CN101837003B - 作为治疗剂的包含无取代b环类黄酮和黄烷混合物的组合物 - Google Patents

作为治疗剂的包含无取代b环类黄酮和黄烷混合物的组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN101837003B
CN101837003B CN2009101641172A CN200910164117A CN101837003B CN 101837003 B CN101837003 B CN 101837003B CN 2009101641172 A CN2009101641172 A CN 2009101641172A CN 200910164117 A CN200910164117 A CN 200910164117A CN 101837003 B CN101837003 B CN 101837003B
Authority
CN
China
Prior art keywords
cox
flavane
compositions
lopps flavone
univestin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
CN2009101641172A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101837003A (zh
Inventor
贾琦
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Unigen Corp
Original Assignee
Unigen Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Unigen Corp filed Critical Unigen Corp
Publication of CN101837003A publication Critical patent/CN101837003A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101837003B publication Critical patent/CN101837003B/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/53Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
    • A61K36/539Scutellaria (skullcap)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33Heterocyclic compounds
    • A61K31/335Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33Heterocyclic compounds
    • A61K31/335Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A61K31/3533,4-Dihydrobenzopyrans, e.g. chroman, catechin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7048Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/11Pteridophyta or Filicophyta (ferns)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/13Coniferophyta (gymnosperms)
    • A61K36/15Pinaceae (Pine family), e.g. pine or cedar
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/28Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/47Euphorbiaceae (Spurge family), e.g. Ricinus (castorbean)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A61K36/484Glycyrrhiza (licorice)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A61K36/486Millettia
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/53Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/54Lauraceae (Laurel family), e.g. cinnamon or sassafras
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/60Moraceae (Mulberry family), e.g. breadfruit or fig
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/74Rubiaceae (Madder family)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/906Zingiberaceae (Ginger family)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/906Zingiberaceae (Ginger family)
    • A61K36/9062Alpinia, e.g. red ginger or galangal
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00Drugs for disorders of the respiratory system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00Drugs for dermatological disorders
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06Antipsoriatics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00Drugs for disorders of the nervous system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06Antimigraine agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04Anorexiants; Antiobesity agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04Antibacterial agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10Antimycotics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12Antivirals
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00Antineoplastic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02Immunomodulators
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08Antiallergic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06Free radical scavengers or antioxidants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/14Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers

Abstract

本发明提供新型组合物,该组合物包括两种特定种类化合物——无取代B环类黄酮和黄烷——的混合物,该组合物用于预防和治疗由COX-2和5-LO通道调节的疾病和病症。本发明还提供同时抑制环氧合酶-2(COX-2)和5-脂氧合酶(5-LO)酶、并减少cox-2 mRNA生成的新型方法。最后,本发明包括用于体重减轻和血糖控制的方法。本发明方法包括向需要的主体给药有效量的含有无取代B环类黄酮和黄烷以及药物学可接受的载体的混合物的组合物。本发明主要涉及预防和治疗由环氧合酶-2(COX-2)和5-脂氧合酶(5-LO)通道调节的疾病和病症,包括但不限于缓解与如骨关节炎、类风湿性关节炎的病症有关的关节不适和疼痛,以及其他由于使用过度导致的损伤。

