度等级的影响
在100mM磷酸盐介质中配方6表现出快速的初始溶解速率。配方6含有作为缓释聚合物的甲基纤维素K4M PREM。为了降低初始溶解速率，在配方中加入更高粘度等级的HPMC(甲基纤维素K15 M PREM)。配方7和8的片剂表现出改进的溶解行为。与配方7相比，由配方8表现出更高的溶解速率归因于配方7片剂不含的颗粒外微晶体纤维素(微晶纤维素PH102)的崩解特性。
单独使用PEO或者与HPMC结合使用，制备基质片剂配方。对于这些配方中某些配方侵蚀与溶解的测定，优选采用目视测定。由于PEO的大分子量，采用HPLC分析这些配方的溶解样品是很困难的。
制备并测定在50mM磷酸盐介质中表现出最佳释放rhIL-11效果的样品配方。制备并测定各种配方。对这些配方侵蚀与溶解的监测说明，使用20-30％甲基纤维素K100 LV，LH，CR Premium作为持续释放的聚合物，从而获得具有可接受溶解行为的配方。表10展示了这些配方的组合物。
测定配方9和10中rhIL-11的溶解。2小时后rhIL-11的溶解速度明显放慢。有时溶解2小时后观测到药物浓度降低。不完全释放应当归因于某些配方赋形剂对rhIL-11的吸收。在对立即释放的片剂与珠剂的观察中也出现上述现象。
为了改善rhIL-11的释放，更换配方中的缓冲液以及溶解介质，由磷酸纳换成磷酸铵。当从配方12中去除颗粒外磷酸钠时，使用磷酸铵制备配方11。在使用磷酸铵制备的介质中，进行配方11和12的溶解实验。观测到的溶解结果表明，经过5小时溶解在保持了可接受溶解效果的情况下，药物的释放量增加。
      实施例8：rhIL-11缓释多层颗粒小球的制备工艺
采用包括下述步骤的工艺，制备rhIL-11肠溶包衣小球：溶解并稀释rhIL-11药物；向小球施加rhIL-11层；施加密封层；施加肠溶衣层；施加最后的密封层；施用滑石粉。多层颗粒小球的成份汇集在表11中。
室温下将rhIL-11与稀释缓冲液(4mM一元磷酸钠，6mM二元磷酸钠，0.3M甘氨酸，pH7.0)混合，获得10mg/ml的最终浓度。稀释的rhIL-11与羟丙甲基纤维素(10％溶液)、甲硫氨酸、聚山梨醇酯80、纯净水混合，生成药物层溶液。
在流化床涂布机中，保持进口温度47-53℃，排出气体温度在30-45℃，供应的气体流速在350-550CFM，喷洒速率在35-85克/分钟，雾化气体在30-40PSI的条件下，将药物层溶液(大约40,600克)施加到大约20,000克的糖球上。
将密封层溶液(大约2900克)施加到药物层包裹的小球上。密封层溶液是由纯净水中7.5重量％的羟丙甲基纤维素溶液构成。与施加药物涂层时相同，使用流化床涂布机，保持进口温度47-53℃，排出气体温度在30-55℃，供应的气体流量在400-500CFM，喷洒速率在25-45克/分钟，雾化气体在30-40PSI。此密封层的功能是在rhIL-11蛋白核与酸性肠溶包衣环境之间提供惰性屏障。
然后，向密封的药物涂层小球施加肠溶衣层溶液(大约30,900g)。使用流化床涂布机，保持进口温度32-38℃，排出气体温度在25-40℃，供应的气体流量在550-700CFM，喷洒速率在45-85克/分钟，雾化气体在25-35PSI。肠溶衣层的功能是提供抵抗胃酸性pH的屏障。
向肠溶包衣的小球施加第二密封涂层(大约3880g)。密封层溶液是由纯净水中7.5重量％的羟丙甲基纤维素溶液构成。与前述相同，使用流化床涂布机，保持进口温度32-38℃，排出气体温度在25-40℃，供应的气体流量在550-700CFM，喷洒速率在25-45克/分钟，雾化气体在25-35PSI。此最后密封层的功能是消除由肠溶衣层造成的颗粒与颗粒之间的潜在粘合力。此密封层可溶于酸，并且在溶解实验第一步骤中被去除。在施加最后密封层后，进行工艺过程中的强度实验，从而确定胶囊的目标填充重量。
在完成施加最后密封涂层的步骤后，向流化床涂布机加入滑石粉。将密封的rhIL-11肠溶包衣小球与滑石粉混合30-60秒，用以消除静电。接着，从流化床涂布机卸下滑石粉处理的小球，放入带有2个干燥剂袋的双聚乙烯衬的容器中，其中一个干燥剂袋放在两个聚乙烯袋之间，一个放在聚乙烯袋外面。然后，将小球装入胶囊中。
  实施例9：肠溶包衣多层颗粒的rhIL-11小球的稳定性
在2-8℃长期储存0-6个月的条件下，测定肠溶包衣多层颗粒小球(采用流化床颗粒法制成)的稳定性。稳定性实验包括测定强度、恢复％、Met58氧化％、相关％。表X显示，当在2-8℃下储存0-6个月，不同时间点上rhIL-11的强度、肠溶包衣片剂的Met58氧化％、相关％未发生变化。
在25℃/60％RH加速储存条件下储存0-6个月，测定肠溶包衣多层颗粒小球(采用流化床颗粒法制成)的稳定性。测得的数据汇集在表13中。
实施例10：rhIL-11对HLA-B27鼠慢性腹泻的治疗效果
从Taconic Farms(Germantown，NY)购得雄性转基因HLA-B27鼠，在控制条件下(21℃；50±10％湿度；12小时光明/黑暗循环)单独饲养。获得10周大的HLA-B27鼠，饲养在动物设施中直到其40周大(350±40g，n＝12)。在40周大时，转基因鼠患有表现为慢性腹泻的肠炎。使用年龄匹配的非转基因Fisher 344鼠作为对照(370±20g，n＝6)，此鼠是从Charles RiverLaboratories Inc(Wilmington，MA)购得，经遗传设计载有许多高度复制的人类主要组织相容性复合体类1等位基因B27和β2-微球蛋白基因。Fisher 344鼠表现健康，大便稠度正常。在rhIL-11给药以前，在所有的HLA-B27鼠中都观察到未形成小球的稀便和腹泻。
rhIL-11多层颗粒每100mg含有大约1mg的rhIL-11，然而蔗糖多层颗粒作为安慰剂使用。在两周治疗期间内每隔一天将相当于500μg rhIL-11/kg、单一剂量的肠溶包衣rhIL-11多层颗粒口服给药，产生积累效果后观察腹泻症状。3组动物涉及此次研究：包括HLA-B27鼠(n＝6)的一个实验组接受rhIL-11治疗；由HLA-B27鼠(n＝6)的赋形剂对照组接受安慰剂的治疗；由年龄匹配F344鼠(n＝6)组成的健康对照鼠接受安慰剂的治疗。在口服给药rhIL-11的2周内对动物们每天称重，rhIL-11或者安慰剂都未曾引导体重的显著变化。
所有HLA-B27鼠都表现出结肠炎的临床症状。每天观察其大便特征，并以正常、柔软或者腹泻为特征。在将rhIL-11或者安慰剂给药治疗HLA-B27鼠以前或者过程中，记录的结果是：正常为0，柔软并形成小球为1，柔软并未形成小球为2，腹泻为3。计算每天记录的平均值，从而使大便稠度特征化。
口服给药rhIL-11显著抑制了腹泻的症状，即治疗的前9天后，大便特征向正常、柔软但是正常形成小球转变。对于接受安慰剂治疗的HLA-B27鼠，观察到大便特征没有变化。相同的是，安慰剂治疗未曾对健康的F344鼠的正常大便特征产生影响。
    实施例11：rhIL-11对HLA-B27鼠肠炎的治疗效果
如上文实施例10所述，向实验鼠口服给药rhIL-11。然后，检测实验鼠的肠炎症状。在最后一次给药rhIL-11和安慰剂的4小时后，对所有实验鼠实施安乐死，并立即摘取其空肠与结肠。
经认定，由中性白细胞特定表达的绿过氧物酶(MPO)是炎性细胞侵入的标记。将肠组织提取物MPO活性作为炎症的指标。从摘取组织中提取全厚的空肠与结肠样品(100-150mg)用于收缩实验，并立即冷冻在液氮中。样品储存在-80℃条件下，然后对全套实验样品同时分析其MPO活性。在溴化六十二烷基三甲基铵磷酸盐缓冲液(pH6)中进行均浆化处理，然后从组织均浆中提取MPO。使用3，3’，5，5’-四甲基联苯胺微孔过氧化物酶基质系统(Sigma Chemical Co，St.Louis，MO)和辣根过氧化物酶作为有关标准，测定10μl样品的MPO活性。按照有关标准的活性(毫微克辣根过氧化物酶)表达MPO活性，即在室温下10分钟内转换相同用量的3，3’，5，5’-四甲基联苯胺基质。数据以毫微克为单位表达，并标准化为每克湿重组织。
与用安慰剂治疗的非转基因Fisher 344鼠相比，用安慰剂治疗的HLA-B27鼠的小肠MPO活性增长了2.3倍，其结肠MPO活性增长了3.8倍。采用rhIL-11治疗的HLA-B27鼠在空肠与结肠中MPO活性显著降低。在用rhIL-11治疗两周后，MPO活性降低到与非转基因Fisher 344鼠相似的水平。相反的是，使用安慰剂治疗的相同周期内，HLA-B27鼠空肠与结肠的MPO活性没有表现出显著的下降。
实施例12：rhIL-11治疗对HLA-B27鼠肠炎组织测定的影响
在口服给药rhIL-11和安慰剂后，从HLA-B27鼠采集空肠与结肠样品。将样品浸泡在10％中性-缓冲型福尔马林中，处理，再嵌入石蜡中，获得5μm厚的切片。用苏木精与曙红染色制成载玻片标本的切片，然后用光学显微镜观察，是否有溃疡、炎症侵入、透壁损伤、纤维症的存在。以遮光的方式检测载玻片，并如下记录每个参数：0-2对应溃疡与纤维症；0-3对应炎症与深度损伤。没有病状记录为0。根据Boughton-Smith等人(1998)所述的方法计算总成绩，作为单个参数的总成绩(最大值为10)。
大便特性的改善(参见上文实施例10)与结肠粘膜的痊愈有关。每隔一日使用肠溶包衣rhIL-11的治疗造成了HLA-B27转基因鼠组织损伤的减少。从接受rhIL-11治疗的实验鼠结肠提取的切片可以看出，组织损伤成绩显著降低。
    实施例13：rhIL-11对基部收缩活性的实际影响
采集空肠片段(大约5cm末梢到Treitz韧带)与结肠片段(大约4cm末梢到回盲肠结合处)，然后放入冰冻的氧化克雷布斯溶液中。通过轻柔地沿着纵向方向剥离肌肉，可以从小肠片段分割出纵向的肌肉条。在解剖显微镜的帮助下，沿着肌肉方向切下肌肉条(10-12mm长)，肌肉条两端用丝制外科缝线(型号3-0)固定。肌肉条垂直放入10ml器官水浴，一端固定，另一端栓在等距力传感器上(Radnoti Glass Technology Inc，Monrovia，CA)。水浴充满了克雷布斯溶液，并保持在37℃，用95％氧气与5％二氧化碳曝气。每隔30分钟通过灌注改换溶液。允许每个平滑肌条在零张力下平衡20分钟，然后以0.2g为力增量连续加载，直到获得最佳的静止张力。经认定，静止张力随着负载而增长。允许肌肉条另外平衡20分钟。在最佳张力条件下实施所有实验，使用Maclab数据获得系统(AD Instruments Ltd，CastleHill，Australia)，记录等距收缩。
对于F344对照鼠空肠纵向肌肉，在最佳张力下记录的基部活性是以低静止张力(3.1±0.8nM/mm2)和在18±5循环/分钟频率下表现出自发的低振幅收缩为特征的。在从安慰剂治疗的F344鼠、安慰剂治疗的HLA-B27鼠、或者rhIL-11治疗的HLA-B27鼠肌肉记录的基部活性之间，不存在显著的差别。当将rhIL-11(1-10,000ng/ml)加入水浴溶液时，从Fisher344鼠与HLA-B27鼠提取的空肠肌肉中，没有发现基部活性的显著变化。相应地，当将rhIL-11(1-10,000ng/ml)加入水浴溶液时，由碳酰胆碱(0.1μM)引发的收缩没有变化。