Description

作为治疗剂的包含无取代B环类黄酮和黄烷混合物的组合物
本申请是2003年4月30日提交的第03809821.0号发明名称为“作为治疗剂的包含无取代B环类黄酮和黄烷混合物的组合物”的中国专利申请的分案申请。 
技术领域
本发明主要涉及预防和治疗由环氧合酶-2(COX-2)及5-脂氧合酶(5-LO)通道调节的疾病和病症。具体而言,本发明涉及一种用于预防和治疗由COX-2及5-LO通道调节的疾病和病症的新型组合物,该组合物包含混合两种特定种类的化合物——无取代B环类黄酮和黄烷——的混合物。本发明包括一种同时抑制COX-2和5-LO酶的蛋白质功能的方法,以及一种给药本发明的新型组合物以调节mRNA生成的方法。本发明还包括一种预防和治疗由COX-2和5-LO调节的疾病和病症的方法,所述疾病和病症包括但不限于与诸如骨性关节炎、类风湿性关节炎的病症相关的关节不适和疼痛以及其他由于使用过度导致的损伤。本发明进一步包括一种减少血糖和促进重量减轻的方法。 
背景技术
花生四烯酸(AA)从细胞膜中的释放与代谢通过几种不同途径导致生成前致炎(pro-inflammatory)代谢物。可论证的,最重要的发炎途径中的两种是由5-脂氧合酶(5-LO)和环氧合酶(COX)酶类调节的。这些平行的通道分别导致白三烯和前列腺素的生成,它们在炎症反应的引发和发展中扮演重要角色。这些血管活性化合物为化学吸引素,其促进发炎细胞渗透入组织并导致延长炎症反应。因此,负责生成炎症介质的酶成为许多目的为治疗炎症的新药的目标,该炎症是导致类风湿性关节炎、骨性关节炎、阿耳茨海默氏病和某些类型的癌症的发病机制的因素。 
环氧合酶(COX)的抑制是大多数非甾体抗炎药(NSAIDS)的作 用机制。存在两种不同的同种型COX酶(COX-1和COX-2),它们共有大约60%的序列同序性,但表达事件以及功能不同。COX-1是与前列腺素的生理生成相联系的组成型酶,前列腺素与如血小板凝集的正常生理功能的调节、胃中细胞功能的保护以及正常肾功能的维持有关(Dannhardt and kiefer(2001)Eur.J.Med.Chem.36:109-26)。第二种同种型COX-2是可被前致炎细胞因子如白细胞介素-1β(IL-1β)和其他生长因子诱导的酶的形式(Herschmann(1994)Cancer Metastasis Rev.134:241-56;Xie等,(1992)Drugs Dev.Res.25:249-65)。该同种型催化从AA生成前列腺素E2(PGE2)。COX-2的抑制是常规NSAID具有抗炎活性的原因。 
对COX-2和5-LO表现出双重特异性同时维持了相对于COX-1的COX-2选择性的抑制剂具有抑制AA代谢的多重途径的明显好处。该抑制剂通过抑制其生成可以阻断PGE2的以及多重白三烯(LT)的作用。其包括LTB4和LTD4的血管舒张、血管通透性和趋化性作用以及也公知作为anaphalaxis慢反应物质的LTE4的作用。其中,LTB4具有最有效的趋化性以及化学增活作用(Moore(1985),Prostanoids:Pharmacological,Physiological and Clinical Relevance,Cambridge University Press,N.Y.,pp.229-30),且显示出在患炎症性肠疾病患者的胃肠道粘膜中(Sharon和Stenson(1983)Gastroenterology 84:1306-13)以及患类风湿性关节炎患者的滑液中有所提高(Klicksein等(1980)J.Clin.Invest.66:1166-70;Rae等(1982)Lancet ii:1122-4)。 
除上述双重COX-2/5-LO抑制剂的好处外,许多双重抑制剂不引发NSAID或COX-2抑制剂典型的副作用,包括传统NSAID所引起的胃肠道损伤和不适。有人提出NSAID引发的胃炎主要归因于5-LO代谢物,特别是LTB4,其将细胞吸引至胃损伤部位并因此引起进一步的损伤(Kircher等,(1997)Prostaglandins Leukot.Essent.Fatty Acids 56:417-23)。 白三烯代表前列腺素类被抑制后胃粘膜内主要的AA代谢物。这些化合物显示出其在很大程度上促成应用NSAID所导致的胃上皮损伤(Celotti和Laufer(2001)Pharmacol.Res.43:429-36)。COX-2和5-LO的双重抑制剂还显示出抑制大鼠模型中关节炎心脏(arthritic hearts)的冠状血管收缩(Gok等(2000)Pharmacology 60:41-46)。总之,这些特征显示出由于既增强功效还减少副作用,双重COX-2和5-LO抑制剂相对于特异性COX-2抑制剂和非特异性NSAID具有明显的优势。 
由于COX抑制剂的作用机制与大多数传统的NSAID重叠,COX抑制剂被用于许多相同症状如短期症状中与发炎有关的疼痛和肿胀以及发炎在其中起关键作用的慢性疾病。短期症状包括与轻度擦伤、晒伤或接触性皮炎有关的炎症的治疗,以及与紧张有关的疼痛和偏头痛以及月经痛的减轻。慢性疾病包括关节炎疾病如类风湿性关节炎和骨关节炎。尽管类风湿性关节炎很大程度上是自身免疫性疾病且骨关节炎是由关节软骨的退化导致的,对分别与其相关的炎症的减少使得这些疾病的患者的生活质量大幅提高(Wienberg(2001)Immunol.Res.22:319-41;Wollhiem(2000)Curr.Opin.Rheum.13:193-201)。由于发炎通常是风湿病的一部分,COX抑制剂的应用得以扩展至包括如系统性红斑狼疮(systemic lupus erythromatosus)(SLE)(Goebel等(1999)Chem.Res.Tox.12:488-500;Patrono等(1985)J.Clin.Invest.76:1011-1018)以及风湿性皮肤病如硬皮病。COX抑制剂还用于减轻非风湿起因的炎症性皮肤症状如牛皮癣,这些疾病中减轻前列腺素过度生成导致的发炎具有直接的好处(Fogh等(1993)Acta Derm.Venerenol(Oslo)73:191-3)。 
除了它们作为抗炎药剂的应用外,COX抑制剂的另一个有潜力的作用是治疗癌症。经证实在各种人恶性肿瘤中COX-2过度表达,且COX-2抑制剂显示对动物皮肤、乳房和膀胱肿瘤的治疗有效。尽管不明白其作用的机制,但COX-2的过度表达显示出抑制致瘤细胞种类的凋亡并增强 其侵袭力(Dempke等(2001)J.Can.Res.Clin.Oncol.127:411-17;Moore和Simmons(2000)Current Med.Chem.7:1131-44)。增强由于COX-2过度表达导致的前列腺素的生成有可能促进细胞增生并因此增加血管生成(Moore(1985)Prostanoids:Pharmacological,Physiological and ClinicalRelevance,Cambridge University Press,N.Y.,pp.229-30;Fenton等(2001)Am.J.Clin.Oncol.24:453-57)。 
已经有许多临床研究对COX-2抑制剂在预防和治疗不同种类的癌症中的潜在应用进行了评价。1999年在美国有130,000结直肠癌新病例确诊。阿司匹林,一种非特异性NSAID,经发现能够减少结直肠癌发病率40-50%(Giovannucci等(1995)N.Engl.J.Med.333:609-614)和死亡率50%(Smalley等(1999)Arch.Intern.Med.159:161-166)。1999年FDA批准了用于FAP(家族性腺瘤性息肉)的COX-2抑制剂以减少结直肠癌的死亡率。据信,COX-2抑制剂可以成功防止和/或治疗有证据表明COX-2参与其中的其他癌症,包括但不限于食道癌、头和颈癌、乳腺癌、膀胱癌、宫颈癌、前列腺癌、干细胞性肝癌和非小细胞肺癌(Jaeckel等(2001)Arch.Otolarnygol.127:1253-59;Kirschenbaum等(2001)Urology58:127-31;Dannhardt和Kiefer(2001)Eur.J.Med.Chem.36:109-26)。还可证明COX-2抑制剂能够有效预防高危患者的结肠癌。同样有证据表明COX-2抑制剂可以预防或甚至消除几种威胁生命的癌症。迄今为止,多达50例的研究表明COX-2抑制剂可以预防动物癌变前和恶化的肿瘤,并还可能预防膀胱、食道和皮肤癌症。可以证明,COX-2抑制剂是本世纪最重要的预防医学成就之一。 
近来科学进展确认了COX-2表达、普通炎症以及阿尔茨海默氏病(AD)之间的联系(Ho等(2001)Arch.Neurol.58:487-92)。在动物模型中,COX-2酶过度表达的转基因小鼠具有易受损伤的神经元。国家衰老研究所(NIA)正在启动一项新的临床研究以确定NSAID是否能够延缓 阿尔茨海默氏病的进展。将对萘普生(一种非特异性NSAID)和罗非考昔(Vioxx,一种COX-2特异性选择性NSAID)进行评价。先前的证据表明炎症促进阿尔茨海默氏病。据阿尔茨海默氏病协会和NIA表示,美国大约有4百万人患有AD,并且预计到世纪中将达到1400万。 
COX酶(也称为前列腺素H2合酶)催化两个独立反应。在第一个反应中,AA经代谢形成不稳定的前列腺素G2(PGG2),这是环氧合酶反应。在第二个反应中,PGG2转化为内过氧化物(PGH2),这是过氧化物酶反应。短命PGH2无需酶即降解为PGE2。此处所述化合物是下述发现策略的结果,该发现策略是将一聚焦于COX-1和COX-2过氧化物酶活性的分析法与一种识别新COX酶抑制剂的去复制(dereplication)方法加以结合。 
术语基因表达经常用于形容mRNA生成和蛋白合成的广泛结果。事实上,实际基因表达的变化可能根本不导致蛋白质水平可观察的变化。其推论,蛋白质水平的变化不总是起因于基因表达的变化也可为真。由染色体组DNA到功能蛋白的途径中存在6个可能的调节点:(1)核因子及其他导致前mRNA生成的信号的转录调节;(2)前mRNA加工调节包括外显子剪接、5’位帽子结构和3’位聚腺苷化序列的附加以及成熟mRNA从细胞核到细胞质的转运;(3)mRNA转运调节,其控制mRNA到转译成为蛋白质的特定细胞质位点的定位;(4)mRNA降解调节,其在任何蛋白转译之前或作为从特定mRNA结束转译的方法控制mRNA库的大小;(5)蛋白质转译起始的特定速率的转译调节;以及(6)转译后加工调节包括如糖基化和蛋白水解断裂的修饰。在基因研究领域中,重要的是应用技术,该技术测量的是接近于初始步骤(例如mRNA水平)而不是该途径中后续步骤的基因表达水平(例如蛋白质水平)。 
最近的报道提出可以引入从药用植物黄芩中分离出的类黄酮改变cox-2基因的表达(Wakabayashi和Yasui(2000)Eur.J.Pharmacol. 406:477-481;Chen等(2001)Biochem.Pharmacol.61:1417-1427;Chi等(2001)61:1195-1203以及Raso等(2001)Life Sci.68:921-931)。所有上述引用的对cox-2基因表达的研究都使用Western Blot技术评价未经在分子水平确认的推定的基因表达的改变。由于该方法仅测定蛋白质水平而非具体转录产物mRNA,导致蛋白质表达的观察到的增加的原因有可能包括其他机制。例如,据报道LPS通过在3’非编码区(3’UTR)发现的不稳定序列调节mRNA的半衰期(Watkins等(1999)Life Sci.65:449-481),其对基因转录速率不变而蛋白质表达增加做出解释。因此,这些治疗情况是否会带来基因表达有意义的改变这一问题仍需考虑。 
如RT-qPCR和DNA微阵列分析的技术依靠在mRNA水平进行分析,并且可用于在不同的条件下,例如有或无药物试剂存在的条件下对基因表达水平进行评价。在以无取代B环类黄酮或黄烷作为治疗剂应用时,文献中没有公知的使用直接或间接特定地测定mRNA数量的技术的报道。 
类黄酮是一种广泛分布的天然产物。经证实类黄酮的摄取与发生痴呆的危险逆相关。尽管不知道其作用机制,但据推测其归因于类黄酮的抗氧化作用(Commenges等(2000)Eur.J.Epidemiol.16:357-363)。多元酚黄酮通过在mRNA水平作用于包括cox-2、核因子κB(NFκB)和bcl-X(L)的基因,从而在变性的结肠细胞(colonocytes)中引发程序性细胞死亡、分化和生长抑制(Wenzel等(2000)Cancer Res.60:3823-3831)。据报道,B环羟基的数目在cox-2转录活性的抑制中起重要作用(Mutoh等(2000)Jnp.J.Cancer Res.91:686-691)。 
无取代B环黄酮和黄酮醇是一类特殊的类黄酮,如下列结构通式所示,其芳香B环上无取代基(本文称作无取代B环类黄酮): 
Figure G2009101641172D00071
其中 
R1、R2、R3、R4和R5独立地选自以下组中:-H、-OH、-SH、-OR、-SR、-NH2、-NHR、-NR2、-NR3 +X-,碳、氧、氮或硫,单个或者多个糖结合的糖苷,该糖包括但不限于戊醛糖、甲基戊醛糖、己醛糖、己酮糖以及它们的化学衍生物; 
其中 
R是具有1-10个碳原子的烷基;以及 
X选自药物学可接受的抗衡阴离子,其包括但不限于羟基、氯离子、碘离子、硫酸根、磷酸根、乙酸根、氟离子、碳酸根等。 
无取代B环类黄酮相对稀少。在9396种合成或从天然来源分离的类黄酮中,已知仅有231种无取代B环类黄酮(The Combined ChemicalDictionary,Chapman & Hall/CRC,5∶1版e 2001年6月)。据报道,无取代B环类黄酮具有种种生物活性。例如,高良姜精(3,5,7-三羟基黄酮)起抗氧化剂和自由基清除剂的作用,并且据信是一种有前景的候选抗遗传毒性和癌症化学预防剂(Heo等(2001)Mutat.Res.488:135-150)。其为酪氨酸酶单酚酶抑制剂(Kubo等(2000)Bioorg.Med.Chem.8:1749-1755)、兔心脏羰基还原酶抑制剂(Imamura等(2000)J.Biochem.127:653-658),具有抗菌活性(Afolayan和Meyer(1997)Ethnopharmacol.57:177-181)和抗病毒活性(Meyer等(1997)J.Ethnopharmacol.56:165-169)。贝加因以及另外两种无取代B环类黄酮对人乳腺癌症细胞具有抗增殖活性(So等(1997)Cancer Lett.112:127-133)。 
通常基于类黄酮的有效性随机测定其活性。偶尔地,特定生物活性 强调需要B环上的取代,如与p-糖蛋白高的亲和力结合(Boumendjel等(2001)Bioorg.Med.Chem.Lett.11:75-77),强心作用(Itoigawa等(1999)J.Ethnopharmacol.65:267-272)、抗亚油酸过氧化氢诱导毒性的对内皮细胞的保护作用(Kaneko和Baba(1999)Biosci.Biotechnol.Biochem.63:323-328)、COX-1抑制活性(Wang(2000)Phytomedicine 7:15-19)以及前列腺素内过氧化物合酶活性(Kalkbrenner等(1992)Pharmacology44:1-12)需要B环上被取代。仅有为数不多的出版物提到无取代B环类黄酮中未取代的B环的重要性。一个实例为抑制NADPH醌受体氧化还原酶的2-苯基黄酮作为潜在的抗凝血剂的应用(Chen等(2001)BiochemPharmacol.61:1417-1427)。 
报道的各种无取代B环类黄酮的作用机制存在争议。无取代B环类黄酮柯因(Liang等(2001)FEBS Lett.496:12-18)、沃贡宁(Chi等(2001)Biochem.Pharmacol.61:1195-1203)以及halangin(Raso等(2001)Life Sci.68:921-931)的抗炎活性通过过氧化物酶体增生物活化受体γ(PPARγ)的活化以及对脱粒和AA释放的影响从而与诱导型(inducible)环氧合酶和一氧化氮合酶的抑制有关(Tordera等(1994)Z.Naturforsch[C]49:235-240)。据报道,木蝴蝶素、贝加因和沃贡宁抑制12-脂氧合酶活性而不影响环氧合酶(You等(1999)Arch.Pharm.Res.22:18-24)。新近据报道,沃贡宁、贝加灵和贝加因的抗炎活性通过抑制由一氧化氮抑制剂和脂多糖诱导的诱导型一氧化氮合酶和cox-2酶生成而产生(Chen等(2001)Biochem.Pharmacol.61:1417-1427)。还有报道显示木蝴蝶素通过抑制NFκB的活化起作用(Chen等(2001)Biochem.Pharmacol.61:1417-1427)。最后,有报道显示沃贡宁抑制巨噬细胞中诱导型PGE2的生成(Wakabayashi和Yasui(2000)Eur.J.Pharmacol.406:477-481)。 
据报道,黄芩根抗炎活性的机理是贝加因对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化以及对Ca2+离子载体A23187诱导的PGE2的释放的抑 制(Nakahata等(1999)Nippon Yakurigaku Zasshi 114,Supp.11:215P-219P;Nakahata等(1998)Am.J.Chin.Med.26:311-323)。据报道显示源自黄芩的贝加灵抑制超抗原葡萄球菌外毒素刺激的T细胞增生和IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及干扰素-γ(IFN-γ)的生成(Krakauer等(2001)FEBS Lett.500:52-55)。因此,贝加灵的抗炎活性与由超抗原活化的前致炎细胞因子调节的信号通路的抑制有关。然而,还有人提出贝加灵的抗炎活性是由于限制它们的生物活性的各种趋化因子的结合(Li等(2000)Immunopharmacol.49:295-306)。近来,有报道表明贝加灵对由凝血酶和凝血酶受体激动肽诱导的粘附分子表达(Kimura等(2001)PlantaMed.67:331-334),以及MAPK级联(Nakahata等(1999)NipponYakurigaku Zasshi 114,Supp 11:215P-219P;Nakahata等(1998)Am.J.ChinMed.26:311-323)的作用。 
中国药用植物黄芩含有大量的无取代B环类黄酮,包括贝加因、贝加灵、沃贡宁和baicalenoside。传统上,该植物用于治疗许多病症,包括清热、泻火、湿温和暑热病;高烧引起的烦渴;痈、溃疡和其他花农的皮肤感染;上呼吸道感染如急性扁桃体炎、咽喉炎和猩红热;病毒性肝炎;肾炎;盆腔炎(pelvitis);痢疾;呕血和鼻出血。该植物传统上还用于预防流产(见Encyclopedia of Chinese Traditional Medicine,上海科技出版社,上海,中国,1998)。临床上,黄芩现用于治疗的病症包括小儿肺炎、小儿细菌性腹泻、病毒性肝炎、急性胆囊炎、高血压、由伤口和外科手术引起的局部急性发炎、支气管哮喘和上呼吸道感染(Encyclopedia of Chinese Traditional Medicine,上海科技出版社,上海,中国,1998)。黄芩的根治疗支气管哮喘的药理学效能据报道与无取代B环类黄酮的存在以及其抑制作用有关,它们可以抑制嗜酸性细胞的与嗜酸性细胞趋化因子相关的补充(Nakajima等(2001)Planta Med.67(2):132-135)。 
迄今为止,许多天然存在的无取代B环类黄酮得以商品化用于各种用途。例如,黄芩提取物的脂质体剂型用于护肤(美国专利5,643,598;5,443,983)。由于对致癌基因具有抑制作用,贝加灵被用于预防癌症(美国专利6,290,995)。贝加灵和其他化合物被用作抗病毒、抗菌和免疫调节剂(美国专利6,083,921)并作为天然的抗氧化剂(波兰专利公开9,849,256)。柯因由于其降低焦虑性质得以应用(美国专利5,756,538)。抗炎类黄酮用于控制和治疗肛门直肠和结肠疾病(美国专利5,858,371)以及抑制脂氧合酶(美国专利6,217,875)。这些化合物与葡糖胺胶原以及其他成分一起制成剂型用于修补和维护结缔组织(美国专利6,333,304)。类黄酮酯含有美容组合物的活性成分(美国专利6,235,294)。于2002年3月1日提出,序列号为10/091,362,名为“Identification ofFree-B-ring Flavonoids as Potent COX-2 Inhibitors”(无取代B环类黄酮作为有效的COX-2抑制剂的鉴定)的美国申请公开了通过向需要的主体给药含有无取代B环类黄酮的组合物或含有无取代B环类黄酮混合物的组合物来抑制环氧合酶COX-2的方法。本文特别引入该申请的整体作为参考。 
日本专利63027435描述了贝加因的提取和富集,日本专利61050921描述了贝加灵的纯化。 
黄烷包括以下述结构通式所表示的化合物: 
Figure G2009101641172D00101
其中 
R1、R2、R3、R4和R5独立地选自以下组中:-H、-OH、-SH、-OCH3、 -SCH3、-OR、-SR、-NH2、-NRH、-NR2、-NR3 +X-,所述取代基的酯包括但不限于没食子酸酯、乙酸酯、肉桂酰基和羟基肉桂酰基酯、三羟基苯甲酰酯和咖啡酰酯、以及它们的化学衍生物;碳、氧、氮或硫,单个或者多个糖结合的糖苷,该糖包括但不限于戊醛糖、甲基戊醛糖、己醛糖、己酮糖以及它们的化学衍生物;二聚、三聚以及其他多聚黄烷; 
其中 
R是具有1-10个碳原子的烷基;以及 
X选自药物学可接受的抗衡阴离子,包括但不限于羟基、氯离子、碘离子、硫酸根、磷酸根、乙酸根、氟离子、碳酸根等。 
儿茶素是一种黄烷,主要发现于金合欢,其具有下列结构: 
Figure G2009101641172D00111
儿茶素既单独又与其他在茶中发现的类黄酮一同起作用,并且其既具有抗病毒又具有抗氧化活性。据证实,儿茶素对病毒性肝炎的治疗有效。其还显示可预防对心脏、肾、肺、脾的氧化损伤,并可抑制胃癌细胞的生长。 
儿茶素与其异构体表儿茶素抑制前列腺素内过氧化物合酶,IC50值为40μM(Kalkbrenner等(1992)Pharmacol.44:1-12)。从4种植物种类Atuna racemosa、Syzygium carynocarpum、Syzygium malaccense和Vantanea peruviana中分离出来的五种黄烷-3-醇衍生物包括(+)-儿茶素和没食子儿茶精相对于COX-1对COX-2显示出同等或较弱的抑制作用,其IC50值从3.3μM到138μM变化(Noreen等(1998)Planta Med.64:520-524)。从Ceiba pentandra皮中分离出的(+)-儿茶素抑制COX-1的IC50值为80μM(Noreen等(1998)J.Nat.Prod.61:8-12)。可从商业途径 得到的纯(+)-儿茶素抑制COX-1的IC50值视试验条件而定,约为183到279μM,对COX-2不具有选择性(Noreen等(1998)J.Nat.Prod.61:1-7)。 
绿茶儿茶素当补充加入至Sprague dawley雄性大鼠的膳食中时,降低了血小板PLA2的活性水平并显著减少了血小板环氧合酶水平(Yang等(1999)J.Nutr.Sci.Vitaminol.45:337-346)。儿茶素和表儿茶素据报道可微弱抑制cox-2基因在人结肠癌DLD-1细胞中的转录(IC50=415.3μM)(Mutoh等(2000)Jpn.J.Cancer Res.91:686-691)。(+)-儿茶素保护神经不受红葡萄酒侵害的能力源自儿茶素的抗氧化剂性能,而不是其对细胞内酶类如环氧合酶、脂氧合酶或一氧化氮合酶的抑制作用(Bastianetto等(2000)Br.J.Pharmacol.131:711-720)。由绿茶和红茶中纯化而得的儿茶素衍生物如表没食子儿茶精-3-没食子酸酯(EGCG)、表没食子儿茶精(EGC)、表儿茶素-3-没食子酸酯(ECG)和茶黄素,其显示出对人结肠粘膜和结肠肿瘤组织中AA的环氧合酶和脂氧合酶依赖性代谢(Hong等(2001)Biochem.Pharmacol.62:1175-1183)以及诱导型cox-2基因表达和PGE2生成的抑制(Park等(2001)Biochem.Biophys.Res.Commun.286:721-725)。由Celastrus orbiculatus的气生部分分离得到的表阿夫儿茶精展现出剂量依赖性COX-1活性抑制,其IC50值为15μM,并且据证实,在口服100mg/kg剂量之后其对角叉菜胶诱导的鼠踝肿胀具有抗炎活性(Min等(1999)Planta Med.65:460-462)。 
儿茶素及其源自各种植物特别是从绿茶叶子的衍生物被用于治疗HPV感染的尖锐湿疣(Cheng,美国专利5,795,911)以及治疗由乳头状瘤病毒引起的增生(Cheng,美国专利5,968,973和6,197,808)。儿茶素及其衍生物还被局部用于如皮肤癌、牛皮癣、蜘蛛血管(spider vein)或下出射光瞳(under eye circle)等病症中(Anderson,美国专利6,248,341)、用于对抗UVB诱导的小鼠肿瘤发生(Agarwal等(1993)Photochem.Photobiol.58:695-700)、用于在基因表达和酶活性水平抑制一氧化氮合酶 (Chan,美国专利5,922,756)、以及用作生发剂(Takahashi,美国专利6,126,940)。基于儿茶素的化合物还被与其他提取物和维生素一同配制成治疗痤疮(Murad,美国专利5,962,517)、硬化消化器组织(Shi,美国专利5,470,589)和用于在治疗雄激素紊乱相关的疾病及癌症中抑制5α-还原酶活性的剂型(Liao,美国专利5,605,929)。绿茶提取物与其他7种植物提取物配制成通过抑制COX-2酶消炎的制剂,而没有确定任何具体有效成分(Mewmark,美国专利6,264,995)。 
金合欢是豆科树木和灌木属。金合欢属包括多于1000种属于豆科及含羞草亚科的物种。金合欢分布于全世界如中、南美洲的热带和亚热带地区,非洲、亚洲部分地区以及具有最多特有品种的澳洲。金合欢主要生于森林经常为空旷多刺灌木状态的干燥干旱地区。金合欢属主要根据叶子形态学分为三个亚属——金合欢、Aculiferum和Heterophyllum。金合欢可分为两种常见组群——典型的二回羽状叶品种和叶状柄品种。叶状柄是扩展为叶状结构没有小叶的改良的叶柄,其为对旱生植物条件的适应。典型的二回羽状叶品种主要发现于遍及热带,而叶状柄品种则主要生于澳洲。据报道,印度具有40多种金合欢品种。Gamble在其名为“Flora of Madras Presidency”的书中列出23种南印度的本土品种,其中15种发现于泰米尔纳德。但从那时起,许多新金合欢品种被引进到印度,并且如今单在泰米尔纳德一处即有大约40个品种。本土的品种主要是多刺树木或灌木,少数为多刺的蔓生草木,如A.caesia、蛇藤和藤金合欢。许多品种为从非洲和澳洲引入,包括具有二回羽状叶的黑荆树、A.picnantha和白粉金合欢和叶状柄品种大叶相思、A.holoserecia和马占相思。 
金合欢有重大的经济意义,其提供了鞣质、树胶、木材、燃料和饲料的原料。鞣质主要从树皮中分离得到,被广泛用于鞣制皮革和碎革。一些金合欢树皮还用于当地醑剂的调味。如藤金合欢的一些成分也产出 皂苷,其为各种植物多糖中的任何一种,当与水一同混合并搅拌时,形成象肥皂的泡沫。皂苷用于洗涤剂、发泡剂和乳化剂。金合欢属的一些物种花气味芬芳因此用于生产香水。例如,金合欢香水从A.ferrugenea中得到。许多金合欢的心材用于制造农业工具,还是木柴的来源。金合欢树胶广泛用于药物和甜点,并用作纺织工业中的定型和修整材料。紫胶虫可在数个品种上生长,包括阿拉伯胶金合欢和儿茶。一些品种被用于荒地造林,包括阿拉伯胶金合欢,其可抵挡洪水泛滥,并且一些同种地区已成为鸟类避难所。 
迄今为止,约从各种金合欢品种中分离出330种化合物。类黄酮为一类水溶性植物颜料,其为从金合欢种分离出的主要类型的化合物。已鉴定有大约180种不同的类黄酮,其中110种为黄烷。萜类是从金合欢属物种中分离出的第二大类化合物,已鉴定48种化合物。从金合欢中分离出的其他类型化合物包括生物碱(28)、氨基酸/肽(20)、鞣质(16)、烃类(15)、含氧杂环(15)和脂肪族化合物(10)(Buckingham,TheCombined Chemical Dictionary,Chapman & Hall CRC,5:2版,Dec.2001)。 
所有金合欢品种中具有中等到高浓度的酚类化合物,特别是黄烷(Abdulrazak等(2000)J.Anim.Sci.13:935-940)。在历史上,金合欢属的大多数植物和提取物被用作收敛药治疗胃肠道紊乱、腹泻、消化不良以及止血(Vautrin(1996)Universite Bourgogne(France)European abstract58-01C:177;Saleem等(1998)Hamdard Midicus.41:63-67)。A.ArabicaWilld.的树皮和荚中含有大量的鞣质,因此被用作收敛药和祛痰药(Nadkarni(1996)India Materia Medica,Bombay Popular Prakashan,pp.9-17)。据报道,从来自索马里的A.tortilis的树皮中分离出的二芳基丙醇衍生物具有松弛平滑肌作用(Hagos等(1987)Planta Med.53:27-31,1987)。还有报道指出分离自胜利金合欢的萜类糖苷对二甲基苯并蒽诱导的鼠皮致癌作用具有抑制作用(Hanausek等(2000)Proc.Am.Assoc.Can. Res.Annu.Mtg.41:663)且诱发细胞凋亡(Haridas等(2000)Proc.Am.Assoc.for Can.Res.Annu.Mtg.41:600)。据报道阿拉伯胶金合欢的植物提取物具有致痉、血管收缩和抗高血压作用(Amos等(1999)PhytotherapyResearch 13:683-685;Gilani等(1999)Phytotherapy Research 13:665-669),以及抗血小板凝集作用(Shah等(1997)Gen.Pharmacol.29:251-255)。报道指出阿拉伯胶金合欢具有抗炎活性。据推测,类黄酮、多糖和有机酸为可能的活性成分(Dafallah和Al-Mustafa(1996)Am.J.Chin.Med.24:263-269)。迄今为止,唯一有报道的由金合欢分离的5-脂氧合酶抑制剂为单萜氨甲酰(Seikine等(1997)Chem.Pharm.Bull.(Tokyo)45:148-11)。 
金合欢树胶与其他植物成分配制成剂型用于预防溃疡而没有任何有效成分得以鉴定(Fuisz,美国专利5,651,987)。金合欢树胶还与其他植物成分被配制成剂型并用于通过降低营养组合物的粘度(Chancellor,美国专利5,545,411)改善药物溶出度(Blank,美国专利4,946,684)。 
金合欢树皮提取物在日本申请的专利为作为增白剂外部应用(Abe,日本专利10025238)、作为葡萄糖转移酶抑制剂的牙科应用(Abe,日本专利07242555)、作为蛋白质合成抑制剂(Fukai,日本专利07165598)、作为活性氧清除剂用于外部皮肤制剂(Honda,日本专利0717847,Bindra美国专利6,1266,950),以及作为透明质酸酶抑制剂口服用于预防炎症、花粉热和咳嗽(Ogura,日本专利07010768)。 
文献的综述揭示,没有人类临床应用使用无取代B环类黄酮和黄烷混合物缓解疼痛或测定用于治疗骨关节炎的生化临床结果。本报告看来是这些化合物在人中最早的随机、双盲、安慰剂对照的安全性和有效性试验。 
发明内容
本发明包括一种由无取代B环类黄酮和黄烷混合物组成的新型组合物。本文中新型组合物是指UnivestinTM。在组合物中无取代B环类黄酮与黄烷的比例可根据预防和治疗特定疾病和病症有关的适应症和特殊需要进行调节。通常无取代B环类黄酮与黄烷的比例范围为99∶1无取代B环类黄酮比黄烷到1∶99无取代B环类黄酮比黄烷。在本发明的具体实施方案中,无取代B环类黄酮与黄烷的比例选自以下组中:约90∶10、80∶20、70∶30、60∶40、50∶50、40∶60、30∶70、20∶80和10∶90。在本发明优选的实施方案中,组合物中无取代B环类黄酮与黄烷的比例为约85∶15。在优选的实施方案中无取代B环类黄酮从一种或多种黄芩属植物中分离,黄烷从一种或多种金合欢属植物中分离。 
本发明还包括可同时有效地既抑制COX-2又抑制5-LO的方法。该同时双重抑制COX-2和5-LO通道的方法包括向需要的主体给药含有合成和/或从一种或多种植物中分离的无取代B环类黄酮和黄烷的混合物的组合物。该方法的有效性由纯化的酶在不同的细胞系、多种动物模型以及最终人类临床试验中得以证实。组合物中无取代B环类黄酮与黄烷的比例范围可为99∶1无取代B环类黄酮比黄烷到1∶99无取代B环类黄酮比黄烷。在本发明的具体实施方案中,无取代B环类黄酮与黄烷的比例选自以下组中:约90∶10、80∶20、70∶30、60∶40、50∶50、40∶60、30∶70、20∶80和10∶90。在本发明优选的实施方案中,组合物中无取代B环类黄酮与黄烷的比例为约85∶15。在优选的实施方案中无取代B环类黄酮从一种或多种黄芩属植物中分离,黄烷从一种或多种金合欢属植物中分离。 
本发明还包括预防和治疗COX-2和5-LO诱导的疾病和病症的方法,包括但不限于月经痛、动脉硬化、心脏病发作、肥胖症、糖尿病、X综合症、阿尔茨海默氏病、呼吸过敏反应、慢性静脉功能不全、痔疮、系统性红斑狼疮、牛皮癣、慢性紧张性头痛、偏头痛、炎症性肠疾病,由 病毒、细菌和真菌引起的感染,晒伤、热灼伤、接触性皮炎、黑素瘤和癌瘤。治疗和预防由COX-2和5-LO诱导的疾病和病症的方法包括向需要的主体给药有效量的含有合成和/或从一种或多种植物中分离的无取代B环类黄酮和黄烷的混合物以及药物学可接收载体的组合物。无取代B环类黄酮与黄烷的比例范围可为99∶1无取代B环类黄酮比黄烷到1∶99无取代B环类黄酮比黄烷。在本发明的具体实施方案中,无取代B环类黄酮与黄烷的比例选自以下组中:约90∶10、80∶20、70∶30、60∶40、50∶50、40∶60、30∶70、20∶80和10∶90。在本发明优选的实施方案中,组合物中无取代B环类黄酮与黄烷的比例为约85∶15。在优选的实施方案中无取代B环类黄酮从一种或多种黄芩属植物中分离,黄烷从一种或多种金合欢属植物中分离。 
在另一实施方案中,本发明包括治疗一般关节疼痛和僵硬、改善活动能力和身体机能以及预防和治疗骨关节炎和类风湿性关节炎病理症状的方法。治疗关节疼痛和僵硬、改善活动能力和身体机能以及预防和治疗骨关节炎和类风湿性关节炎病理症状的方法包括向需要的主体给药有效量的含有合成和/或从一种或多种植物中分离的无取代B环类黄酮和黄烷的混合物以及药物学可接收载体的组合物。无取代B环类黄酮与黄烷的比例范围可为99∶1无取代B环类黄酮比黄烷到1∶99无取代B环类黄酮比黄烷。在本发明的具体实施方案中,无取代B环类黄酮与黄烷的比例选自以下组中:约90∶10、80∶20、70∶30、60∶40、50∶50、40∶60、30∶70、20∶80和10∶90。在本发明优选的实施方案中,组合物中无取代B环类黄酮与黄烷的比例为约85∶15。在优选的实施方案中无取代B环类黄酮从一种或多种黄芩属植物中分离,黄烷从一种或多种金合欢属植物中分离。 
本发明包括由于活动能力、柔性和身体机能改善而增加身体活动度从而减轻体重和控制血糖的方法,所述方法包括向需要的主体给药有效量的含有合成和/或从一种或多种植物中分离的无取代B环类黄酮和黄 烷的混合物以及药物学可接收载体的组合物。无取代B环类黄酮与黄烷的比例范围可为99∶1无取代B环类黄酮比黄烷到1∶99无取代B环类黄酮比黄烷。在本发明的具体实施方案中,无取代B环类黄酮与黄烷的比例选自以下组中:约90∶10、80∶20、70∶30、60∶40、50∶50、40∶60、30∶70、20∶80和10∶90。在本发明优选的实施方案中,组合物中无取代B环类黄酮与黄烷的比例为约85∶15。在优选的实施方案中无取代B环类黄酮从一种或多种黄芩属植物中分离,黄烷从一种或多种金合欢属植物中分离。 
本发明还包括一种调节与疼痛通道有关的mRNA的生成的方法,所述方法包括向需要的主体给药有效量的含有合成和/或从一种或多种植物中分离的无取代B环类黄酮和黄烷的混合物以及药物学可接收载体的组合物。尽管不受理论的限制,申请人相信调节mRNA生成的能力是由无取代B环/黄烷组合物的活性成分通过降低由cox-2基因而不是cox-1基因生成的mRNA的生成实现的。无取代B环类黄酮与黄烷的比例范围可为99∶1无取代B环类黄酮比黄烷到1∶99无取代B环类黄酮比黄烷。在本发明的具体实施方案中,无取代B环类黄酮与黄烷的比例选自以下组中:约90∶10、80∶20、70∶30、60∶40、50∶50、40∶60、30∶70、20∶80和10∶90。在本发明优选的实施方案中,组合物中无取代B环类黄酮与黄烷的比例为约85∶15。在优选的实施方案中无取代B环类黄酮从一种或多种黄芩属植物中分离,黄烷从一种或多种金合欢属植物中分离。 
此处所述无取代B环类黄酮也指可根据以下的发明应用的无取代B环黄烷和黄酮醇,包括以下结构通式所示的化合物: 
Figure G2009101641172D00181
其中 
R1、R2、R3、R4和R5独立地选自以下组中:-H、-OH、-SH、-OR、-SR、-NH2、-NHR、-NR2、-NR3 +X-,碳、氧、氮或硫,单个或者多个糖结合的糖苷,该糖包括但不限于戊醛糖、甲基戊醛糖、己醛糖、己酮糖以及它们的化学衍生物; 
其中 
R是具有1-10个碳原子的烷基;以及 
X选自药物学可接受的抗衡阴离子,其包括但不限于羟基、氯离子、碘离子、硫酸根、磷酸根、乙酸根、氟离子、碳酸根等。 
可根据以下发明应用的黄烷包括以下的结构通式所示的化合物: 
Figure G2009101641172D00191
其中 
R1、R2、R3、R4和R5独立地选自以下组中:-H、-OH、-SH、-OCH3、-SCH3、-OR、-SR、-NH2、-NRH、-NR2、-NR3 +X-,所述取代基的酯,包括但不限于没食子酸酯、乙酸酯、肉桂酰基和羟基肉桂酰基酯、三羟基苯甲酰酯和咖啡酰酯、以及它们的化学衍生物;碳、氧、氮或硫,单个或者多个糖结合的糖苷,该糖包括但不限于戊醛糖、甲基戊醛糖、己醛糖、己酮糖以及它们的化学衍生物;二聚、三聚以及其他多聚黄烷; 
其中 
R是具有1-10个碳原子的烷基;以及 
X选自药物学可接受的抗衡阴离子,其包括但不限于羟基、氯离子、碘离子、硫酸根、磷酸根、乙酸根、氟离子、碳酸根等。 
本发明的无取代B环类黄酮可由合成方法获得,或从下列各科植物中提取,包括但不限于番荔枝科、菊科(Asteraceae)、紫葳科、使君子 科、菊科(Compositae)、大戟科、唇形科、樟科(Lauranceae)、豆科、桑科、松科、凤尾蕨科、中国蕨科、榆科和姜科。该无取代B环类黄酮可由高等植物属提取、浓缩和纯化,包括但不限于假鹰爪属、Achyrocline、木蝴蝶属、Buchenavia、香青属、山芫荽属、鼠麴草属、蜡菊属、矢车菊属、泽兰属、Baccharis、乌桕属、黄芩属、Molsa、羽萼木属、水苏属、牛至属、新塔花属、山胡椒属、黄肉楠属、金合欢属、鱼藤属、甘草属、鸡血藤属、水黄皮属、灰毛豆属、木波罗属、榕属、粉叶蕨属、隐囊蕨属、松属、榆属和山姜属。 
如上所述,本发明的黄烷可由选自金合欢属的一种或多种植物中提取而来。在一个优选的实施方案中该植物选自以下组中:儿茶、A.concinna、金合欢、阿拉伯胶树、A.speciosa、阿拉伯金合欢、A.caesia、蛇藤、藤金合欢、黑荆树、A.picnantha、白粉金合欢、大叶相思、A.holoserecia和马占相思。 
本发明包括用不同的酶和体内模型对不同的无取代B环类黄酮和黄烷进行评价以优化剂型得到最佳效果。该组合物的有效性和安全性通过人类临床试验得以证实。本发明提供可用于商业上分离、纯化以及将Acacia黄烷与无取代B环类黄酮组合以得到具有所需生理活性的组合物的方法。本发明组合物可以本领域普通技术人员所知的任意方法给药。给药方式包括但不限于肠内(口服)给药、非胃肠道给药(静脉、皮下和肌肉)给药和局部应用。本发明治疗方法包括需要的主体内服或外敷有效量的合成和/或从一种或多种植物中分离的无取代B环类黄酮和黄烷的混合物。 
应理解为前述总体描述及下述详细描述都仅是举例说明和解释,而并非对所要求保护的本发明的限制。 
附图说明
图1图示为源自儿茶的HTP部分对COX-1和COX-2的抑制。该提取物的提取和分离如实施例1和实施例3所述。对该提取物对重组绵羊COX-1(■)或绵羊COX-2(◆)过氧化物酶活性抑制的测定如实施例2所述。数据显示为未经处理的对照的百分比。 
图2图示为源自黄芩的HTP部分对COX-1和COX-2的抑制。该提取物的提取和分离如实施例1和实施例3所述。对该提取物对重组绵羊COX-1(■)或绵羊COX-2(◆)过氧化物酶活性抑制的测定如实施例2所述。数据显示为未经处理的对照的百分比。 
图3为从黄芩(lot#RM052302-01)分离得到的无取代B环类黄酮含量为82.2%的标准化的提取物的HPLC色谱图。用HPLC/PDA/MS阐释出十种结构,为贝加灵、沃贡宁-7-葡糖苷酸、木蝴蝶素A7-葡糖苷酸、贝加因、沃贡宁、柯因-7-葡糖苷酸、去甲沃贡宁-7-葡糖苷酸、黄芩素、柯因和木蝴蝶素A。 
图4图示为分离和纯化自黄芩的贝加因对COX-1和COX-2的抑制图。测定该提取物对重组绵羊COX-1(◆)或绵羊COX-2(■)过氧化物酶活性的抑制。数据显示为没有抑制剂的试验对抑制剂浓度(μg/mL)的抑制百分比。对COX-1的IC50经计算为0.18μg/mL/酶单位,对COX-2的IC50经计算为0.28μg/mL/酶单位。 
图5图示为分离和纯化自黄芩的贝加灵对COX-1和COX-2的抑制图。测定该提取物对重组绵羊COX-1(◆)或绵羊COX-2(■)过氧化物酶活性的抑制。数据显示为没有抑制剂的试验对抑制剂浓度(μg/mL)的抑制百分比。对COX-1的IC50经测定为0.44μg/mL/酶单位,对COX-2的IC50经测定为0.28μg/mL/酶单位。 
图6图示为分离自黄芩的无取代B环类黄酮提取物(基于HPLC测定含83%贝加灵)对COX-1和COX-2的抑制图。测定该提取物对重组 绵羊COX-1(◆)或绵羊COX-2(■)过氧化物酶活性的抑制。数据显示为没有抑制剂的试验对抑制剂浓度(μg/mL)的抑制百分比。对COX-1的IC50经计算为0.24μg/mL/酶单位,对COX-2的IC50经计算为0.48μg/mL/酶单位。 
图7图示为分离和纯化自儿茶的儿茶素对COX-1和COX-2的抑制图。测定该提取物对重组绵羊COX-1(◆)或绵羊COX-2(■)过氧化物酶活性的抑制。数据显示为没有抑制剂的试验对抑制剂浓度(μg/mL)的抑制百分比。对COX-1的IC50测定为0.11μg/mL/酶单位,对COX-2的IC50经测定为0.42μg/mL/酶单位。 
图8图示为分离和纯化自儿茶的经含有50%总儿茶素的标准化的黄烷提取物对COX-1和COX-2的抑制图。测定该提取物对重组绵羊COX-1(◆)或绵羊COX-2(■)过氧化物酶活性的抑制。数据显示为没有抑制剂的试验对抑制剂浓度(μg/mL)的抑制百分比。对COX-1的IC50经计算为0.17μg/mL/酶单位,对COX-2的IC50经测定为0.41μg/mL/酶单位。 
图9描述用80%甲醇水溶液提取自儿茶的黄烷的HPLC色谱图。 
图10图示为纯化自儿茶的黄烷对5-LO的抑制图。测定该化合物对重组马铃薯5-脂氧合酶活性(◆)的抑制。数据显示为没有抑制剂的试验对抑制剂浓度(μg/mL)的抑制百分比。对5-LO的IC50为1.38μg/mL/酶单位。 
图11图示为如实施例14所述的无取代B环类黄酮与黄烷以85∶15的比例结合得到的UnivestinTM组合物对COX-1和COX-2的抑制图。测定UnivestinTM对重组绵羊COX-1(◆)或绵羊COX-2(■)过氧化物酶活性的抑制。数据显示为没有抑制剂的试验对抑制剂浓度(μg/mL)的抑制百分比。对COX-1的IC50为0.76μg/mL/酶单位,对COX-2的IC50为0.80μg/mL/酶单位。 
图12图示为如实施例14所述的无取代B环类黄酮与黄烷以50∶50的比例结合得到的UnivestinTM组合物对COX-1和COX-2的抑制图。测定UnivestinTM对重组绵羊COX-1(◆)或绵羊COX-2(■)过氧化物酶活性的抑制。数据显示为没有抑制剂的试验对抑制剂浓度(μg/mL)的抑制百分比。对COX-1的IC50为0.38μg/mL/酶单位,对COX-2的IC50为0.84μg/mL/酶单位。 
图13图示为如实施例14所述的无取代B环类黄酮与黄烷以20∶80的比例结合得到的UnivestinTM组合物对COX-1和COX-2的抑制图。测定UnivestinTM对重组绵羊COX-1(◆)或绵羊COX-2(■)过氧化物酶活性的抑制。数据显示为没有抑制剂的试验对抑制剂浓度(μg/mL)的抑制百分比。对COX-1的IC50为0.18μg/mL/酶单位,对COX-2的IC50为0.41μg/mL/酶单位。 
图14描述在THP-1或HT-29细胞中(ATCC)以ELISA测定的提高UnivestinTM浓度对LPS诱导的新合成的LTB4(◆)的作用。合并提取物的活性以诱导的LTB4合成的%抑制率表示。 
图15是如实施例16中所示,将以ELISA测定的在未诱导的细胞中以3μg/mL UnivestinTM处理后残留在HT-29细胞中的LTB4水平同以3μg/mL布洛芬的处理进行比较。 
图16是将各种UnivestinTM浓度对cox-1和cox-2基因表达的影响进行比较。将表达水平标准化至18S rRNA表达水平(内参照),然后校正至未处理、无LPS条件。该图证实,在LPS刺激并暴露于UnivestinTM后,cox-2而非cox-1基因表达下降。 
图17是将3μg/mL UnivestinTM对cox-1和cox-2基因表达的作用与同等浓度的其他NSAIDD进行对比。基因水平标准化至18S rRNA表达水平(内标对照),然后校正至未处理、无LPS条件。 
图18图示为测定炎症抑制的方法的耳肿胀数据。将无取代B环类黄 酮与黄烷以80∶20的比例结合得到的UnivestinTM与未处理小鼠以及给予消炎痛(50mg/kg)的小鼠通过口腔灌服进行比较。数据表示为对每只小鼠未处理对比处理过的耳垂的微米级测量的差异。 
图19显示100mg/kg的UnivestinTM(无取代B环类黄酮比黄烷比例为80∶20的标准化提取物)对注射AA的小鼠踝(UnivestinTM+花生四烯酸)的作用与未处理小鼠(未处理+花生四烯酸)、未注射AA的小鼠(阴性对照)或注射液体载体的小鼠(载体对照)进行比较。 
图20图示为以250mg/天剂量的UnivestinTM治疗的基线、30、60和90天时的疼痛指数WOMAC分值的95%置信区间。 
图21图示为以500mg/天剂量的UnivestinTM治疗的基线、30、60和90天时的疼痛指数WOMAC分值的95%置信区间。 
图22图示为以200mg/天剂量的塞来昔布治疗的基线、30、60和90天时的疼痛指数WOMAC分值的95%置信区间。 
图23图示为以安慰剂治疗的基线、30、60和90天时的疼痛指数WOMAC分值的95%置信区间。 
图24图示为以250mg/天剂量的UnivestinTM治疗的基线、30、60和90天时的僵硬指数WOMAC分值的95%置信区间。 
图25图示为以500mg/天剂量的UnivestinTM治疗的基线、30、60和90天时的僵硬指数WOMAC分值的95%置信区间。 