无论是否存在自发收缩，由安慰剂治疗的对照F344鼠摘取的结肠纵向肌肉都表现出低静止张力(2.4±0.3mN/mm2)。对于接受安慰剂或者rhIL-11的F344鼠和HLA-B27鼠的肌肉，静止张力与自发收缩相似。向水浴溶液加入rhIL-11(1-10,000ng/ml)，未对Fisher344鼠或者HLA-B27鼠结肠的自发收缩或者响应碳酰胆碱(1μM)的收缩表现出敏锐的作用。
   实施例14：rhIL-11治疗对受体-独立肠肌肉收缩的影响
测定rhIL-11治疗对受体-独立肠肌肉收缩的影响。增加水浴溶液中KCl的浓度，可以引发受体-独立膜的去极化，造成肌肉收缩。引发从Fisher 344鼠和HLA-B27鼠摘取的空肠或者结肠肌肉条的最大收缩，需要浓度为60-80mM KCl。然而，与安慰剂治疗的Fisher 344鼠肌肉产生的活性张力相比，安慰剂治疗的HLA-B27鼠肌肉产生的活性张力更弱一些。使用rhIL-11对HLA-B27鼠的治疗，增强了由高浓度KCl诱导的空肠与结肠肌肉的最大收缩。此外，从安慰剂治疗的Fisher344鼠摘取的肌肉对高浓度KCl的响应，与从rhIL-11治疗的HLA-B27鼠摘取的肌肉对高浓度KCl的响应相比，两者之间没有显著差别。
   实施例15：rhIL-11治疗对胆碱功能肠肌肉收缩的影响
测定rhIL-11治疗对胆碱功能肠肌肉收缩的影响。获得了在碳酰胆碱条件下空肠与结肠纵向肌肉的完全剂量响应曲线。从HLA-B27空肠获取的纵向肌肉表现出异常的收缩响应。将从安慰剂治疗的HLA-B27鼠获取的肌肉与安慰剂治疗的Fisher 344鼠肌肉相比，其响应碳酰胆碱浓度增长产生的最大活性张力明显更弱一些。收缩响应的降低伴随着剂量响应曲线向碳酰胆碱更低浓度方向转移。相应地，与由Fisher 344鼠空肠获得的EC50相比，安慰剂治疗的HLA-B27鼠空肠肌肉对应碳酰胆碱的EC50值更小一些。用rhIL-11治疗HLA-B27转基因鼠，造成了碳酰胆碱诱导的空肠肌肉最大张力的显著增强。除了显著增强以外，最大响应的幅度仍旧小于安慰剂治疗的Fisher 344鼠肌肉的最大收缩。与安慰剂治疗的HLA-B27鼠相比，用rhIL-11治疗的HLA-B27鼠空肠对应碳酰胆碱的EC50值显著减少；并与Fisher 344鼠空肠的EC50值相似。
安慰剂治疗HLA-B27鼠的结肠肌肉响应碳酰胆碱产生的最大活性张力小于安慰剂治疗的Fisher 344鼠结肠肌肉产生的最大活性张力。rhIL-11治疗后，与安慰剂治疗的HLA-B27鼠相比，rhIL-11治疗的HLA-B27鼠结肠肌肉受碳酰胆碱诱导产生的最大张力显著增加；并且与安慰剂治疗的Fisher 344鼠结肠产生的最大张力相似。与空肠相反，从安慰剂治疗的F334鼠和HLA-B27鼠、以及rhIL-11治疗的HLA-B27鼠结肠肌肉获得的对应碳酰胆碱浓度效应曲线具有相似的作用线，EC50值之间未表现出显著的差别。
   实施例16：rhIL-11治疗对神经介导肠肌肉收缩的影响
对于空肠的纵向肌肉，EFS(0.5ms脉冲持续时间，5Hz，5s训练持续时间)诱导出收缩响应。在刺激过程中张力增长到达峰值，刺激训练结束后又下降到静止水平。在整个实验过程中，对EFS响应具有可重现性。在阿托品(1μM)和胍乙腚(10μM)存在的条件下，EFS诱导了低幅度的非肾上腺素非胆碱(NANC)的收缩响应。未观察到舒张现象。单独使用胍乙腚不能对EFS诱导的收缩产生影响；因此，对照响应与NANC部分之间的差别代表了EFS诱导收缩的胆碱功能部分(阿托品敏感部分)。测定rhIL-11治疗对对照与NANC神经介导收缩的影响。与安慰剂治疗的Fisher 344鼠相比，从安慰剂治疗的HLA-B27鼠空肠肌肉获得对于EFS的对照响应具有更小的幅度，然而两者NANC收缩幅度之间没有显著的差别。使用rhIL-11对HLA-B27的口服治疗使对照EFS诱导的收缩幅度标准化，并且没有对NANC响应产生显著的影响。河豚毒素(1μM)完全废止了对照与NANC对EFS的响应，说明这些响应是由肠神经元的活化造成的。
对于结肠肌肉，EFS诱导了收缩响应，其受到阿托品与胍乙锭部分抑制，说明此收缩响应是NANC收缩。与空肠相似的是，结肠肌肉保持了相对低水平的静止张力，并且没有观察到任何舒张响应。与安慰剂治疗的F344鼠相比，从安慰剂治疗的HLA-B27鼠获得的肌肉对于EFS的对照响应降低。与空肠形成对比，NANC收缩的幅度也显著降低。使用rhIL-11对HLA-B27鼠的治疗明显增加了对照EFS诱导收缩的幅度，并且使NANC响应正常化。不管上述恢复，与安慰剂治疗的F344鼠相比，经治疗的HLA-B27鼠仍保持更低的幅度。由EFS诱导的对照与NANC收缩都可以被河豚毒素(1μM)废止。
其它具体实施方式
其它具体实施方式记录在权利要求书中。
             表1.赋形剂相容性的研究中使用的配方
No  检测赋形剂(％) 其它成份(％)
F1  对照 微晶纤维素PH112(77)，Explotab(8)硅酸盐(0.25)，硬脂酸镁(0.25)
F2  滑石粉(0.25) 微晶纤维素PH112(77)，Explotab(8)硬脂酸镁(0.25)
F3  硬脂酸(1) 微晶纤维素PH112(76)，Explotab(8)硅酸盐(0.25)
F4  交聚维酮(5) 微晶纤维素PH112(80)，硅酸盐(0.25)，硬脂酸镁(0.25)
F5  Nu-Tab(77) Explotab(8)，硅酸盐(0.25)，硬脂酸镁(0.25)
F6  微晶纤维素PH112(38.6)Nu-Tab(38.6) Explotab(8)，硅酸盐(0.25)，硬脂酸镁(0.25)