图26图示为以200mg/天剂量的塞来昔布治疗的基线、30、60和90天时的僵硬指数WOMAC分值的95%置信区间。 
图27图示为以安慰剂治疗的基线、30、60和90天时的僵硬指数WOMAC分值的95%置信区间。 
图28图示为以250mg/天剂量的UnivestinTM治疗的基线、30、60和90天时的功能障碍(functional impairment)指数WOMAC分值的95%置信区间。 
图29图示为以500mg/天剂量的UnivestinTM治疗的基线、30、60和90天时的功能障碍指数WOMAC分值的95%置信区间。 
图30图示为以200mg/天剂量的塞来昔布治疗的基线、30、60和90天时的功能障碍指数WOMAC分值的95%置信区间。 
图31图示为以安慰剂治疗的基线、30、60和90天时的功能障碍指数WOMAC分值的95%置信区间。 
图32显示250和500mg/天剂量的UnivestinTM在降低BMI作用方面与200mg/天的塞来昔布及安慰剂的比较。 
图33显示250和500mg/天剂量的UnivestinTM在减轻体重作用方面与200mg/天的塞来昔布及安慰剂的比较。 
图34显示250和500mg/天剂量的UnivestinTM在降血脂作用方面与安慰剂的比较。 
具体实施方式
此处所使用的各种术语提到本发明的多个方面。提供以下定义以帮助阐明本发明组成的说明。 
应注意术语“一个”(“a”或“an”)实体是指一个或多个该实体;例如一种类黄酮指一种或多种类黄酮。同样地,术语“一个”、“一个或多个”和“至少一个”在此处可互相替换。 
此处所用的“无取代B环类黄酮”为一类特殊的类黄酮,如下列结构通式所示,其芳香B环无取代基: 
Figure DEST_PATH_GA20189570200910164117201D00011
其中 
R1、R2、R3、R4和R5独立地选自以下组中:-H、-OH、-SH、-OR、-SR、-NH2、-NHR、-NR2、-NR3 +X-,碳、氧、氮或硫,单个或者多个糖结合的糖苷,该糖包括但不限于戊醛糖、甲基戊醛糖、己醛糖、己酮糖以及它们的化学衍生物; 
其中 
R是具有1-10个碳原子的烷基;以及 
X选自药物学可接受的抗衡阴离子,其包括但不限于羟基、氯离子、碘离子、硫酸根、磷酸根、乙酸根、氟离子、碳酸根等。 
“黄烷”为一类特殊的类黄酮,其通常可由下列结构通式代表: 
Figure G2009101641172D00261
其中 
R1、R2、R3、R4和R5独立地选自以下组中:-H、-OH、-SH、-OCH3、-SCH3、-OR、-SR、-NH2、-NRH、-NR2、-NR3 +X-,取代基的酯,包括但不限于没食子酸酯、乙酸酯、肉桂酰基和羟基肉桂酰基酯、三羟基苯甲酰酯和咖啡酰酯、以及它们的化学衍生物;碳、氧、氮或硫,单个或者多个糖结合的糖苷,该糖包括但不限于戊醛糖、甲基戊醛糖、己醛糖、己酮糖以及它们的化学衍生物;二聚、三聚以及其他多聚黄烷; 
其中 
R是具有1-10个碳原子的烷基;以及 
X选自药物学可接受的抗衡阴离子,其包括但不限于羟基、氯离子、碘离子、硫酸根、磷酸根、乙酸根、氟离子、碳酸根等。 
“基因表达”指从基因到mRNA的转录。 
“蛋白质表达”指从mRNA到蛋白质的转译。 
“RT-qPCR”为将mRNA分子逆转录为cDNA分子,之后使用聚合酶链式反应(PCR)外加荧光报道基团(fluorescent reporter)对基因表达的水平加以定量评价的方法。 
本文所用“有效的”包括治疗和/或预防。当使用时,有效是指人类也指其他动物。 
“药物学或治疗有效的剂量或量”指足以引发所需生物学结果的剂量水平。该结果可以是病征、症状或疾病的起因的缓解或任何其他所需的生物学系统的改变。 
“安慰剂”指由非活性物质对该足以引发所需的可缓解病征、症状或疾病的起因的生物学结果的药物学或治疗有效的剂量或量的替代。 
“主体”或“患者”为向其给药本发明组合物的,为人或动物的生存的对象。 
注意本申请从头到尾提供各种引用。各个引用特定地全部并入本文作为参考。 
本发明包括一种由无取代B环类黄酮和黄烷混合物组成新型组合物。本文中新型组合物是指UnivestinTM。在组合物中无取代B环类黄酮比黄烷的比例可根据预防和治疗特定疾病和病症有关的适应症和特殊需要进行调节。通常无取代B环类黄酮与黄烷的比例范围为99∶1无取代B环类黄酮比黄烷到1∶99无取代B环类黄酮比黄烷。在本发明的具体实施方案中,无取代B环类黄酮与黄烷的比例选自以下组中:约90∶10、80∶20、70∶30、60∶40、50∶50、40∶60、30∶70、20∶80和10∶90。在本发明优选的实施方案中,组合物中无取代B环类黄酮与黄烷的比例为约85∶15。在优选的实施方案中无取代B环类黄酮从一种或多种黄芩属植物中分离,黄烷从一种或多种金合欢属植物中分离。 
在本发明一实施方案中,如实施例5、7和13;表5、7、8和9以及图3中所述,标准化的无取代B环类黄酮提取物包含纯度在1-99重量 %之间的总无取代B环类黄酮活性化合物。贝加灵在提取物中是主要活性成分,其含量大约为总无取代B环类黄酮的50-90重量%。在一优选的实施方案中,该标准化提取物含有>70%总无取代B环类黄酮,其中>75%的无取代B环类黄酮是贝加灵。 
在一实施方案中,如在实施例8、9和12;表4、6和9以及图9中所述,标准化的黄烷提取物包含纯度在1-99重量%之间的总黄烷活性化合物。儿茶素在提取物中为主要活性成分,其含量达总黄烷的50-90重量%。在一优选的实施方案中,该标准化黄烷提取物含有>50%总黄烷,其中>70%的黄烷是儿茶素。 
在一实施方案中,通过以比例99∶1到1∶99混合上述两种提取物或合成化合物制备UnivestinTM。如实施例14中所述无取代B环类黄酮比黄烷优选的比例为85∶15无取代B环类黄酮∶黄烷。 
在UnivestinTM中无取代B环类黄酮的浓度可以为从1%到99%,且UnivestinTM中黄烷的浓度可以为从99%到1%。在本发明一个优选的实施方案中,UnivestinTM中总无取代B环类黄酮的浓度约为75%,其中贝加灵的含量为UnivestinTM总重的约60%;UnivestinTM中总黄烷的浓度约为10%,其中儿茶素的含量约为9%。在该实施方案中,UnivestinTM中的总活性成分(无取代B环类黄酮加上黄烷)为>总重量的80%。 
本发明还包括可同时有效地既抑制COX-2又抑制5-LO的方法。该同时双重抑制COX-2和5-LO通道的方法包括向需要的主体给药含有合成和/或从一种或多种植物中分离的无取代B环类黄酮和黄烷的混合物的组合物。组合物中无取代B环类黄酮与黄烷的比例范围可为99∶1无取代B环类黄酮比黄烷到1∶99无取代B环类黄酮比黄烷。在本发明的具体实施方案中,无取代B环类黄酮与黄烷的比例选自以下组中:约90∶10、80∶20、70∶30、60∶40、50∶50、40∶60、30∶70、20∶80和10∶90。在本发明优选的实施方案中,组合物中无取代B环类黄酮与黄烷的比例为约 85∶15。在优选的实施方案中无取代B环类黄酮从一种或多种黄芩属植物中分离,黄烷从一种或多种金合欢属植物中分离。 
本发明还包括预防和治疗COX-2和5-LO诱导的疾病和病症的方法。该治疗和预防由COX-2和5-LO诱导的疾病和病症的方法包括向需要的主体给药有效量的含有合成和/或从一种或多种植物中分离的无取代B环类黄酮和黄烷的混合物以及药物学可接收载体的组合物。无取代B环类黄酮与黄烷的比例范围可为99∶1无取代B环类黄酮比黄烷到1∶99无取代B环类黄酮比黄烷。在本发明的具体实施方案中,无取代B环类黄酮与黄烷的比例选自以下组中:约90∶10、80∶20、70∶30、60∶40、50∶50、40∶60、30∶70、20∶80和10∶90。在本发明优选的实施方案中,组合物中无取代B环类黄酮与黄烷的比例为约85∶15。在优选的实施方案中无取代B环类黄酮从一种或多种黄芩属植物中分离,黄烷从一种或多种金合欢属植物中分离。 
在又一另外的实施方案中,本发明包括治疗一般关节疼痛和僵硬、改善活动能力和身体机能以及预防和治疗骨关节炎和类风湿性关节炎病理症状的方法。治疗关节疼痛和僵硬、改善活动能力和身体机能以及预防和治疗骨关节炎和类风湿性关节炎病理症状的方法包括向需要的主体给药有效量的含有合成和/或从一种或多种植物中分离的无取代B环类黄酮和黄烷的混合物以及药物学可接收载体的组合物。无取代B环类黄酮与黄烷的比例范围可为99∶1无取代B环类黄酮比黄烷到1∶99无取代B环类黄酮比黄烷。在本发明的具体实施方案中,无取代B环类黄酮与黄烷的比例选自以下组中:约90∶10、80∶20、70∶30、60∶40、50∶50、40∶60、30∶70、20∶80和10∶90。在本发明优选的实施方案中,组合物中无取代B环类黄酮与黄烷的比例为约85∶15。在优选的实施方案中无取代B环类黄酮从一种或多种黄芩属植物中分离,黄烷从一种或多种金合欢属植物中分离。 
本发明还包括一种调节与疼痛通道有关的mRNA的生成的方法。所述方法包括向需要的主体给药有效量的含有合成和/或从一种或多种植物中分离的无取代B环类黄酮和黄烷的混合物以及可任选地药物学可接受载体的组合物。无取代B环类黄酮与黄烷的比例范围可为99∶1无取代B环类黄酮比黄烷到1∶99无取代B环类黄酮比黄烷。在本发明的具体实施方案中,无取代B环类黄酮与黄烷的比例选自以下组中:约90∶10、80∶20、70∶30、60∶40、50∶50、40∶60、30∶70、20∶80和10∶90。在本发明优选的实施方案中,组合物中无取代B环类黄酮与黄烷的比例为约85∶15。在优选的实施方案中无取代B环类黄酮从一种或多种黄芩属植物中分离,黄烷从一种或多种金合欢属植物中分离。 
根据本发明方法可以应用的无取代B环类黄酮包括上述提出的结构通式所示的化合物。本发明的无取代B环类黄酮可由合成方法获得,或从下列各科植物中提取,包括但不限于番荔枝科、菊科(Asteraceae)、紫葳科、使君子科、菊科(Compositae)、大戟科、唇形科、樟科(Lauranceae)、豆科、桑科、松科、凤尾蕨科、中国蕨科、榆科和姜科。该无取代B环类黄酮可由高等植物属提取、浓缩和纯化,包括但不限于假鹰爪属、Achyrocline、木蝴蝶属、Buchenavia、香青属、山芫荽属、鼠麴草属、蜡菊属、矢车菊属、泽兰属、Baccharis、乌桕属、黄芩属、Molsa、羽萼木属、水苏属、牛至属、新塔花属、山胡椒属、黄肉楠属、金合欢属、鱼藤属、甘草属、鸡血藤属、水黄皮属、灰毛豆属、木波罗属、榕属、粉叶蕨属、隐囊蕨属、松属、榆属和山姜属。 
无取代B环类黄酮存在于植物的不同部位中,包括但不限于茎、茎皮、嫩枝、块茎、根、根皮、嫩梢、种子、根茎、花及其他生殖器官、叶及其他气生部分。于2002年3月1日递交的名为“Identification ofFree-B-ring Flavonoids as Potent COX-2 Inhibitors”(无取代B环类黄酮作为有效的COX-2抑制剂的鉴定)的第10/091,362号美国申请公开了分离 和纯化无取代B环类黄酮的方法。此处全文并入作为参考。 
根据本发明方法可以应用的黄烷包括上述提出的结构通式所示的化合物。本发明的黄烷可由合成方法获得,或从选自金合欢属植物的一种或多种植物中提取。在一个优选的实施方案中该植物选自以下组中:儿茶、A.concinna、金合欢、阿拉伯胶树、A.speciosa、阿拉伯金合欢、A.caesia、蛇藤、藤金合欢、黑荆树、A.picnantha、白粉金合欢、大叶相思、A.holoserecia和马占相思。 
黄烷存在于植物的不同部位中,包括但不限于茎、茎皮、干、主干树皮、嫩枝、块茎、根、根皮、嫩梢、种子、根茎、花及其他生殖器官、叶及其他气生部分。于2002年3月22日递交的名为“Isolation of a DualCOX-2 and 5-Lipoxygenase Inhibitor form Acacia”(从金合欢分离双重COX-2和5脂氧合酶抑制剂)的第10/104,477号美国申请公开了分离和纯化黄烷的方法。此处全文并入作为参考。 
本发明采用将一系列体内试验及体外生化、细胞和基因表达筛选结合的策略来确定特异地抑制COX-2和5-LO酶活性以及影响cox-2而非cox-1 mRNA生成的活性植物提取物和成分。此处所用确定特异地抑制COX-2和5-LO通道的活性植物提取物和成分的方法记载于实施例1到13(图1-10)。这些方法更为详尽的描述记载于在2002年3月1日递交的名为“Identification of Free-B-ring Flavonoids as Potent COX-2Inhibitors”(无取代B环类黄酮作为有效的COX-2抑制剂的鉴定)的第10/091,362号美国申请以及于2002年3月22日递交的名为“Isolation ofa Dual COX-2 and 5-Lipoxygenase Inhibitor form Acacia”(从金合欢分离双重COX-2和5脂氧合酶抑制剂)的第10/104,477号美国申请中,在此各自具体并入其全文作为参考。 
这些试验导致本文所谓UnivestinTM的新型组合物的发现。其包含两种各自包含无取代B环类黄酮和黄烷的标准化提取物的适当的混合。实 施例14提供了使用两种各自分离自金合欢和黄芩的提取物与一种或多种赋形剂一起制备该组合物的通用实施例。实施例14中所用的金合欢提取物含有>60%为儿茶素和表儿茶素的总黄烷,黄芩提取物含有>70%主要为贝加灵的无取代B环类黄酮。黄芩提取物含有如表11所述的其他少量的无取代B环类黄酮。可任选向组合物中加入一种或多种赋形剂。所加入的赋形剂量可根据所希望的每种成分的实际活性含量加以调整。用于产品的每个单独的批次的混合表必须根据单独批次成分的产品规格和QC结果生成。推荐活性成分范围为2-5%的附加量用以满足产品规格的需要。实施例14举例说明用于一个UnivestinTM批次的所生成的混合表(Lot#G1702-COX-2)。测定UnivestinTM剂型产品的不同混合比例对COX-2和5-LO酶活性的抑制能力和如实施例15-17中所述的减少coxmRNA生成的能力。 
COX-2抑制测定依靠在血红素和花生四烯酸存在下过氧化物酶的活性。为筛选抑制COX-1和COX-2活性的化合物,如实施例2和6所述利用两种酶的过氧化物酶活性的抑制建立了高通量的体外分析方法。在筛选过程中,在分离抑制COX-2活性的植物部分后,通过以固定量的COX-1和COX-2酶进行滴定,将两种单独的标准化的提取物进行比较。其中一种主要由无取代B环类黄酮(分离自黄芩)组成,另一种主要由黄烷(分离自金合欢)组成。对从各个提取物纯化得到的成分以及合并提取物的不同比例同样加以比较。该试验揭示,纯化的无取代B环类黄酮,分离自黄芩的贝加灵和贝加因以及纯化的黄烷,分离自儿茶的儿茶素抑制COX-2和5-LO的活性。此外,每种单独标准化的提取物同样抑制COX-2和5-LO的活性,其含有的无取代B环类黄酮浓度为在10-90%范围内(基于HPLC)且黄烷浓度为在10-90%范围内。该试验最后揭示,含有无取代B环类黄酮比黄烷比例约为80∶20、50∶50和20∶80的、各种单独标准化的提取物的混合物的组合物同样可在体外高效抑制COX-2 酶活性。结果如图11-13所示。 
实施例16描述所实施的下述细胞试验,该试验的目的是5-LO途径中花生四烯酸分解的化合物、即LTB4的抑制。结果如图14和15所示。 
实施例17描述为测定cox-2被UnivestinTM所区别抑制而进行的试验。基因表达数据得自半定量的RT-qPCR测定中,用于解释cox-1和cox-2mRNA生成的抑制。结果如图16和17所示。参照图16可以看出,UnivestinTM抑制cox-2mRNA生成而不影响cox-1基因表达。此外,当与其他COX-2抑制药物比较时,UnivestinTM能够降低LPS刺激的cox-1和cox-2基因表达的增加。重要的是,塞来昔布和布洛芬都增加cox-2基因表达(图17)。 
体内有效性通过如实施例18所示,于小鼠耳部应用皮肤刺激物质如AA并测量以UnivestinTM处理后肿胀的减少得以证实。结果如图18所示。此外,在炎症和疼痛部位的有效性通过如实施例19所示向小鼠踝关节注射刺激物并测量以UnivestinTM处理后肿胀的减少得以测定。结果如图19所示。 
单独标准化的提取物包含无取代B环浓度在10-99%范围内(基于HPLC),黄烷浓度在10-99%范围内(基于HPLC)。采用慢性和急性给药(数据未显示)对其与产品UnivestinTM在小鼠中的毒性进行测定。在慢性给药方案中,口腔灌服小鼠进食待测物每日剂量为90mg/kg(等同于人类每日剂量为500mg)、450mg/kg(五倍每日剂量当量)和900mg/kg(十倍每日剂量当量)。就体重增加、身体外观和行为而言,小鼠未显示任何副作用。总体尸检结果显示无器官异常且与未处理的对照小鼠相比胃部、肾脏和肝脏组织无任何区别。测定电解质、血蛋白、血酶和肝酶的全血检查与未经处理的对照小鼠相比,未出现任何异常。在急性方案中,将包含无取代B环浓度在10-99%范围内(基于HPLC),黄烷浓度在10-99%范围内(基于HPLC)的单独标准化的提取物以及产品 UnivestinTM以2g/kg(20倍每日剂量当量)给药,体重增加、外观、行,总体尸检器官外观,胃部、肾脏、肝脏组织学以及血液检查均未出现任何异常。 
实施例20描述用以评价UnivestinTM缓解疼痛的有效性的临床试验,该疼痛是由膝盖和/或臀部的类风湿性关节炎或骨关节炎引起的。该试验为单中心、随机、双盲、安慰剂对照试验。患有膝盖和/或臀部类风湿性关节炎或骨关节炎60例患者(n=60)随机分为4组并用安慰剂、UnivestinTM(250mg/天或500mg/天)、CelebrexTM(也称为塞来昔布)(200mg/天)治疗90天。如实施例14、表11所示,UnivestinTM包含比例为85∶15的贝加灵含量为82.2%(w/w)且总无取代B环类黄酮>90%(w/w)的黄芩标准化提取物与总黄烷含量为77.2%(w/w)的儿茶标准化提取物。CelebrexTM为处方药的商标名称,该处方药为COX-2选择性抑制剂。表12所示为治疗前(基线分值)和30、60和90天时的疼痛、僵硬和功能WOMAC指数分值。表13所示为治疗前(基线分值)和30、60和90天时的疼痛、僵硬和功能WOMAC指数分值的绝对变化。图20-31为本试验结果的图示,其就所有数据以95%置信区间作图。 
如图20-31所示,与安慰剂相比,在给药UnivestinTM期间WOMAC组合分数以及与疼痛、僵硬和身体功能有关的单独分数显示出显著改善。此外,同处方药CelebrexTM相比,UnivestinTM显示出具有相似的缓解疼痛效果、更好的减轻僵硬效果以及可显著地改善身体功能。在将每一剂量的UnivestinTM与安慰剂和塞来昔布就缓解与骨关节炎和类风湿性关节炎相关的疼痛、僵硬和功能损伤而言进行比较时可以观察到最大的显著性。 
以方差分析模型对每个治疗组对进行的多重事后比较显示在30天(p=0.020)的治疗中,500mg/天的UnivestinTM比200mg/天的塞来昔布对骨关节炎引起的疼痛的减轻显著地更加有效。此外,在30天(p=0.044)、 60天(p=0.032)和90天(p=0.001)中,给药500mg/天的UnivestinTM比安慰剂显著地更有效地减轻疼痛。塞来昔布在200mg/天剂量在治疗60天(p=0.009)时疼痛的减轻对比安慰剂具有显著性。在90天时,500mg/天的UnivestinTM剂量在90天(p=0.038)内的治疗中与250mg/天的剂量相比显著地更加有效。 
250mg/天的UnivestinTM在治疗的30天(p=0.00)、60天(p=0.027)和90天(p=0.015)内比安慰剂对骨关节炎引起的僵硬的减轻显著地更加有效。此外,500mg/天剂量的UnivestinTM在治疗的30天(p=0.001)和90天(p=0.005)内比安慰剂对骨关节炎引起的僵硬的减轻显著地更加有效。200mg/天的塞来昔布仅在治疗30天(p=0.023)时比安慰剂对骨关节炎引起的僵硬的减轻显著地更加有效。 
对于骨关节炎引起的功能损伤的减轻,UnivestinTM比200mg/天的塞来昔布在治疗30天(p=0.010)内显著地更加有效。此外,在治疗30天(p=0.010)、60天(p=0.043)和90天(p=0.039)内,250mg/天剂量的UnivestinTM比安慰剂对骨关节炎引起的功能损伤的减少显著地更加有效。在治疗的30天(p=0.015)、60天(p=0.043)和90天(p=0.039)内,500mg/天的UnivestinTM比200mg/天的塞来昔布对骨关节炎引起的疼痛的减轻显著地更加有效。最后,在治疗的30天(p=0.015)、60天(p=0.016)和90天(p=0.003)内,500mg/天剂量的UnivestinTM比安慰剂对骨关节炎引起的功能损伤的减轻显著地更加有效。 
这些结果提示,UnivestinTM,特别是在500mg/天的剂量时,对骨关节炎引起的疼痛、僵硬的减轻和功能损伤的改善比安慰剂和塞来昔布有效的多。并且,与安慰剂和塞来昔布相比,UnivestinTM以250mg/天的剂量给药时对骨关节炎引起的疼痛、僵硬的减轻和功能损伤的改善也非常有效。塞来昔布对骨关节炎引起的疼痛、僵硬的减轻和功能损伤的改善总体上仅显示出少量的提高。 
除UnivestinTM对骨关节炎引起的疼痛、僵硬的减轻和功能损伤的改善的作用外,实施例21显示UnivestinTM对身体质量指数(BMI)和体重减少的可测量的作用。尽管不受理论所限,该作用可归功于由于服用抗炎药导致的活动能力的提高,也可归功于增加代谢或减少体内脂肪和糖类利用的特殊机制。表14显示在治疗的30和90天后,给药250和500mg/天的UnivestinTM与塞来昔布和安慰剂对体重和BMI的作用。结果如图32和33所示。参照图32和33可以看出,给药250和500mg/天的剂量均导致体重和BMI在30天后显著降低,且体重的降低在90天后几乎加倍。塞来昔布与UnivestinTM相比,对体重和BMI具有较小的作用。 
如实施例21所述,对于重量减轻和BMI,也以方差分析模型对每个治疗组对进行多重时候比较。这些分析显示在治疗30天后,与安慰剂相比,250mg/天和500mg/天剂量的UnivestinTM带来统计学显著的重量减轻(p=0.011vs.p=0.118)。塞来昔布在30天时相对于安慰剂没有带来显著的重量减轻。重量在以250和500mg/天的UnivestinTM治疗的90天中自始至终持续降低,与安慰剂相比具有统计学显著性(p分别等于0.001和0.01)。塞来昔布与安慰剂相比仍然未显示出显著性。对于250mg/天剂量的UnivestinTM,BMI的降低沿袭了类似的趋势,其与安慰剂相比在30天(p=0.008)以及90天(p=0.001)后具有显著性。UnivestinTM500mg/天的剂量显示,在治疗30天时BMI的降低无统计学显著性。然而,在治疗的90天时,BMI的降低达到了统计学显著(p=0.011)。在90天的治疗后,塞来昔布治疗组对安慰剂再次显示出BMI无统计学显著的变化。 
实施例22提示给药UnivestinTM可能影响血糖水平,并且对重量减轻和BMI具有影响。以UnivestinTM开始治疗30天发现血糖水平的可测量差别。在90天,以250和500mg/天UnivestinTM的治疗组均显示出血糖水平的显著下降。塞来昔布对血糖的作用较不显著。结果如表15和图34所示。 
再次地,如实施例22所述,对于血糖也以方差分析模型对每个治疗组对进行多重时候比较。仅有500mg/天剂量的UnivestinTM与安慰剂组相比显示出统计学相关的显著性(30天后,p=0.028;90天后,p=0.022)。但250g/天剂量的UnivestinTM与安慰剂相比血糖水平的变化显示出临床显著性。 
申请人相信于2002年3月22日提出的名为“Isolation of a DualCOX-2 and 5-Lipoxygenase Inhibitor form Acacia”(从金合欢分离双重COX-2和5脂氧合酶抑制剂)的第10/104,477号美国申请为分离自金合欢属植物的证明具有双重COX-2和5-LO特异性的组合物的最初报道,并且在2002年3月1日提出的名为“Identification of Free-B-ringFlavonoids as Potent COX-2 Inhibitors”(无取代B环类黄酮作为有效的COX-2抑制剂的鉴定)的第10/091,362号美国申请为无取代B环类黄酮结构和COX-2抑制活性之间相关性的最初报道。这些发现导致产生一种新型的两种特殊化合物——无取代B环类黄酮和黄烷——的混合物,该混合物用以制备此处所谓UnivestinTM的组合物,其可用于缓解关节疼痛和僵硬,改善活动能力和身体功能以及预防和治疗骨关节炎的病理症状和类风湿性关节炎。 
尽管不限于理论,仍相信该剂型的作用的确定的机制为对COX-2酶过氧化物酶活性和5-LO酶活性两者的直接的抑制,以及所有这些酶的mRNA生成的减少。UnivestinTM还可用于预防和治疗COX-2和5-LO调节的疾病和病症,包括但不限于骨关节炎、类风湿性关节炎、月经痛、动脉硬化、心脏病发作、肥胖症、糖尿病、X综合症、阿尔茨海默氏病、呼吸过敏反应、慢性静脉功能不全、痔疮、系统性红斑狼疮、牛皮癣、慢性紧张性头痛、偏头痛、炎症性肠疾病,由病毒、细菌和真菌引起的感染,晒伤、热灼伤、接触性皮炎、黑素瘤和癌瘤。最后,在人类临床试验中发现由于柔性、活动能力的改善以及身体活性的增加,UnivestinTM 可导致重量减轻以及降低血糖水平。 
本发明还指向包含本发明治疗剂的治疗组合物。直接的本发明的治疗剂可以任意合适的方法给药,包括例如非胃肠道、局部、口服或如通过注射或气雾剂皮下应用的局部给药。给药的特定方式视所要治疗的病症而定。预期本发明的给药可通过任何体液或体液所能达到的任何靶点或任何组织。在本发明的优选实施方案中,该药剂注射给药。这种注射剂可以局部给药至任何受疾病侵袭的区域。治疗组合物可以依赖于给药方法的各种单位剂量形式给药。例如,适于动物口服给药的单位剂量形式包括散剂、片剂、丸剂和胶囊剂。本发明治疗组合物的优选传递方法包括静脉给药和通过例如注射或局部应用的局部给药。本发明治疗剂可给药至任何动物,优选哺乳动物,更优选为人。 
对于传递的特定方式,本发明的治疗组合物可以制成包括如药物学可接受的赋形剂、佐剂和/或载体的其他成分的剂型。例如,本发明的组合物可在所要治疗的动物可以忍受的赋形剂中制成剂型。这种赋形剂的实例包括但不限于纤维素、二氧化硅、葡萄糖结合剂、蔗糖、淀粉羟乙酸钠、磷酸钙、硫酸钙、水、盐水、林格液、右旋糖溶液、甘露醇、汉克氏溶液(Hank’s solution),以及其他含水生理平衡盐溶液。也可使用非水载体如不挥发性油、芝麻油、油酸乙酯或甘油三酸酯。其他有用的组合物包括含有增粘剂的混悬剂,增粘剂如羧甲基纤维素钠、山梨醇或葡聚糖。赋形剂还可含有少量添加剂,如提高等渗性和化学稳定性的物质。缓冲剂的实例包括磷酸盐缓冲剂、碳酸氢盐缓冲剂、三羟甲基氨基甲烷缓冲剂、组氨酸缓冲剂、柠檬酸盐缓冲剂和甘氨酸缓冲剂或它们的混合物。防腐剂的实例包括硫柳汞、m-或o-甲酚、甲醛溶液和苯甲醇。标准组合物可为可注射液体或可被合适的液体吸收成为注射用混悬剂或溶液剂的固体。因此,在非液体组合物中,赋形剂可以含有右旋糖、人血清蛋白、防腐剂等,并可在给药之前向其中加入无菌水或盐水。 
在本发明的一个实施方案中,钙组合物还可包括佐剂或载体。佐剂为在预防和治疗与COX和LO通道有关的适应症中通常提高处方功能的典型物质。合适的佐剂包括但不限于弗氏佐剂;其他细菌细胞壁成分;基于铝的盐类;基于钙的盐类;硅石;硼、组氨酸、硫酸葡糖胺、硫酸软骨素、葡萄糖酸铜、多核苷酸;维生素D、维生素K、类霉素;鲨鱼和牛软骨;血清蛋白;病毒外壳蛋白;其他由细菌衍生的制剂;γ干扰素;嵌段共聚物佐剂如Hunter’s Titermax佐剂(Vaxcel.TM.,Inc.Norcross,Ga);Ribi佐剂(可从Ribi ImmunoChem Research,Inc.,Hamilton,Mont.得到);和皂苷及其衍生物如Quil A(可从Superfos Biosector A/S,Denmark得到)。载体为提高治疗组合物在所治疗动物中半衰期的典型化合物。合适的载体包括但不限于聚合物控释组合物、生物可降解植入物、脂质体、细菌、病毒、油、酯和二醇类。 
本发明一实施方案为可缓慢释放本发明组合物至动物中的缓释剂型。如此处所使用的控释剂型在控释载体中含有本发明。合适的控释载体包括但不限于生物相容性聚合物、其他聚合物基体、胶囊、微胶囊、微粒、大丸剂制剂、渗透泵、扩散装置、脂质体、脂质球和头皮传递系统。本发明的其他控释剂型包括在向动物给药时在原位形成固体或凝胶的液体。优选的控释剂型为生物可降解的(即可生物侵蚀的)。 
治疗组合物一旦制成剂型,可储存在无菌小瓶中作为溶液剂、混悬剂、凝胶剂、乳剂、固体或脱水或冻干粉末;或直接与其他惰性载体制成胶囊和/或片剂用于口服。这种剂型可以即时可用的形式或在给药前需要立即复原的形式储存。给药包含用于全身传递的组合物的剂型的方式可以通过口服、皮下、肌内、静脉、鼻腔或阴道或直肠栓剂。 
治疗特定病症或病情有效的组合物的量视病症或病情的性质而定,该性质可由一般的临床技术确定。此外,可任选地采用体外或体内分析以帮助确定最优的剂量范围。剂型中所采用的精确的剂量视给药途径和 疾病或病情的严重程度或发展而定,并且应该由医师根据每个病人的情况确定。可以通过得自体外或动物试验系统的剂量反应曲线外推得出有效剂量。例如,易于通过给药分级剂量的组合物并观察所希望的效果确定组合物的有效量。 
本发明治疗方法包括向需要的患者内部或局部给药治疗有效量的包含无取代B环类黄酮和黄烷的组合物。混合物的纯度视获得化合物的方法学而定,为包括但不限于0.01到100%。在优选的实施方案中,无取代B环类黄酮和黄烷混合物以及包含同样成分的药物组合物的剂量为一有效、无毒、选自0.01到200mg/kg体重范围内的量。本领域熟练技术人员通过使用常规临床试验即可确定所治疗特定疾病的最优剂量。 
下述实施例用于举例说明的目的,并非意图限制本发明的范围。 
实施例 
实施例1.金合欢和黄芩植物中有机和水提取物的制备 
将源自儿茶树皮、直萼黄芩根、黄芩根或Scutellaria laterifiora全株的植物材料研磨成粒径不大于2mm的颗粒。之后将干燥研细的植物材料(60g)转移至锥形瓶并加入甲醇∶二氯甲烷(1∶1)(600mL)。振摇混合物一小时,过滤,将生物量再次用甲醇∶二氯甲烷(1∶1)(600mL)提取。合并有机提取液,真空蒸发得到有机提取物(见以下表1)。有机提取之后,将该生物量风干并用超纯水(600mL)提取一次。过滤水溶液并冻干得到水提取物(见以下表1)。 
表1.金合欢和黄芩物种中有机和水提取物的产率 
  植物来源   数量   有机提取物   水提取物
  儿茶树皮   60g   27.2g   10.8g
  直萼黄芩根   60g   4.04g   8.95g
  黄芩根   60g   9.18g   7.18g
Scutellaria lateriflora全株  60g   6.54g   4.08g
实施例2.儿茶、各种黄芩和其他植物的植物提取物对COX-2和COX-1过氧化物酶活性的抑制 
确定特定COX-2抑制剂的筛选方法由生物测定指导,并如下所述设计为测定酶的过氧化物酶活性: 
过氧化物酶测定.将寻找COX-2抑制剂的测定改进为配合高通量平台使用(Raz.)。简而言之,将过氧化物酶缓冲液(100mM TBS,5mM EDTA,1μM血红素,1mg肾上腺素,0.094%苯酚)中的重组绵羊COX-2(Cayman)与提取物(1∶500稀释)一起培养15分钟。加入Quantablu(Pierce)底物,并使之在25℃反应45分钟。之后应用Wallac Victor2读板器读出荧光值。结果如表2所示。 
表2所示为有机和水提取物对酶的抑制,该提取物源自5种植物物种,包括儿茶的树皮、两种黄芩的根和其他三种植物物种的提取物,其由结构相似的无取代B环类黄酮组成。数据显示为相对于仅单独为重组绵羊COX-2酶和底物的过氧化物酶活性百分率。有机提取物的抑制百分率范围为30%到90%。 
表2.各物种对COX-2过氧化物酶活性的抑制 
  植物来源  有机提取物对COX-2的抑制   水提取物对COX-2的抑制
  儿茶(树皮)  75%   30%
  直萼黄芩(根)  55%   77%
  黄芩(根)  75%   0%
  Desmodium sambuense(全株)  55%   39%
  蓝桉(叶)  30%   10%
  Murica nana(叶)  90%   0%
将对COX-1和COX-2同种型的相对抑制进行比较需要得到这些酶的所有IC50值。IC50值定义为特定抑制剂对酶活性相对于对照抑制率为50%时的浓度。在这些试验中,如表3所示,对COX-2和COX-1酶的IC50值各自在6到50μg/mL和7到80μg/mL变化。对COX-2和COX-1IC50值的比较证明源自各种植物的有机提取物对所有这些酶都具有专一性。例如Scutellaria lateriflora的有机提取物显示其对COX-2相对COX-1的优先抑制的IC50值各自为30和80μg/mL。尽管某些提取物证实对COX-2优先抑制,而其他的并非如此。对HTP部分和纯化自该部分的化合物的检查对确定这些提取物和化合物抑制的真实专一性是必须的。 
表3.有机提取物对人和绵羊COX-2和COX-1的IC50值 
  植物来源 IC50人COX-2(μg/mL)   IC50绵羊  COX-2(μg/mL)   IC50绵羊  COX-1(μg/mL)
  儿茶(树皮) 3   6.25   2.5
  直萼黄芩(根) 未完成   10   10
  黄芩(根) 30   20   20
  Desmodium sambuense(全株) 20   30   80
  蓝桉(叶) 未完成   50   50
  Murica nana(叶) 5   6   7
实施例3.活性提取物的HTP部分 
将自活性植物的提取物(400mg)装样至预填充的快速柱(2cm ID×8.2cm,10g硅胶)中。将该柱以Hitachi高通量纯化(HTP)系统用梯度流动相进行洗脱,该梯度流动相为(A)50∶50的EtOAc∶己烷和(B)甲醇,30分钟内从100%A到100%B,流速为5mL/min。用宽波长UV检测器监控分离并采用Gilson馏分收集器将馏分以1.9mL/孔收集至96深孔板上。将样品板在低真空度和离心下干燥。用DMSO(1.5mL)溶解每孔的样品,取部分(100μL)进行COX抑制测定。 
将源自活性植物的水提取物(750mg)溶解于水(5mL)中,通过1μm的针头式过滤器过滤并转移至4mL高效液相色谱(HPLC)小瓶中。然后通过自动进样器将溶液注射到预填充的反相柱上(C-18,15μm粒径,2.5cmID×10cm接预柱)。将该柱以Hitachi高通量纯化(HTP)系统用梯度流动相进行洗脱,该梯度流动相为(A)水和(B)甲醇,20分钟内从100%A到100%B并继之以100%的甲醇5分钟,流速为10mL/min。用宽波长UV检测器监控分离并采用Gilson馏分收集器将馏分以1.9mL/孔收集至96深孔板上。冷冻干燥样品板。用超纯水(1.5mL)溶解每孔样 品并取部分(100μL)进行COX抑制测定。 
实施例4.源自金合欢属和黄芩属物种的HTP部分对COX过氧化物酶活性的抑制 
测定每个HTP部分抑制COX-1和COX-2重组酶的过氧化物酶活性的能力以进一步确定单独的生物活性有机提取物的特征。结果如图1和2所示,该图描述源自有机提取物的HTP部分对COX-2和COX-1活性的抑制。该提取物如实施例1和3中所述分离自儿茶的树皮和黄芩的根,并按照如实施例2所述进行测定。图1和2中描绘的曲线显示具有多重抑制峰,提示每种提取物中具有多种活性成分。若干活性峰对COX-2特别具有选择性。其他黄芩物种包括直萼黄芩和Scutellaria lateriflora证实具有相似的抑制峰(未显示数据)。然而,COX-1和COX-2酶皆证实具有多重抑制峰,其显示存在多于一种有助于形成原抑制曲线的分子。 
实施例5.源自黄芩属有机提取物的活性无取代B环类黄酮的分离和纯化 
如实施例1所述分离自直萼黄芩根部的有机提取物(5g)装样至预填充快速柱(120g硅石,40μm粒径32-60μm,25cm×4cm)中,并用梯度流动相进行洗脱,该梯度流动相为(A)50∶50的EtOAc∶己烷和(B)甲醇,60分钟内从100%A到100%B,流速为15mL/min。以10mL/馏分将馏分收集至试管中。真空蒸发溶剂并将每馏分中的样品溶于1mLDMSO,将20μL等分试样转移至96孔浅盘板并测定COX抑制活性。基于COX测定结果,将活性馏分#31到#39合并并蒸发。HPLC/PDA和LC/MS进行分析显示主要的化合物保留时间为8.9分钟,MS峰在272m/e。将产物在C18半制备柱(25cm×1cm)上进一步纯化,梯度流动相为(A)水和(B)甲醇,周期为45分钟,流速为5mL/分钟。收集 88个馏分得到5.6mg浅黄色固体。采用HPLC/PDA和LC/MS通过与标准品进行比较以及NMR数据测定纯度。1H NMR:δppm.(DMSO-d6)8.088(2H,m,H-3’,5’),7.577(3H,m,H-2’,4’,6’),6.923(1H,s,H-8),6.613(1H,s,H-3).MS:[M+1]+=271m/e。该化合物经鉴定为贝加因。贝加因对COX-2酶的IC50经测定为10μg/mL。 
使用制备C-18柱色谱,使用标准化提取物分离鉴定其他无取代B环类黄酮。该提取物分离自黄芩的根(批次#RM052302-01),且无取代B环类黄酮含量为82.2%。如图3所示,采用HPLC/PDA/MS洗脱出11种结构。参照图3可见,所鉴定的11种化合物为贝加灵、沃贡宁-7-葡糖苷酸、木蝴蝶素A 7-葡糖苷酸、贝加因、沃贡宁、柯因-7-葡糖苷酸、5-甲基-沃贡宁-7葡糖苷酸、黄芩素、去甲沃贡宁、柯因和木蝴蝶素A。 
实施例6.经纯化的无取代B环类黄酮对COX的抑制 
得到若干无取代B环类黄酮并在20μg/mL浓度下采用如实施例2所述的方法测定COX-2抑制活性。结果汇总于表4。 
采用下述方法测定贝加因、贝加灵和分离自黄芩的根的标准化无取代B环类黄酮提取物的IC50。在测定中引入可断裂的过氧化物发色团以在花生四烯酸作为辅因子存在下可视化每种酶的过氧化物酶活性。典型地,该测定于96孔规格进行。取自100%DMSO中10mg/mL储备液的每种抑制剂一式三份在室温下采用下列浓度范围进行测定:0、0.1、1、5、10、20、50、100和500μg/mL。向每孔中加入pH7.5的100mM Tris-HCl150μL和22μM在三羧甲基氨基甲烷缓冲液中稀释的正铁血红素10μL、在DMSO中稀释的抑制剂10μL和25单位的COX-1或COX-2酶。在转台上将各成分混合10秒,之后加入20μL 2mM的N,N,N’N’-四甲基对亚苯基二胺二盐酸盐(TMPD)和20μL1.1mMAA以发动反应。振摇板10秒,之后,在于570nm处读取吸收值前温育5分钟。将抑制剂浓 度对百分抑制率作图并通过沿等温线取最大值中点并与浓度在x轴相交确定IC50。之后将IC50标准化至测定中酶单位的数目。图4、5和6所示分别为贝加因、贝加灵和分离自黄芩的根的标准化无取代B环类黄酮提取物的剂量反应和IC50结果。 
表4.纯化的无取代B环类黄酮对COX酶活性的抑制 
  无取代B环类黄酮  COX-1的抑制  COX-2的抑制
  贝加因  107%  109%
  5,6-二羟基-7-甲氧基黄酮  75%  59%
  7,8-二羟基黄酮  74%  63%
  贝加灵  95%  97%
  沃贡宁  16%  12%
实施例7.分离自直萼黄芩(根)、黄芩(根)和木蝴蝶(种子)的活性提取物中无取代B环类黄酮的HPLC定量 
从3种不同的植物物种中分离的5种活性提取物中无取代B环类黄酮的存在和数量得以确定,并在表5中给出。应用HPLC对无取代B环类黄酮进行定量分析,使用Luna C-18柱(250×4.5mm,5μm),采用1%磷酸和乙腈梯度为22分钟内从80%到20%。采用UV检测器在254纳米处检测无取代B环类黄酮,并通过与无取代B环类黄酮标准品比较基于保留时间加以鉴定。 
表5.活性植物提取物中的无取代B环类黄酮含量 
  活性提取物   提取物重量   %可提取自  生物量  无取代B环类 黄酮总量   提取物中%无取  代B环类黄酮
  直萼黄芩(水提取物)   8.95g   14.9%  0.2mg   0.6%
  直萼黄芩(有机提取物)   3.43g   5.7%  1.95mg   6.4%
  黄芩(水提取物)   7.18g   12.0%  0.03mg   0.07%
  黄芩(有机提取物)   9.18g   15.3%  20.3mg   35.5%
  木蝴蝶(有机提取物)   6.58g   11.0%  0.4mg   2.2%
实施例8.儿茶有机提取物中的活性化合物的分离和纯化 
如实施例1所述提取自儿茶根部的有机提取物(5g)装样至预填充快速柱(120g硅石,40μm粒径32-60μm,25cm×4cm)中,并用梯度流动相进行洗脱,该梯度流动相为(A)50∶50的EtOAc∶己烷和(B)甲醇,60分钟内从100%A到100%B,流速为15mL/min。以10mL/馏分将馏分收集至试管中。真空蒸发溶剂并将每馏分中的样品溶于DMSO(1mL),将20μL等分试样转移至96孔浅盘板并测定COX抑制活性。基于COX测定结果,将活性馏分#32到#41合并并蒸发,得到2.6g固体。HPLC/PDA和LC/MS进行分析显示两种主要的化合物的保留时间分别为15.8和16.1分钟。将产物在C18半制备柱(25cm×1cm)上进一步纯化,产物装样量为212.4mg,并用(A)水和(B)乙腈(ACN),周期为60分钟,流速为5mL/分钟的梯度流动相进行洗脱。收集88个馏分并分离得到两种活性化合物。化合物1(11.5mg)和化合物无2(16.6mg)。用HPLC/PDA和LC/MS通过与标准品(儿茶素和表儿茶素)比较以及NMR数据测定纯度。 
化合物1.13C NMR:δppm.(DMSO-d6)27.84(C4),66.27(C3),80.96(C2),93.78(C9),95.05(C7),99.00(C5),114.48(C12),115.01(C15), 118.36(C16),130.55(C11),144.79(C14),155.31(C6),156.12(C10),156.41(C8).1H NMR:δppm.(DMSO-d6)9.150(1H,s,OH),8.911(1H,s,OH),8.835(1H,s,OH),8.788(1H,s,OH),6.706(1H,d,J=2Hz,H2’),6.670(1H,d,J=8.0Hz,H-6’),6.578(1H,dd,J=2.8Hz,H-5’),5.873(1H,d,J=2Hz,H8),5.670(1H,d,J=2Hz,H6),4.839(1H,d,J=4Hz,OH),4.461(1H,d,J=7.3Hz,H2),3.798(1H,m,H3),2.625(1H,m,H4b),2.490(1H,m,H4a).MS:[M+1]+=291m/e。该化合物经鉴定为儿茶素。 
化合物2.13C NMR:δppm.(DMSO-d6)28.17(C4),64.87(C3),78.02(C2),94.03(C9),95.02(C7),98.44(C5),114.70(C12),114.85(C15),117.90(C16),130.56(C11),144.39(C14),155.72(C6),156.19(C10),156.48(C8).1H NMR:δppm.(DMSO-d6)9.083(1H,s,OH),8.873(1H,s,OH),8.777(1H,s,OH),8.694(1H,s,OH),6.876(1H,d,J=2Hz,H2’),6.646(2H,s,H-5’,6’),5.876(1H,d,J=2Hz,H8),5.700(1H,d,J=2Hz,H6),4.718(1H,s,OH),4.640(1H,d,J=4.5Hz,H2),3.987(1H,d,J=4.5Hz,H3),2.663(1H,dd,J=4.6,6.3Hz,H4b),2.463(1H,dd,J=4.6,6.3Hz,H4a).MS:[M+1]+=291m/e。该化合物经鉴定为表儿茶素。 
采用如实施例6中所述的方法,图7和8所示为儿茶素和分离自儿茶树皮的标准化黄烷提取物的剂量反应和IC50结果。表儿茶素对COX-1和COX-2酶的IC50值分别为7μg/mL和20μg/mL。 
实施例9.源自儿茶的活性提取物的HPLC定量 
黄烷在分离自儿茶的有机和水提取物中的含量通过HPLC使用PhotoDiode阵列检测器(HPLC/PDA)以及Luna C18柱(250mm×4.6mm)加以定量。使用乙腈梯度在20分钟周期内从10%到30%CAN并继之以5分钟60%ACN将黄烷由柱中洗脱。结果如表6所示。图9所示为HPLC提纯图。以儿茶素和表儿茶素为标准品基于保留时间对黄烷定量。两种 主要黄烷的保留时间分别为12.73分钟和15.76分钟。 
表6.活性植物提取物中的无取代B环类黄酮含量 
  自儿茶树皮中的活性提取物   提取物重量   %可提取自生物量   提取物中%黄烷
  水提取物   10.8g   18.0%   0.998%
  有机提取物   27.2g   45.3%   30.37%
实施例10.儿茶和黄芩属物种有机提取物COX抑制活性的体外研究 
在基于细胞的系统内测定分离自儿茶和各种黄芩属物种的有机提取物的体外有效性和COX-2专一性以确定其抑制AA代谢物生成的能力。测定持续表达COX-2和THP-1的、表达COX-1的HOSC细胞系在AA存在下生成PGE2的能力。 
COX-2基于细胞的测定将HOSC(ATCC#8304-CRL)细胞培养至80-90%合生。将该细胞胰蛋白酶化、洗涤并以1×106细胞/mL重悬浮于10mL组织培养培养基(MEM)中。将细胞悬浮液(200μL)加至96孔组织培养板上并在37℃及5%CO2条件下温育2小时。之后以含有1ng/mL IL-1b的新HOSC培养基代替该培养基并温育整夜。将培养基再次移除并代之以190mL HOSC培养基并在15℃温育15分钟。加入HOSC培养基中的花生四烯酸(20mL,100μM)并在振荡器上于室温下温育10分钟。将上清液(20μL)转移至新板,该板含有190μL/孔100μM在ELISA缓冲液中的吲哚美辛。如下所述,以ELISA对上清液进行测定。 
COX-1基于细胞的测定将THP-1细胞悬浮于30mL体积中(5×105细胞/mL)。加入TPA至TPA最终浓度为10nM并温育48小时使细胞分化为巨噬细胞(贴壁的)。将细胞重悬浮于HBSS(25mL)中并以5×105细胞/孔加至200mL容积的96孔板上。然后加入RPMI 1640(10μL)中的 待测化合物并在37℃温育15分钟。接着加入RPMI 1640(20μL)中的花生四烯酸并在振荡器上室温下温育10分钟。将上清液(20μL)加至含有吲哚美辛(100μM)的ELISA缓冲液(190μL)中。如下所述,以ELISA对上清液进行测定。 
COX-2全血检查采用静脉穿刺采集来自健康捐献者的外周血。将全血(500μL)与待测化合物和提取物在37℃下温育15分钟。加入脂多糖(LPS,自E.coli血清型0111:B4)至最终浓度为100μg/mL并在37℃温育整夜。将血离心(12,000xg)并收集血浆。将血浆(100μL)加入甲醇(400μL)中沉淀蛋白。上清液用ELISA测定PGE2生成。该过程是对如Brideau等(1996)Inflamm.Res.45:68-74所述的方法的改进。 
COX-1全血检查在无抗凝血剂的试管中采集新鲜血液并立即在硅化微离心管中等分为500μL的等分试样。加入待测样品,涡旋并在37℃凝结1小时。离心样品(12,000xg)并收集血浆。将血浆(100μL)加入甲醇(400μL)中沉淀蛋白。上清液用ELISA测定TXB2生成。该过程是对如Brideau等(1996)Inflamm.Res.45:68-74所述的方法的改进。 