F7  Nu-Tab(39.9)交聚维酮(5) 微晶纤维素PH112(39.9)，硅酸盐(0.25)，硬脂酸镁(0.25)
F8  Nu-Tab(40)交聚维酮(5)无硅酸盐 微晶纤维素PH112(40)，硬脂酸镁(0.5)
              表2.研究选择抗氧化剂的配方
  No.   抗氧化剂(％) 其它赋形剂 片剂重量(mg)
  W1   无 交聚维酮 200
  W2   甲硫氨酸(0.5) 交聚维酮 20
  W3   抗坏血酸(1) 交聚维酮 200
  W4   甲硫氨酸(0.5) 无 250
  W5   甲硫氨酸(0.5)(EDTA)(0.8) 无 250
     表3.流化床颗粒制备的装载rhIL-11的片剂配方
成份                                  毫克/片剂
颗粒内
rhIL-11(相当于2.5毫克的浓缩物)        5.561
微晶纤维素PH112                       92.50
无水Na2HPO4                         8.5
无水NaH2PO4                         6.5
甲硫氨酸                              1.00
聚山梨醇酯80                          0.339
颗粒外
微晶纤维素PH112                       73.5
无水Na2HPO4                         4.25
无水NaH2PO4                         3.25
Explotab                              4.00
硬酯酸镁                              0.60
总计                                  200
涂层
Eudragit L 30D                        5％
             表4.物理压力对rhIL-11完整性的影响
    硬度(Kp)    恢复a(％)  多体b(％)    Met58(％)     相关％
    2.4    111.0  0.2    4.1     3.7
    4.0    105.3  0.3    4.2     3.9
    7.5    96.4  0.3    4.4     4.1
    12.8    100.2  0.2    4.3     4.0
a由RP-HPLC测定；b由分子排阻色谱法测定。
             表5.T-10生物测定法测定的体外生物活性
                    (rhIL-11直接压缩片剂)
配方     SP Act(Uwho/mg)   IC Sp Act(Uwho/mg)
片剂：交聚维酮，硅酸盐，微晶纤维素，硬脂酸镁     5.82E+06   6.70E+06
混合物：微晶纤维素，Nu-Tab，Explotab，硅酸盐，硬脂酸镁     6.57E+06   5.80E+06
片剂：微晶纤维素，Nu-Tab，Explotab，硅酸盐，硬脂酸镁     6.38E+06   7.70E+06
Sp Act：特定活性；IC Sp Act：固有对照特定活性
  表6.rhIL-11肠溶包衣片剂(由流化床颗粒法制成)的稳定性
    时间(周)(条件)     强度(％)     Met58(％)   相关(％)
    初始     93.6     5.0   6.7
    2(40℃/75％RH)     86.9     4.5   3.4
    4(40℃/75％RH)     86.6     5.0   3.8
    15(室温)     94.1     4.0   4.9
             表7：直接压缩制备的缓释片剂配方
  成份   配方1(％)  配方2(％)    配方3(％)
  冻干的rhIL-11*   6.3  6.0    5.7
  HPMC(甲基纤维素K4MPREM)   10.5  15    19
  微晶体纤维素(微晶纤维素PH112)   10.5  10    9.5
  蔗糖(NU-TAB)   68.5  65    62
  二氧化硅(硅酸盐)   0.26  0.25    0.24
  硬脂酸镁   0.79  0.75    0.71
  Na2HPO4(无水)   1.78  1.7    1.62
  NaH2PO4(无水)   1.37  1.3    1.24
*每个片剂含有2.5毫克rhIL-11。
  表8：由高切力湿颗粒法制备的缓释片剂配方的组合物
  成份     配方4(％)     配方5(％)
  rhIL-11*     1.0     1.0
  甲基纤维素K4M PREM     10.0     15.0
  微晶纤维素PH112     30.0     30.0
  NU-TAB     55.04     50.04
  硅酸盐     0.25     0.25
  硬脂酸镁     0.74     0.74
  Na2HPO4(无水)     1.68     1.68
  NaH2PO4(无水)     1.29     1.29
*每个片剂含有作为本体溶液加入的2.5毫克rhIL-11。
      表9.使用高等级粘度HPMC采用流化床颗粒法制备的
                 缓释片剂配方组合物
   配方6(％)    配方7(％)    配方8(％)