ELISA测定4℃下将Immunolon-4 ELISA板整夜以碳酸缓冲液(pH9.2)中的俘获抗体0.5-4μg/mL覆盖。洗涤板并以阻断缓冲液(PBS+1%BSA)室温下温育2小时。再次洗涤板,加入待测试样(100μL)并室温振荡下温育1小时。加入含有0.5-4mg/mL的结合过氧化物的次级抗体50μL并在室温振荡下温育1小时。然后将板洗涤三次并加入TMB底物(100μL)。使板反应30分钟,之后加入1M磷酸(100μL)使反应停止。用Wallac Victor 2读板器在450nm处读板。 
细胞毒性使用测定受损细胞中乳酸脱氢酶释放的比色试剂盒(Oxford Biochemical Research)评价细胞毒性。按照制造商的指示完成测定。对纯化的黄烷及自儿茶中分离的标准化的提取物均加以测定。对所有被测化合物都未观察到细胞毒性。 
测定结果如表7所示。数据显示为IC50值以进行直接比较。参照表5可见COX-1的IC50值普遍低于COX-2的。此外,还对全血的PGE2生 成(该系统中为COX-2的测定)或血栓素B2(TXB2)(COX-1活化的测定)的分化抑制进行测定。参照图7可见这些研究清楚证明在基于全血细胞的测定内具有COX-2抑制专一性。然而,在应用THP-1和基于HOSC的模型系统的试验中实际上却显示更大的COX-1选择性。此矛盾可能的原因是组成型地表达每种酶的永生细胞系和被诱导而表达COX酶的源自全血的原发细胞之间的基本区别。原发细胞是体内研究炎症的更相关的模型。此外,用以鉴定COX-1相对于COX-2活性的化合物在所有这些系统中有所不同,并因此无法直接进行比较。 
表7.有机提取物在细胞系统中对COX活性的抑制 
Figure G2009101641172D00511
实施例11源自儿茶的儿茶素对5-脂氧合酶的抑制 
如上所述,与炎症反应相关的最重要的途径之一由非血基质、含铁的脂氧合酶(5-LO、12-LO和15-LO)产生,该酶催化分子氧加成至脂肪酸如AA上以生成过氧化物5-、12-和15-HPETE,其然后转化为白三烯。明显的迹象显示自儿茶的黄烷提取物能提供一定程度的5-LO抑制,因此阻止5-HPETE的生成。脂氧合酶抑制剂筛选测定试剂盒(CaymanChemical,Inc.,Cat#760700)被用以评价自儿茶的纯化的黄烷儿茶素是否直接在体外抑制5-LO。在通过微孔过滤完成由磷酸到基于三羧甲基氨基甲烷的缓冲液的缓冲液更换后,源自大豆的15-LO通常用于试剂盒中以替代马铃薯5-LO。该测定通过氧敏产色(oxygen sensing chromagen)检测过氧化氢的生成。简而言之,加入0.17单位/μL的马铃薯90μL、1.1mM的AA 20μL、氧敏产色剂(oxygen-sensing chromagen)100μL以及加 入10μL纯化的黄烷抑制剂至最终浓度在0到500μg/mL范围,以此一式三份进行测定。儿茶素抑制5-LO的IC50经测定为1.38μg/mL/酶单位。 
实施例12.儿茶标准化提取物的制备 
儿茶(500mg研细的干)用以下溶剂系统提取。(1)100%水,(2)80∶20水∶甲醇,(3)60∶40水∶甲醇,(4)40∶60水∶甲醇,(5)20∶80水∶甲醇,(6)100%甲醇,(7)80∶20甲醇∶THF,(9)60∶40甲醇∶THF。将提取物真空下浓缩并干燥。采用应用PhotoDiode阵列检测器(HPLC/PDA)以及250mm×4.6mm C18柱的HPLC对所有提取物中的化学成分进行鉴定。以儿茶素和表儿茶素作为标准品,基于保留时间和PDA数据定量该化学成分。结果如表8和图9所示。如表6所示,以80%甲醇/水溶剂提取产生的黄烷提取物的黄烷成分浓度最高。 
表8.自儿茶制备标准黄烷提取物的溶剂 
  提取溶剂   提取物重量   %可提取自生物  量   儿茶素总量   提取物中%儿  茶素
  100%水   292.8mg   58.56%   13mg   12.02%
  水∶甲醇(80∶20)   282.9mg   56.58%   13mg   11.19%
  水∶甲醇(60∶40)   287.6mg   57.52%   15mg   13.54%
  水∶甲醇(40∶60)   264.8mg   52.96%   19mg   13.70%
  水∶甲醇(20∶80)   222.8mg   44.56%   15mg   14.83%
  100%甲醇   215.0mg   43.00%   15mg   12.73%
  甲醇∶THF(80∶20)   264.4mg   52.88%   11mg   8.81%
  甲醇∶THF(60∶40)   259.9mg   51.98%   15mg   9.05%
实施例13.各种黄芩物种的标准化的无取代B环类黄酮提取物的制备 
直萼黄芩(500mg研细的根)用25mL下述溶剂提取两次。(1)100%水,(2)80∶20水∶甲醇,(3)60∶40水∶甲醇,(4)40∶60水∶甲醇,(5)20∶80水∶甲醇,(6)100%甲醇,(7)80∶20甲醇∶THF,(9)60∶40甲 醇∶THF。将提取物合并,在真空下浓缩和干燥。采用应用PhotoDiode阵列检测器(HPLC/PDA)以及250mm×4.6mm C18柱的HPLC对所有提取物中的化学成分进行鉴定。以贝加因、贝加灵、黄芩配基和沃贡宁作为标准品,基于保留时间和PDA数据定量该化学成分。结果如表9所示。 
表9.黄芩无取代B环类黄酮提取物的定量 
 提取溶剂   提取物重量   %可提取自  生物量   类黄酮总量   提取物中%类  黄酮
 100%水   96mg   19.2%   0.02mg   0.20%
 水∶甲醇(80∶20)   138.3mg   27.7%   0.38mg   0.38%
 水∶甲醇(60∶40)   169.5mg   33.9%   0.78mg   8.39%
 水∶甲醇(40∶60)   142.2mg   28.4%   1.14mg   11.26%
 水∶甲醇(20∶80)   104.5mg   20.9%   0.94mg   7.99%
 100%甲醇   57.5mg   11.5%   0.99mg   10.42%
 甲醇∶THF(80∶20)   59.6mg   11.9%   0.89mg   8.76%
 甲醇∶THF(60∶40)   58.8mg   11.8%   1.10mg   10.71%
黄芩(1000mg研细的根)用50mL如下甲醇和水混合物提取两次:(1)100%水,(2)70∶30水∶甲醇,(3)50∶50水∶甲醇,(4)30∶70水∶甲醇,(5)100%甲醇。将提取物合并,在真空下浓缩和干燥。采用应用PhotoDiode阵列检测器(HPLC/PDA)以及250mm×4.6mm C18柱的HPLC对所有提取物中的化学成分进行鉴定。以贝加因、贝加灵、黄芩配基和沃贡宁作为标准品,基于保留时间和PDA数据定量该化学成分。结果如表10所示。 
表10.黄芩无取代B环类黄酮提取物的定量 
  提取溶剂   提取物重量   %可提取自  生物量   类黄酮总量   提取物中%类  黄酮
  100%水   277.5mg   27.8%   1mg   0.09%
  水∶甲醇(70∶30)   388.6mg   33.9%   1.19mg   11.48%
  水∶甲醇(50∶50)   304.3mg   30.4%   1.99mg   18.93%
  水∶甲醇(30∶70)   293.9mg   29.4%   2.29mg   19.61%
  100%甲醇   204.2mg   20.4%   2.73mg   24.51%
实施例14.以自黄芩根部的标准化无取代B环类黄酮提取物和自儿茶树皮的标准化黄烷提取物制备剂型 
采用两种各自源自金合欢属和黄芩属的标准化提取物同一种或多种赋形剂共同制备此处谓之UnivestinTM的一种新型组合物。下面给出制备这种组合物的通用实施例。该实施例中所用的金合欢属提取物含有>60%的总黄烷,为儿茶素和表儿茶素,黄芩属提取物含有>70%无取代B环类黄酮,其主要为贝加灵。黄芩属提取物包含如表11所属的其他少量无取代B环类黄酮。向组合物中加入一种或多种赋形剂。黄烷和无取代B环类黄酮的比例可以基于COX-2相对5-LO的抑制有关的适应症及特定需要以及产品效力的需要加以调节。赋形剂的数量可以根据每种成分的实际活性含量加以调节。用于产品的每个单独的批次的混合表必须根据单独批次成分的产品规格和QC结果生成。推荐活性成分范围为2-5%的附加量用以满足产品规格的需要。表11所示为用于一个批次的UnivestinTM而生成的混合表(Lot#G1702-COX-2)。 
含有无取代B环类黄酮含量为82.2%(贝加灵)的黄芩根提取物(38.5kg)(lot#RM052302-01);总黄烷含量为80.4%的儿茶树皮提取物(6.9kg)(lot#RM052902-01);以及赋形剂(5.0kg的Candex)被加以混合以得到混合比例为85∶15的UnivestinTM剂型(50.4kg)。表9所示为该 UnivestinTM特定批次的无取代B环类黄酮和黄烷的含量(Lot#G1702-COX-2),其测定方法如实施例7和9所述。 
表11.UnivestinTM剂型的无取代B环类黄酮和黄烷含量 
  活性成分  %含量
  1.类黄酮  
  a.贝加灵  62.5%
  b.少量类黄酮  
  i.沃贡宁-7-葡糖苷酸  6.7%
  ii.木蝴蝶素A7-葡糖苷酸  2.0%
  iii.贝加因  1.5%
  iv.沃贡宁  1.1%
  v.柯因-7-葡糖苷酸  0.8%
  vi.5-甲基-沃贡宁-7-葡糖苷酸  0.5%
  Vii.黄芩配基  0.3%
  viii.去甲沃贡宁  0.3%
  ix.柯因  <0.2%
  x.木蝴蝶素A  <0.2%
  c.无取代B环类黄酮总量  75.7%
  2.黄烷  
  a.儿茶素  9.9%
  b.表儿茶素  0.4%
  c.亚总黄烷  10.3%
  3.总活性成分  86%
参见表9可知,该UnivestinTM的特定批次含有86%总活性成分,包括75.7%无取代B环类黄酮和10.3%黄烷。采用该批次UnivestinTM(50.0kg)生产两种不同剂量水平的胶囊形式最终产品:125mg每剂量(60胶囊)和250mg每剂量(60胶囊)。如实施例15所述,在人临床 试验中评价最终产品。 
采用相同方法使用混合比例各自为50∶50和20∶80的源自黄芩根的标准化无取代B环类黄酮提取物和源自儿茶树皮的标准化黄烷提取物的结合制备另外两个批次的UnivestinTM。 
实施例15.三种UnivestinTM剂型剂量反应及COX酶抑制IC50值的测定 
如实施例6所述,测定如实施例14所述制备的三种不同的UnivestinTM剂型的COX-1和COX-2抑制作用。如图11、12和13所示,所有三种剂型都显示出显著的COX酶活性的剂量反应抑制。 
实施例16.UnivestinTM剂型剂量反应及COX酶抑制IC50值的测定 
如实施例14所述,使用混合比例80∶20的源自黄芩根的标准化无取代B环类黄酮提取物和源自儿茶树皮的标准化黄烷提取物的结合制备一UnivestinTM样品。将该样品在含有THP-1和HT-29细胞;表达COX-1、COX-2和5-LO的单核细胞细胞系的组织培养培养基中滴定。用于LTB4(LTB4;Neogen,Inc.,Cat#406110)的竞争性ELISA被用以评价UnivestinTM对每个细胞系中LTB4的新合成水平的作用,并作为UnivestinTM对5-LO通道抑制作用的测定。在6孔板中每孔加入160,000到180,000细胞并由此一式二份地进行该测定。UnivestinTM以3、10、30和100μg/mL加入THP-1培养液中,并在潮湿环境中,5%CO2且37℃条件下温育整夜(~12-15小时)。结果如图14所示,其显示出将UnivestinTM以3到10μg/mL加入至THP-1培养液中几乎完全抑制了新的LPS诱导的LTB4的生成。 
向HT-29细胞中以3μg/mL加入UnivestinTM和另一已知的5-LO抑制剂布洛芬并在潮湿环境中5%CO2和37℃条件下温育48小时。所有处理的细胞系都通过离心收获(harvest)并通过生理缓冲液中的温和少量 均质溶胞作用使之破裂。如图15所示,UnivestinTM抑制了HT-29细胞中80%的新合成LTB4的生成。而布洛芬在相同的时期内仅显示LTB4量的20%的减少。 
实施例17.UnivestinTM相对于其他NSAID对cox-2而不是cox-1基因表达的分化抑制 
为确定UnivestinTM是否在基因水平起效,用脂多糖(LPS)刺激、如实施例14所述用UnivestinTM、塞来昔布、布洛芬或对乙酰氨基酚处理分离的人、外周血单细胞(PBMCs),然后收获所产生的总RNA并用半定量RT-qPCR进行评价。特殊地,该测定由在6孔板上加入每孔130,000细胞构成。然后用10ng/mL LPS刺激细胞,并与1、3、10、30和100μg/mL的UnivestinTM以及3μg/mL的塞来昔布、布洛芬和对乙酰氨基酚一同,在潮湿环境中5%CO2和37℃条件下温育18小时。通过离心收获所有细胞处理状况并用 试剂(InvitrogenTM Life Technologies,Cat#15596-026)及所推荐的 
Figure G2009101641172D00572
试剂方案分离所产生的总RNA。由莫洛尼氏白血病毒逆转译酶(M-MLV RT;Promega Corp.,Cat#M1701)应用随机六聚物(Promega Corp.,Cat#C1181)逆转译总RNA。在ABI 
Figure G2009101641172D00573
7700序列检测系统上使用预反应的确认的Assays-on-Demand产品(AOD,Applied Biosystems,Inc.,Cat#4331182)进行qPCR试验,并用于18S rRNA内标和基因专一性分析。将基因特异性表达值标准化至其各自的18S rRNA基因表达值(内参照)并随后将未经LPS和药物处理的情况标准化至100。处理情况为相对于该零情况。 
UnivestinTM将cox-2的标准化的基因表达降低了超过100倍,而cox-1的标准化的表达显示的变化不大。当以3μg/mL的UnivestinTM、塞来昔布、布洛芬或对乙酰氨基酚处理PBMCs时,仅UnivestinTM没有增加cox-2 的基因表达。据信,这是最初的在以无取代B环类黄酮和黄烷混合物治疗后使用半定量RT-qPCR技术的在疼痛和炎症通道中涉及eicosinoids、细胞因子、趋化因子和其他基因的基因表达水平改变的报道。既以基于ELISA的测定评价蛋白质水平的改变又以酶功能测定评价酶功能的变化,该工作成为相联的工作。作为这些试验的结果,证实了在以UnivestinTM治疗后的既是基因组的又是蛋白组的相联的效果。文献中引用的其他试验应用蛋白质特异性方法来推断而不是直接显示基因表达。结果如图16和17所示。 
实施例18.通过体内小鼠耳肿胀模型对UnivestinTM有效性的评价 
为测定UnivestinTM是否可用于体内治疗炎症,将如实施例14所述制备的该组合物在以AA处理其耳部前一天向4-5周龄的ICR小鼠(Harlan Labs)口腔灌服。受试小鼠饲以悬浮于橄榄油中的UnivestinTM50、100和200mg/kg的剂量当量,而对照小鼠仅饲以橄榄油。之后的一天,向小鼠的一只耳朵上涂敷330mM的95%乙醇中的AA20μL,而向另一只耳朵上涂以乙醇作为对照。如图18所示,以UnivestinTM处理的小鼠显示出循UnivestinTM剂量增加的可测量的剂量反应。参照图18可知,与无(minus)UnivestinTM对照相比,200mg/kg的剂量减少肿胀达50%。UnivestinTM的50mg/kg剂量与另一强效抗炎药吲哚美辛的50mg/kg剂量同样有效。 
实施例19.通过体内小鼠踝关节肿胀模型对UnivestinTM有效性的评价 
由于UnivestinTM的设计目的是靶向于关节疼痛,将100mM的95%乙醇中的AA溶液20μL注射入4-5周龄的ICR小鼠(Harlan Labs)的后踝关节以产生肿胀。受试组在约12小时之前饲以悬浮于橄榄油中的 UnivestinTM100mg/kg,而另一组未饲以UnivestinTM。对照组包括未接收花生四烯酸注射的小鼠(阴性对照)以及注射95%乙醇未注射AA的小鼠(载体对照)。这些组也没有饲以UnivestinTM。结果如图19所示。参照图19可见,与对照组相以及未处理的花生四烯酸注射组相比,注射AA的饲以UnivestinTM的小鼠显示出肿胀的背景水平。该结果证实了UnivestinTM对于减少关节肿胀的有效性、作用的部位。 
实施例20.无取代B环类黄酮和黄烷对减轻膝盖和/或臀部类风湿性关节炎或骨关节炎引起的疼痛的有效性的临床评价 
本临床试验为单中心、随机、双盲、安慰剂对照试验。60位患有膝盖和/或臀部类风湿性关节炎或骨关节炎受试者(n=60)随机分至以下四组中的一组: 
A0安慰剂            n=15    安慰剂 
A1剂量1             n=15    UnivestinTM    250mg/天(125mg b.i.d.) 
A2剂量2             n=15    UnivestinTM    500mg/天(250mg b.i.d.) 
A3阳性(active)对照  n=15    塞来昔布       200mg/天(100mg b.i.d.) 
如实施例14中所述制备UnivestinTM。该特定批次的UnivestinTM(lot#G1702-COX-2)含有86%总活性成分,包括75.5%无取代B环类黄酮和10.3%黄烷。塞来昔布,也称为CelebrexTM,是为COX-2选择性抑制剂的处方药的商标名称。 
受试者按性别搭配,并招募自40到75岁年龄之间。治疗包括按照上述剂量表口服给药90天的安慰剂或活性化合物(UnivestinTM或塞来昔布)。服用NSAID的受试者在开始试验前接受2周的洗净期。不限制身 体活动度,也未给予受试者任何膳食建议。受试者可自由在任何时间以任何原因退出试验。治疗的有效性在口服给药的30、60和90天由医生使用Western Ontario and McMaster Universities(WOMAC)骨关节炎指数(参见Lingard等(2001)J.Bone & Joint Surg.83:1856-1864;Soderman和Malchau(2000)Acta Orthop.Scand.71(1):39-46)。该方案经蒙特利尔大学的IRB委员会检阅并批准。 
WOMAC优选于医生的办公室对受试者实施。受试者被要求在医生办公室的候诊室亲自或通过代理人阅读并回答一调查表或由项目人员通过电话询问并将数据转录至计算机数据库。这在病人间提供了稳定的环境,减少了由于病人间不同的家庭环境产生偏见的可能性。组之间所有测量的差别通过偏差和Tukey氏最小显著差的单因素方差分析进行评价用于多重比较。 
分配给所有的问题一0到4的视疼痛、僵硬或受损功能严重性而定的权重。然后将这些值转化为标准化至100的百分比并作为WOMAC分值报告。值越高提示损伤越大。在治疗前(基线)和治疗后30、60和90天时与200mg每天的塞来昔布以及安慰剂进行比较,250mg和500mg每天UnivestinTM的疼痛、僵硬和功能的平均WOMAC指数分值如表12所示。分数越低,患者的疼痛和僵硬越小,功能越好。 
表12.基线和30、60及90天的WOMAC指数得分 
Figure G2009101641172D00611
表13所示为疼痛、僵硬和功能WOMAC分值的平均绝对变化。它们表示为基线与30、60和90天给出的分值之间的差别。分值越是负值,改善越大。 
表13.在30、60和90天时WOMAC得分的平均绝对变化 
Figure G2009101641172D00621
*这些数据仅包括完成试验的受试者。 
临床试验中,很难由于数据中出现严重的偏差而把标准偏差归咎于一组平均值。更合理地,由于其给出平均值的下限和上限,且区间越窄对平均值的估计越精确,因此优选平均值的置信限。置信限以置信系数表示。95%的置信区间是在本类型统计分析中描述平均值最经常使用的区间。这并不意味着真实的平均值落在该区间的可能性为95%。作为替代,置信水平与计算该区间的方法有关。置信系数仅为可预期包含该真实平均值的给定大小的样本的部分。即,对于95%的置信区间,如果采集了许多样本并由此计算置信区间,最后约95%的该区间可包含该真实平均值。因此,在30、60和90天用95%置信区间计算疼痛、僵硬和功能的WOMAC分值。 
选择基于5分Likert量表范围为1到5之间的WOMAC分值的原始/未标准化的分值代表最终的疼痛、僵硬和受损功能指数(图20-31)。为 达到均一(见表12和13)并增强对改变大小的认识,在其他部分采用至0到100尺度的标准化。然而,考虑到所有的数字基于同样的1-5分量表,对原始数据作图,原因是由于其更准确地反应了从患者调查表得到这些分值所使用的方法。换句话说,由于为患者提供了1到5之间的选择,相对于未反映患者对可能的回答范围的理解的标准化的或变形的0到100的分值,该表现法更好地反映了患者的回答。 
存在基于患者的反应显示出由250和500mg/天的UnivestinTM在90天的治疗期间减少疼痛的疼痛指数的明显趋势。相对于未减少疼痛的安慰剂,塞来昔布同样在该相同的时期内减少了疼痛。然而,由于其置信区间与安慰剂的严重重叠,塞来昔布对僵硬的减少似乎不如两种剂量的UnivestinTM有效。最后,两种剂量的UnivestinTM都显著改善了功能的损伤,而塞来昔布相对于安慰剂未能显示出显著的改善。图示包含所有受试者,即使其未完成试验。然而,基于进行WOMAC测定时在场的受试者的数目所有置信区间有效,因此该趋势有效。如图20到31以这些数据作图。 
实施例21.无取代B环类黄酮和黄烷由于功能的改善对BMI和体重减轻有效性的临床评价 
临床试验期间进行的其他测定为身高和体重。所有组的所有受试者(见实施例20)在治疗30和90天时测量身高和体重。为了使BMI和体重减轻的结果不产生偏倚,不给予受试者任何膳食或锻炼上的建议。表14所示为发生于治疗30和90天后的体重和BMI变化。 
表14.在30和90天时的平均重量(kg)和BMI(kg/m2)变化 
Figure G2009101641172D00641
基于这些数据,UnivestinTM的250mg/天剂量在产生最大量的体重减轻和BMI变化,其后为UnivestinTM的500mg/天剂量和塞来昔布。安慰剂对体重或BMI没有影响。 
相信文献中没有任何其他的抗炎化合物用以达到体重减轻和改变BMI的报道。尽管没有给予受试者任何锻炼上的建议,治疗后,特别是采用UnivestinTM治疗后,取得了可以允许他们更多地按照其本身的意愿运动的更大的机能能力。作为选择,UnivestinTM可增加热产生、脂肪分解,或导致膳食中的脂肪或糖类利用不足。图32和33所示为UnivestinTM治疗30和90天后的BMI和体重。 
实施例22.无取代B环类黄酮和黄烷由于功能的改善的血糖减轻有效性的临床评价 
在治疗0(基准)、30天和90天后同样测定血糖(见实施例20)。这些测定以毫摩尔每升报道。该数据也显示为mg/dL。表15所示为以250和500mg/天UnivestinTM治疗30和90天后的血糖水平。 
表15.治疗30和90天后的血糖变化 
Figure G2009101641172D00651
这些数据显示UnivestinTM的250和500mg/天剂量都随时间有效降低血糖。该效果可或不与上述观察到的体重减轻或假定的由于功能受损得到改善的活动性增加相关。也可能UnivestinTM直接发生作用,通过降低葡萄糖耐受性或通过更有效利用糖类改善葡萄糖代谢。 