  RhIL-11颗粒*    48.6    45.7    45.7
  甲基纤维素K4M PREM    31.9    25    24
  甲基纤维素K15MPREM    -----    5.3    6.0
  甘露醇    18.44    23.0    15.3
  微晶纤维素PH102    -----    -----    8.0
  硅酸盐    0.26    0.25    0.25
  硬脂酸镁    0.8    0.75    0.75
*由流化床颗粒制备，等同于每片剂2.5mg rhIL-11。
             表10.使用低粘度等级的HPMC和多种磷酸盐缓冲液、采用流
                     化床颗粒法制备的缓释片剂配方组合物
  成份     配方9(％)     配方10(％)     配方11(％)     配方12(％)
  rhIL-11颗粒*     45.7     45.7     45.7     45.7
  甲基纤维素K100 LV，LH，CR，Premium     25.0     30.0     25     25
  甘露醇     16.3     -----     -----     28.3
  硅酸盐     0.25     0.25     0.25     0.25
  硬脂酸镁     0.75     0.75     0.75     0.75
  Na2HPO4     6.8     13.3     -----     -----
  NaH2PO4     5.2     10     -----     -----
  (NH4)2HPO4     -----     -----     16.1     -----
  (NH4)H2PO4     -----     -----     12.2     -----
*采用流化床颗粒法制成，相当于2.5毫克rhIl-11。
         表11.rhIL-11缓释多层颗粒胶囊的组合物
  成份   百分比(重量％)    目标为5毫克胶囊(毫克)
  rhIL-11   1.10b    5.500
  糖球，NF   68.0    339.9
  甘氨酸，USP   2.47    12.38
  二元磷酸钠，USP   0.180    0.8855
  一元磷酸钠，USP   0.060    0.3037
  聚山梨醇酯-80，NF   0.028    0.1377
  甲硫氨酸，USP   0.206    1.028
  羟丙甲基纤维素，USP   3.91    19.57
  甲丙烯酸共聚物悬液，NF(Eudragit L30D-55)   15.0    74.95
  滑石粉，USP   7.50    37.49
  氢氧化钠，NF   0.090    0.4496
  柠檬酸三乙酯，NF   1.50    7.490
  纯净水，USP   在加工过程中去除    q.s
  型号#0硬凝胶胶囊
  总计    500毫克
添加超量10％的rhIL-11，用于补偿制备过程中的损失。
                        表12.rhIL-11缓释胶囊，5毫克/胶囊
                            在2-8℃下长期储存0-18个月
实验 强度  总惰性部分 Met58氧化部分   杂质 &rhIL-11相关部分   特定活性(T-10生物分析) 溶解-酸阶段(0.1NHCl)   溶解缓冲液阶段(磷酸盐缓冲液) 湿度
初始 4.60  9.4％ 6.7％   2.7％   8.1×106   3％   76％ 1.1％
1月 4.94  7.1％ 4.5％   2.7％   NSb   3％   74％ 1.3％
83天 4.94  6.3％ 4.0％   2.3％   7.0×106   3％   82％ 1.1％
6月 4.74  7.3％ 4.4％   3.0％   7.0×106   2％   84％ 1.1％
9月 5.02  8.1％ 5.3％   2.8％   1.1×107   3％   65％ 2.4％
12月 4.49  5.0％ 3.2％   1.9％   8.9×106   NT   NT 1.6％
18月 4.60  5.8％ 4.0％   1.8％   8.0×106   1％   69％ 1.1％
                     表13.rhIL-11缓释胶囊，5毫克/胶囊
                         在25℃下长期储存0-18个月
实验 强度  总惰性部分 Met58氧化部分 杂质&rhIL-11相关部分 特定活性(T-10生物分析)   溶解-酸阶段(0.1NHCl)   溶解缓冲液阶段(磷酸盐缓冲液) 湿度
初始 4.60  9.4％ 6.7％ 2.7％ 8.1×106   3％   76％ 1.1％
1月 4.86  7.3％ 4.6％ 2.7％ NSb   2％   76％ 1.4％
83天 4.82  6.6％ 4.0％ 2.5％ 6.9×106   3％   80％ 1.2％
6月 4.75  9.1％ 5.4％ 3.7％ 5.7×106   1％   75％ 1.2％
9月 4.87  10.3％ 6.7％ 3.6％ 1.2×107   2％   65％ 1.5％
12月 4.48  7.9％ 5.1％ 2.9％ 7.4×106   2％   68％ 2.1％

Claims (52)

1.一种含有具有治疗效果、缓释口服药剂形式生物活性多肽的药用组合物，其中所述组合物含有
生物活性多肽，其中所述的多肽具有下述的一种或者多种特性：不含有N-连接糖基化位点、含有不多于一个半胱氨酸、具有碱性的pI值；
至少一种粘合剂；
至少一种增塑剂；
至少一种助流剂；
甲基丙烯酸共聚物。
2.权利要求1的组合物，其中所述多肽具有下述的两种或者多种特性：不含有N-连接糖基化位点、含有不多于一个半胱氨酸、具有碱性的pI值。
3.权利要求1的组合物，其中所述多肽不含有N-连接糖基化位点、含有不多于一个半胱氨酸、具有碱性的pI值。
4.权利要求1的组合物，其中所述多肽不含有半胱氨酸。
5.一种含有具有治疗效果、缓释口服药剂形式白介素-11(“IL-11”)多肽的药用组合物，其中所述组合物含有白介素-11多肽；
至少一种粘合剂；
至少一种增塑剂；
至少一种助流剂；
甲基丙烯酸共聚物。
6.权利要求5的药用组合物，还含有碳水化合物。
7.权利要求6的药用组合物，其中所述碳水化合物包括蔗糖。
8.权利要求6的药用组合物，其中所述碳水化合物占所述药用组合物的60-75重量％。
9.权利要求9的药用组合物，还含有甘氨酸。
10.权利要求9的药用组合物，其中所述甘氨酸占所述药用组合物的1-4重量％。
11.权利要求9的药用组合物，还含有甲硫氨酸。
12.权利要求11的药用组合物，其中甲硫氨酸占所述组合物的0.1-0.5重量％。
13.权利要求1的药用组合物，其中所述甲基丙烯酸共聚物是PH决定的阴离子共聚物，并且在PH大于5.5条件下溶解。
14.权利要求13的药用组合物，其中所述甲基丙烯酸共聚物以悬液方式使用。
15.权利要求13的药用组合物，其中所述甲基丙烯酸共聚物占药用组合物的10-20重量％。
16.权利要求9的药用组合物，其中所述IL-11多肽具有人类IL-11多肽的氨基酸序列。
17.权利要求9的药用组合物，其中所述IL-11多肽是重组制成的IL-11多肽。
18.权利要求16的药用组合物，其中所述IL-11多肽是重组制成的IL-11多肽。
19.权利要求5的药用组合物，其中所述至少一种粘合剂是羟丙基甲基纤维素(HPMC)。
20.权利要求5的药用组合物，其中HPMC浓度占组合物的3-7％。
21.权利要求5的药用组合物，其中所述至少一种助流剂是滑石粉。
22.权利要求21的药用组合物，其中滑石粉浓度占所述组合物的5-10％。
23.权利要求5的药用组合物，其中所述至少一种增塑剂是柠檬酸三乙酯或者聚山梨醇酯-80。
24.权利要求23的药用组合物，其中所述柠檬酸三乙酯占药用组合物的1-2重量％。
25.权利要求23的药用组合物，其中所述聚山梨醇酯-80占药用组合物的0.015-0.045重量％。
26.权利要求5的药用组合物，其中所述至少一种增塑剂是柠檬酸三乙酯。
27.一种含有具有治疗效果、缓释口服药剂形式生物活性多肽的药用组合物，
其中所述的生物活性多肽具有下述的一种或者多种特性：不含有N-连接糖基化位点、含有不多于一个半胱氨酸、具有碱性的pI值，
并且所述活性多肽由第一密封层、肠溶衣层、第二密封层充分包裹，其中肠溶衣层充分地排布在第一与第二密封层之间。
28.一种含有具有治疗效果、缓释口服药剂形式白介素-11(“IL-11”)多肽的药用组合物，
其中所述IL-11多肽由第一密封层、肠溶衣层、第二密封层充分包裹，其中肠溶衣层充分地排布在第一与第二密封层之间。
29.权利要求28的药用组合物，其中在第一与第二密封层中至少一个密封层是HPMC。
30.权利要求28的药用组合物，其中第一与第二密封层含有HPMC。
31.权利要求28的药用组合物，其中所述的肠溶衣层含有甲基丙烯酸共聚物。
32.权利要求28的药用组合物，其中所述的IL-11多肽包裹在碳水化合物上。
33.权利要求32的药用组合物，其中所述的碳水化合物是蔗糖。
34.权利要求28的药用组合物，还含有甲硫氨酸。
35.权利要求28的药用组合物，还含有甘氨酸。
36.权利要求28的药用组合物，还含有助流剂。
37.权利要求36的药用组合物，其中所述的助流剂是滑石粉。
38.权利要求28的药用组合物，其中所述的组合物以胶囊或者片剂形式使用。
39.权利要求38的药用组合物，其中所述组合物以片剂形式使用。
40.权利要求28的药用组合物，其中所述的组合物以胶囊形式使用。
41.权利要求40的药用组合物，其中所述的胶囊是凝胶胶囊。
42.一种将生物活性多肽给药受试体的方法，该方法包括将用量上足以引发受试体生理反应的权利要求1药用组合物口服给药于受试体。
43.一种将白介素-11(“IL-11”)多肽给药受试体的方法，该方法包括将用量上足以引发受试体生理反应的权利要求5药用组合物口服给药于受试体。
44.权利要求43的方法，其中所述的IL-11多肽引发了受试体小肠的生理反应。
45.权利要求43的方法，其中所述受试体是人类。
46.权利要求43的方法，其中所述IL-11多肽作为组合物的成份用药，该组合物含有：
至少一种粘合剂；
至少一种增塑剂；
至少一种助流剂；
甲基丙烯酸共聚物。
47.权利要求43的方法，其中所述白介素-11(IL-11)多肽是重组的人类IL-11。
48.一种治疗受试体炎性肠疾病的方法，该方法包括将有效剂量的IL-11口服给药于受试体。
49.权利要求48的方法，其中所述的炎性疾病是溃疡性结肠炎。
50.权利要求48的方法，其中所述的炎性疾病是节段性回肠炎。
51.权利要求48的方法，其中所述受试体是人类。
52.权利要求48的方法，其中所述IL-11多肽作为组合物成份用药，该组合物含有：
至少一种粘合剂；
至少一种增塑剂；
至少一种助流剂；
甲基丙烯酸共聚物。
CNA038236699A 2002-09-16 2003-09-16 多肽治疗剂口服给药的缓释配方及其使用方法 Pending CN1688293A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US41104002P 2002-09-16 2002-09-16
US60/411,040 2002-09-16