Claims (17)

1.组合物,其总活性成分为至少一种无取代B环类黄酮和至少一种黄烷的混合物,
其中所述无取代B环类黄酮选自具有下列结构的化合物的组中:
Figure FSB00001064538100011
其中
R1、R2、R3、R4和R5独立地选自以下组中:-H、-OH、-SH、-OR、-SR、-NH2、-NHR、-NR2、-NR3 +X-,单个糖的糖苷或者多个糖结合的糖苷;
其中
R是具有1-10个碳原子的烷基;以及
X选自药物学可接受的抗衡阴离子;且
所述黄烷选自具有下列结构的化合物的组中:
Figure FSB00001064538100012
其中
R1、R2、R3、R4和R5独立地选自以下组中:-H、-OH、-SH、-OR、-SR、-NH2、-NRH、-NR2、-NR3 +X-,选自以下组中的酯:没食子酸酯、乙酸酯、肉桂酰基酯和羟基肉桂酰基酯、三羟基苯甲酰酯和咖啡酰酯;单个糖的糖苷或者多个糖结合的糖苷;
其中
R是具有1-10个碳原子的烷基;以及
X选自药物学可接受的抗衡阴离子;
并且其中所述组合物包含佐剂、赋形剂或载体。
2.如权利要求1所述的组合物,其中所述佐剂选自以下组中:基于钙的盐类、硅石、硼、组氨酸、硫酸葡糖胺、硫酸软骨素、葡萄糖酸铜、纤维素、维生素D、维生素K、鲨鱼和牛软骨。
3.如权利要求1或2所述的组合物,其中在所述组合物中的无取代B环类黄酮比黄烷的重量比例选自99∶1无取代B环类黄酮:黄烷到1∶99无取代B环类黄酮:黄烷的范围。
4.如权利要求1或2所述的组合物,其中所述组合物中无取代B环类黄酮:黄烷的重量比例为85∶15。
5.如权利要求1或2所述的组合物,其中所述糖为戊醛糖、甲基戊醛糖、己醛糖或己酮糖。
6.如权利要求1或2所述的组合物,其中所述抗衡阴离子为氢氧根、氯离子、碘离子、硫酸根、磷酸根、乙酸根、氟离子或碳酸根。
7.如权利要求1或2所述的组合物,其中所述混合物包含无取代B环类黄酮-贝加灵和黄烷-儿茶素和/或表儿茶素。
8.如权利要求1或2所述的组合物,其中所述无取代B环类黄酮和所述黄烷分离自选自以下组的植物部分:茎、茎皮、根、根皮、生殖器官、叶及其他气生部分。
9.如权利要求8所述的组合物,其中所述茎为干、嫩枝、块茎、嫩梢和根茎。
10.如权利要求8所述的组合物,其中所述茎皮为主干树皮。
11.如权利要求8所述的组合物,其中所述生殖器官为种子和花。
12.如权利要求1或2所述的组合物,其中所述无取代B环类黄酮分离自黄芩属植物中的一种或多种植物,所述黄烷分离自金合欢属植物中的一种或多种植物。
13.如权利要求1所述的组合物,其中-OR为-OCH3
14.如权利要求1所述的组合物,其中-SR为-SCH3
15.权利要求1-14中任一项权利要求所述的组合物在制备用于减轻关节疼痛的药物中的应用。
16.权利要求1-14中任一项权利要求所述的组合物在制备用于减轻关节僵硬的药物中的应用。
17.权利要求1-14中任一项权利要求所述的组合物在制备用于改善活动能力的药物中的应用。
CN2009101641172A 2002-04-30 2003-04-30 作为治疗剂的包含无取代b环类黄酮和黄烷混合物的组合物 Expired - Lifetime CN101837003B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US37716802P 2002-04-30 2002-04-30
US60/377,168 2002-04-30