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN1688293A true CN1688293A (zh) 2005-10-26

Family

ID=31994239

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNA038236699A Pending CN1688293A (zh) 2002-09-16 2003-09-16 多肽治疗剂口服给药的缓释配方及其使用方法

Country Status (9)

Country Link
US (2) US20040126358A1 (zh)
EP (1) EP1545474A1 (zh)
JP (1) JP2006503045A (zh)
CN (1) CN1688293A (zh)
AU (1) AU2003296413A1 (zh)
BR (1) BR0314356A (zh)
CA (1) CA2498931A1 (zh)
MX (1) MXPA05002899A (zh)
WO (1) WO2004024125A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104434841A (zh) * 2014-12-11 2015-03-25 顺昊细胞生物技术（天津）股份有限公司 一种结肠定位复合细胞因子组合物

Families Citing this family (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100883277B1 (ko) * 2001-02-24 2009-02-12 베링거 잉겔하임 파르마 게엠베하 운트 코 카게 크산틴 유도체 및 이의 제조방법
US7407955B2 (en) 2002-08-21 2008-08-05 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co., Kg 8-[3-amino-piperidin-1-yl]-xanthines, the preparation thereof and their use as pharmaceutical compositions
US7501426B2 (en) 2004-02-18 2009-03-10 Boehringer Ingelheim International Gmbh 8-[3-amino-piperidin-1-yl]-xanthines, their preparation and their use as pharmaceutical compositions
US20140162965A1 (en) 2004-08-25 2014-06-12 Aegis Therapeutics, Inc. Compositions for oral drug administration
US8268791B2 (en) * 2004-08-25 2012-09-18 Aegis Therapeutics, Llc. Alkylglycoside compositions for drug administration
US9895444B2 (en) 2004-08-25 2018-02-20 Aegis Therapeutics, Llc Compositions for drug administration
US20060046962A1 (en) * 2004-08-25 2006-03-02 Aegis Therapeutics Llc Absorption enhancers for drug administration
US20060046969A1 (en) * 2004-08-25 2006-03-02 Aegis Therapeutics Llc Antibacterial compositions for drug administration
US20090047347A1 (en) * 2005-07-29 2009-02-19 Aegis Therapeutics, Inc. Compositions for Drug Administration
EP2457580A1 (en) * 2004-08-25 2012-05-30 The UAB Research Foundation Absorption enhancers for drug administration
DE102004054054A1 (de) 2004-11-05 2006-05-11 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Verfahren zur Herstellung chiraler 8-(3-Amino-piperidin-1-yl)-xanthine
DE102005035891A1 (de) 2005-07-30 2007-02-08 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg 8-(3-Amino-piperidin-1-yl)-xanthine, deren Herstellung und deren Verwendung als Arzneimittel
CN101437823B (zh) 2006-05-04 2014-12-10 勃林格殷格翰国际有限公司 多晶型
EP1852108A1 (en) * 2006-05-04 2007-11-07 Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co.KG DPP IV inhibitor formulations
PE20110235A1 (es) * 2006-05-04 2011-04-14 Boehringer Ingelheim Int Combinaciones farmaceuticas que comprenden linagliptina y metmorfina
US8226949B2 (en) 2006-06-23 2012-07-24 Aegis Therapeutics Llc Stabilizing alkylglycoside compositions and methods thereof
WO2008043107A2 (en) * 2006-10-06 2008-04-10 Alba Therapeutics Corporation Use of tight junction antagonists to treat inflammatory bowel disease
CA2578647A1 (en) * 2007-02-15 2008-08-15 University Of Saskatchewan Reducing post-operative adhesion formation with intraperitoneal glutamine
CN101784278A (zh) * 2007-08-17 2010-07-21 贝林格尔.英格海姆国际有限公司 用于治疗fab-相关的疾病的嘌呤衍生物
EP2271347B1 (en) 2008-03-28 2016-05-11 Hale Biopharma Ventures, Llc Administration of benzodiazepine compositions
PE20091730A1 (es) 2008-04-03 2009-12-10 Boehringer Ingelheim Int Formulaciones que comprenden un inhibidor de dpp4
PE20100156A1 (es) * 2008-06-03 2010-02-23 Boehringer Ingelheim Int Tratamiento de nafld
WO2010014225A2 (en) 2008-07-30 2010-02-04 Biomarin Pharmaceutical Inc. Assays for detection of phenylalanine ammonia-lyase and antibodies to phenylalanine ammonia-lyase
BRPI0916997A2 (pt) 2008-08-06 2020-12-15 Boehringer Ingelheim International Gmbh Inibidor de dpp-4 e seu uso
UY32030A (es) 2008-08-06 2010-03-26 Boehringer Ingelheim Int "tratamiento para diabetes en pacientes inapropiados para terapia con metformina"
JP5906086B2 (ja) * 2008-08-15 2016-04-20 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｆａｂ関連疾患の治療に用いるためのプリン誘導体
KR20110067096A (ko) 2008-09-10 2011-06-21 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 당뇨병 및 관련 상태를 치료하기 위한 병용 요법
EP2349224B1 (en) * 2008-10-10 2017-05-10 Probelte Pharma, S.A. Orally administrable immunostimulant product for aquaculture
US20200155558A1 (en) 2018-11-20 2020-05-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh Treatment for diabetes in patients with insufficient glycemic control despite therapy with an oral antidiabetic drug
US8440631B2 (en) 2008-12-22 2013-05-14 Aegis Therapeutics, Llc Compositions for drug administration
KR20110103968A (ko) 2008-12-23 2011-09-21 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 유기 화합물의 염 형태
AR074990A1 (es) 2009-01-07 2011-03-02 Boehringer Ingelheim Int Tratamiento de diabetes en pacientes con un control glucemico inadecuado a pesar de la terapia con metformina
EA034869B1 (ru) 2009-11-27 2020-03-31 Бёрингер Ингельхайм Интернациональ Гмбх Лечение генотипированных пациентов с диабетом ингибиторами дпп-4, такими как линаглиптин
US8865213B2 (en) * 2009-12-30 2014-10-21 Usv Limited Modified release pharmaceutical compositions
CA2782444C (en) * 2010-02-04 2018-10-23 Biomarin Pharmaceutical Inc. Compositions of prokaryotic phenylalanine ammonia-lyase variants and methods of using compositions thereof
EP2364690A1 (en) * 2010-02-12 2011-09-14 Centro De Ingenieria Genetica Y Biotecnologia Orally administrable pharmaceutical pellet of epidermal growth factor
BR112012028136A2 (pt) 2010-05-05 2016-08-09 Boehringer Ingelheim Int terapia de combinaçao
KR20130093012A (ko) 2010-06-24 2013-08-21 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 당뇨병 요법
US9034883B2 (en) 2010-11-15 2015-05-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Vasoprotective and cardioprotective antidiabetic therapy
CN102462837B (zh) * 2010-11-19 2016-08-03 生物林格斯Ip有限公司 抗炎组合物
WO2012174158A2 (en) 2011-06-14 2012-12-20 Hale Biopharma Ventures, Llc Administration of benzodiazepine
EP2731947B1 (en) 2011-07-15 2019-01-16 Boehringer Ingelheim International GmbH Substituted dimeric quinazoline derivative, its preparation and its use in pharmaceutical compositions for the treatment of type i and ii diabetes
US9555001B2 (en) 2012-03-07 2017-01-31 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical composition and uses thereof
JP6224084B2 (ja) 2012-05-14 2017-11-01 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 糸球体上皮細胞関連障害及び／又はネフローゼ症候群の治療に用いるｄｐｐ−４阻害薬としてのキサンチン誘導体
WO2013174767A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 Boehringer Ingelheim International Gmbh A xanthine derivative as dpp -4 inhibitor for use in modifying food intake and regulating food preference
ITMI20132066A1 (it) * 2013-12-11 2015-06-12 Farmatron Ltd Sistemi terapeutici a rilascio modificato per la somministrazione orale di mentolo nel trattamento delle malattie intestinali
ES2950384T3 (es) 2014-02-28 2023-10-09 Boehringer Ingelheim Int Uso médico de un inhibidor de DPP-4
GB201522186D0 (en) 2015-12-16 2016-01-27 Singapore Health Services Pte Ltd And Nat University Of Singapore The Treatment of fibrosis
US10155000B2 (en) 2016-06-10 2018-12-18 Boehringer Ingelheim International Gmbh Medical use of pharmaceutical combination or composition
CA3045871A1 (en) 2016-12-16 2018-06-21 Singapore Health Services Pte Ltd Il-11 antibodies
GB201621439D0 (en) 2016-12-16 2017-02-01 Singapore Health Services Pte Ltd And Nat Univ Of Singapore IL-11Ra Antibodies
BR112021014105A2 (pt) 2019-01-21 2021-10-13 Singapore Health Services Pte Ltd Agente capaz de inibir a sinalização mediada por interleucina 11, uso do mesmo e método para tratamento ou prevenção da hepatotoxicidade e/ou um distúrbio, doença ou condição associada à hepatotoxicidade

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4518584A (en) * 1983-04-15 1985-05-21 Cetus Corporation Human recombinant interleukin-2 muteins
US5215895A (en) * 1989-11-22 1993-06-01 Genetics Institute, Inc. Dna encoding a mammalian cytokine, interleukin-11
US5270181A (en) * 1991-02-06 1993-12-14 Genetics Institute, Inc. Peptide and protein fusions to thioredoxin and thioredoxin-like molecules
US5292646A (en) * 1991-02-06 1994-03-08 Genetics Institute, Inc. Peptide and protein fusions to thioredoxin and thioredoxin-like molecules
ATE195252T1 (de) * 1993-04-23 2000-08-15 Novartis Erfind Verwalt Gmbh Wirkstoffabgabevorrichtung mit gesteuerter freigabe
US5631219A (en) * 1994-03-08 1997-05-20 Somatogen, Inc. Method of stimulating hematopoiesis with hemoglobin
US5496830A (en) * 1994-09-14 1996-03-05 Johns Hopkins University Inhibition of hemoflagellates by camptothecin compounds
US5846958A (en) * 1995-02-17 1998-12-08 U.S. Bioscience, Inc. Methods of using aminothiols to promote hematopoietic progenitor cell growth
US6540993B1 (en) * 1995-06-27 2003-04-01 Wyeth Method of treating inflammatory bowel disease using a topical formulation of IL-11
US6126933A (en) * 1995-06-27 2000-10-03 Genetics Institute Methods of treating inflammatory bowel diseases by administering IL-11
US5679339A (en) * 1995-06-27 1997-10-21 Keith; James Method of using IL-11 for treating spondyloarthropies
US6174548B1 (en) * 1998-08-28 2001-01-16 Andrx Pharmaceuticals, Inc. Omeprazole formulation
US6096340A (en) * 1997-11-14 2000-08-01 Andrx Pharmaceuticals, Inc. Omeprazole formulation
UA73092C2 (uk) * 1998-07-17 2005-06-15 Брістол-Майерс Сквібб Компані Таблетка з ентеросолюбільним покриттям і спосіб її приготування
US6531152B1 (en) * 1998-09-30 2003-03-11 Dexcel Pharma Technologies Ltd. Immediate release gastrointestinal drug delivery system
SE9803772D0 (sv) * 1998-11-05 1998-11-05 Astra Ab Pharmaceutical formulation
US6207682B1 (en) * 1998-12-22 2001-03-27 Novo Nordisk A/S Modified release formulations containing (R)-1-(10,11-dihydro-5H-Dibenzo[a,d]cyclohepten-5-ylidene)-1propyl)-3-piperidinecarboxylic acid
US6632451B2 (en) * 1999-06-04 2003-10-14 Dexcel Pharma Technologies Ltd. Delayed total release two pulse gastrointestinal drug delivery system

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104434841A (zh) * 2014-12-11 2015-03-25 顺昊细胞生物技术（天津）股份有限公司 一种结肠定位复合细胞因子组合物
CN104434841B (zh) * 2014-12-11 2017-06-06 顺昊细胞生物技术（天津）股份有限公司 一种结肠定位复合细胞因子组合物

Also Published As

Publication number Publication date
MXPA05002899A (es) 2005-05-27
BR0314356A (pt) 2005-07-19
AU2003296413A1 (en) 2004-04-30
EP1545474A1 (en) 2005-06-29
WO2004024125A1 (en) 2004-03-25
US20100062058A1 (en) 2010-03-11
CA2498931A1 (en) 2004-03-25
US20040126358A1 (en) 2004-07-01
JP2006503045A (ja) 2006-01-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1688293A (zh) 多肽治疗剂口服给药的缓释配方及其使用方法
US11590083B2 (en) Targeted gastrointestinal tract delivery of probiotic organisms and/or therapeutic agents
US20210154260A1 (en) Formulations for a tight junction effector
KR102425265B1 (ko) 난 단백질 제형 및 이의 제조 방법
JP6253991B2 (ja) 肝臓脂肪症単独又はｃ型肝炎ウイルス感染を伴った肝臓脂肪症の治療のための組成物、治療法及び診断法
CN1123338C (zh) 奥美拉唑的药物制剂
CN1274280A (zh) 延迟的总释放胃肠道给药系统
KR20170026635A (ko) 장기 재생을 위한 내인성 회장 브레이크 호르몬 경로의 활성화 및 관련 조성물, 치료 방법, 진단법, 및 조절 시스템
CN1681483A (zh) 用于口服的改进释放低溶解度活性成分的微囊
CN1976682A (zh) 用于延时和控制释放药物活性成分的微粒口服盖仑制剂
CN1208343A (zh) 胃肠内释药体系
CN1956707A (zh) 包含n－(2－(2－苯二酰亚氨基乙氧基)－乙酰基)－l－丙氨酰基－d－谷氨酸(lk－423)的耐胃酸的药物剂型
JP2020500870A (ja) 乳酸カルシウム組成物および使用法
JP5779762B2 (ja) 経口送達のための生細胞の配合物
US11786505B2 (en) Methods and compositions for delivering mycophenolic acid active agents to non-human mammals
CN1501798A (zh) 包含双氯酚酸及奥诺前列素的药物组合物
WO2020243393A1 (en) Design of a single oral delivery system containing a monoclonal antibody for the simultaneous treatment of chron's disease and ulcerative colitis
AU2016404808A1 (en) Veterinary composition

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1081431

Country of ref document: HK

C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: WD

Ref document number: 1081431

Country of ref document: HK