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB038098210A Division CN100544715C (zh) 2002-04-30 2003-04-30 作为治疗剂的包含无取代b环类黄酮和黄烷混合物的组合物

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101837003A CN101837003A (zh) 2010-09-22
CN101837003B true CN101837003B (zh) 2013-09-04

Family

ID=29401452

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2009101641172A Expired - Lifetime CN101837003B (zh) 2002-04-30 2003-04-30 作为治疗剂的包含无取代b环类黄酮和黄烷混合物的组合物
CNB038098210A Expired - Lifetime CN100544715C (zh) 2002-04-30 2003-04-30 作为治疗剂的包含无取代b环类黄酮和黄烷混合物的组合物

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB038098210A Expired - Lifetime CN100544715C (zh) 2002-04-30 2003-04-30 作为治疗剂的包含无取代b环类黄酮和黄烷混合物的组合物

Country Status (16)

Country Link
US (5) US7514469B2 (zh)
EP (2) EP2108370A1 (zh)
JP (2) JP4723239B2 (zh)
KR (1) KR100621234B1 (zh)
CN (2) CN101837003B (zh)
AT (1) ATE438393T1 (zh)
AU (1) AU2003228777C1 (zh)
BR (1) BRPI0309689B1 (zh)
CA (2) CA2703698C (zh)
DE (1) DE60328676D1 (zh)
DK (1) DK1503778T3 (zh)
ES (1) ES2330097T3 (zh)
HK (2) HK1073247A1 (zh)
NZ (1) NZ535988A (zh)
RU (1) RU2379031C2 (zh)
WO (1) WO2003092599A2 (zh)

Families Citing this family (95)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050096281A1 (en) * 2002-03-01 2005-05-05 Unigen Pharmaceuticals, Inc. Formulation of a mixture of Free-B-Ring flavonoids and flavans for use in the prevention and treatment of cognitive decline and age-related memory impairments
US7972632B2 (en) 2003-02-28 2011-07-05 Unigen Pharmaceuticals, Inc. Identification of Free-B-Ring flavonoids as potent COX-2 inhibitors
US7108868B2 (en) 2002-03-22 2006-09-19 Unigen Pharmaceuticals, Inc. Isolation of a dual cox-2 and 5-lipoxygenase inhibitor from acacia
EP2108370A1 (en) 2002-04-30 2009-10-14 Unigen Pharmaceuticals, Inc. Formulation of a mixture of free-B-ring flavonoids and flavans as a therapeutic agent
US8034387B2 (en) * 2002-04-30 2011-10-11 Unigen, Inc. Formulation of a mixture of free-B-ring flavonoids and flavans for use in the prevention and treatment of cognitive decline and age-related memory impairments
US8945518B2 (en) 2002-04-30 2015-02-03 Unigen, Inc. Formulation of dual eicosanoid system and cytokine system inhibitors for use in the prevention and treatment of oral diseases and conditions
US20040097429A1 (en) * 2002-11-18 2004-05-20 Nieuwenhuizen Arie Gijsbert Method for the reduction of the mammalian appetite
WO2004075844A2 (en) * 2003-02-26 2004-09-10 Unigen Pharmaceuticals, Inc. Formulation for use in the prevention and treatment of carbohydrate induced diseases and conditions
BRPI0409179A (pt) 2003-04-04 2006-05-02 Unigen Pharmaceuticals Inc formulação de inibidores duplos de ciclooxigenase (cox) e lipoxigenase (lox) para cuidados com a pele de mamìferos
JP2007502288A (ja) 2003-08-12 2007-02-08 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー オキシム置換イミダゾ含有化合物
AU2004268625B2 (en) 2003-08-27 2011-03-31 3M Innovative Properties Company Aryloxy and arylalkyleneoxy substituted imidazoquinolines
JP2007504269A (ja) 2003-09-05 2007-03-01 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー Cd5+b細胞リンパ腫の治療方法
ES2544477T3 (es) 2003-10-03 2015-08-31 3M Innovative Properties Company Imidazoquinolinas sustituidas con alcoxi
US7544697B2 (en) 2003-10-03 2009-06-09 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Pyrazolopyridines and analogs thereof
EP1682544A4 (en) 2003-11-14 2009-05-06 3M Innovative Properties Co HYDROXYLAMINE SUBSTITUTED IMIDAZO RING COMPOUNDS
CA2545774A1 (en) 2003-11-14 2005-06-02 3M Innovative Properties Company Oxime substituted imidazo ring compounds
NZ547467A (en) 2003-11-25 2010-06-25 3M Innovative Properties Co Substituted imidazo ring system and methods
JP2007517035A (ja) 2003-12-29 2007-06-28 スリーエム イノベイティブ プロパティズ カンパニー アリールアルケニルおよびアリールアルキニル置換されたイミダゾキノリン
EP1699788A2 (en) 2003-12-30 2006-09-13 3M Innovative Properties Company Imidazoquinolinyl, imidazopyridinyl and imidazonaphthyridinyl sulfonamides
US8697873B2 (en) 2004-03-24 2014-04-15 3M Innovative Properties Company Amide substituted imidazopyridines, imidazoquinolines, and imidazonaphthyridines
AU2005249147B2 (en) 2004-06-04 2011-03-24 Poly Gain Pte Ltd Natural sweetener
WO2005123080A2 (en) 2004-06-15 2005-12-29 3M Innovative Properties Company Nitrogen-containing heterocyclyl substituted imidazoquinolines and imidazonaphthyridines
US8026366B2 (en) 2004-06-18 2011-09-27 3M Innovative Properties Company Aryloxy and arylalkyleneoxy substituted thiazoloquinolines and thiazolonaphthyridines
WO2006038923A2 (en) 2004-06-18 2006-04-13 3M Innovative Properties Company Aryl substituted imidazonaphthyridines
WO2006065280A2 (en) 2004-06-18 2006-06-22 3M Innovative Properties Company Isoxazole, dihydroisoxazole, and oxadiazole substituted imidazo ring compounds and methods
KR100610562B1 (ko) * 2004-06-28 2006-08-08 재단법인서울대학교산학협력재단 플라보노이드 유도체를 포함하는 급성 또는 만성 퇴행성뇌질환의 예방 또는 치료용 조성물
KR100545304B1 (ko) * 2004-09-01 2006-05-08 주식회사 유니젠 아선약을 포함하는 운카리아 속 식물, 또는 이의 황금및/또는 녹차의 배합물을 포함하는 사이클로옥시게나제및/또는 5-리폭시게나제 억제용 조성물
CA2584528A1 (en) * 2004-09-17 2006-03-23 Oystershell Nv Composition for inhibiting or preventing the formation of a biofilm
TW200630102A (en) * 2004-10-19 2006-09-01 Unigen Pharmaceuticals Inc Formulation of dual eicosanoid system and cytokine system inhibitors for use in the prevention and treatment of oral diseases and conditions
US20060140881A1 (en) 2004-12-22 2006-06-29 Guofeng Xu Oral care compositions containing flavonoids and flavans
CN101141999A (zh) * 2004-12-22 2008-03-12 高露洁-棕榄公司 含有类黄酮和黄烷的口腔护理组合物
ES2392647T3 (es) 2004-12-30 2012-12-12 3M Innovative Properties Company Compuestos tetracíclicos quirales que inducen la biosíntesis de interferón
US8034938B2 (en) 2004-12-30 2011-10-11 3M Innovative Properties Company Substituted chiral fused [1,2]imidazo[4,5-c] ring compounds
WO2006084251A2 (en) 2005-02-04 2006-08-10 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Aqueous gel formulations containing immune reponse modifiers
US7968563B2 (en) 2005-02-11 2011-06-28 3M Innovative Properties Company Oxime and hydroxylamine substituted imidazo[4,5-c] ring compounds and methods
JP4823538B2 (ja) * 2005-02-28 2011-11-24 株式会社mimozax アカシア属樹皮由来物を含有する抗肥満組成物
CN101175406B (zh) * 2005-03-10 2012-11-21 尤尼根公司 作为治疗剂的无取代b环类黄酮和黄烷的混合物制剂
EP1869043A2 (en) 2005-04-01 2007-12-26 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Pyrazolopyridine-1,4-diamines and analogs thereof
AU2006232375A1 (en) 2005-04-01 2006-10-12 Coley Pharmaceutical Group, Inc. 1-substituted pyrazolo (3,4-c) ring compounds as modulators of cytokine biosynthesis for the treatment of viral infections and neoplastic diseases
CN101203270B (zh) * 2005-06-03 2014-07-02 视界科技有限公司 具有体重再分配性能的物质
KR100729731B1 (ko) 2005-07-19 2007-06-20 건국대학교 산학협력단 사람 피부 세포의 세포사멸을 억제하는 활성을 갖는플라보노이드
AU2006308596A1 (en) * 2005-11-01 2007-05-10 Mars, Incorporated Flavanols and B-type procyanidins and inflammation
JP2009518439A (ja) * 2005-12-09 2009-05-07 メタプロテオミクス,エルエルシー ホップ及びアカシア産物によるプロテインキナーゼ調節
US20070140990A1 (en) 2005-12-21 2007-06-21 Nataly Fetissova Oral Compositions Comprising Propolis
WO2007108042A1 (ja) * 2006-03-15 2007-09-27 Tropical Technology Center Ltd. 抗炎症剤
US20080003300A1 (en) * 2006-06-30 2008-01-03 Gaffar Maria C Compostions containing Mg/Zn/F-CaP plus inhibitors of pro-inflammatory Cytokines (a combination of a Free-B-Ring flavonoids and a flavan) for osteoporosis prevention, therapy and treatment of bone diseases
WO2008008432A2 (en) 2006-07-12 2008-01-17 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Substituted chiral fused( 1,2) imidazo (4,5-c) ring compounds and methods
US9682256B2 (en) * 2006-07-14 2017-06-20 Colgate-Palmolive Company Methods of making compositions comprising films
KR20140011430A (ko) 2006-08-10 2014-01-28 가부시키가이샤 미모잭스 아카시아속 나무 껍질 유래물을 함유하는 항산화 조성물
US8128969B2 (en) 2006-08-10 2012-03-06 Mimozax Co., Ltd. Hypoglycemic composition containing acacia bark derivative
US8124138B2 (en) 2006-08-10 2012-02-28 Mimozax Co., Ltd. Composition for prevention and/or treatment of pruritus containing acacia bark derivative
CN101505776B (zh) * 2006-08-10 2013-12-04 株式会社mimozax 含有来自金合欢属树皮的物质的抗肥胖组合物
CN101505777B (zh) * 2006-08-10 2012-05-30 株式会社mimozax 含有来自金合欢属树皮的物质的肿瘤的预防和/或治疗用组合物
MX2009002413A (es) * 2006-09-19 2009-03-20 Horizon Science Pty Ltd Extractos derivados de la caña de azucar y un proceso para su manufactura.
KR100761248B1 (ko) 2006-10-12 2007-10-04 주식회사 유니젠 대나무 및 황금 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피성피부염 치료를 위한 조성물
US8517728B2 (en) 2007-01-24 2013-08-27 Colgate-Palmolive Company Oral care implement having fluid delivery system
US20080261898A1 (en) * 2007-04-17 2008-10-23 Liao Heather H Composition and method for cancer treatment and prevention
CN101938983A (zh) * 2008-02-08 2011-01-05 高露洁-棕榄公司 口腔护理产品及其使用方法
MX2010009314A (es) * 2008-02-25 2010-09-24 Nestec Sa Polifenoles para el tratamiento de padecimientos de cartilago.
TWI366466B (en) * 2008-05-08 2012-06-21 Ind Tech Res Inst Herbal extracts capable of inducing immune cells to produce interferon and activating toll-like receptors and the preparation thereof
TWI522109B (zh) * 2009-01-26 2016-02-21 臺北醫學大學 蕨素化合物用於治療糖尿病及肥胖之用途
NZ624963A (en) 2009-04-29 2016-07-29 Amarin Pharmaceuticals Ie Ltd Pharmaceutical compositions comprising epa and a cardiovascular agent and methods of using the same
KR101582907B1 (ko) * 2010-10-27 2016-01-08 주식회사 성균바이오텍 등골나물속 추출물을 유효성분으로 하는 비만 또는 골대사질환 예방 또는 치료용 조성물
WO2012106761A1 (en) 2011-02-08 2012-08-16 Horizon Science Pty Ltd Sugar extracts
AU2011361752B2 (en) 2011-03-09 2015-01-22 Colgate-Palmolive Company Interdental cleaning device
KR20120132114A (ko) * 2011-05-27 2012-12-05 한국생명공학연구원 오고닌을 유효성분으로 함유하는 천식 예방 또는 치료용 약학적 조성물
JP6203469B2 (ja) * 2011-06-03 2017-09-27 花王株式会社 歯磨組成物
CN102579590A (zh) * 2012-02-18 2012-07-18 贾古友 一种治疗膝关节骨性关节炎的药物
US10357508B2 (en) 2012-03-19 2019-07-23 Buck Institute For Research On Aging APP specific BACE inhibitors (ASBIs) and uses thereof
CN102755311A (zh) * 2012-07-05 2012-10-31 吉林大学 千层纸素a在制备治疗肺炎药物中的应用
CN104780987B (zh) 2012-08-28 2018-10-30 产品制造商(澳大利亚)有限公司 提取方法
US9897565B1 (en) 2012-09-11 2018-02-20 Aseko, Inc. System and method for optimizing insulin dosages for diabetic subjects
US9171343B1 (en) 2012-09-11 2015-10-27 Aseko, Inc. Means and method for improved glycemic control for diabetic patients
MX357206B (es) 2012-10-26 2018-06-29 Colgate Palmolive Co Implemento para el cuidado bucal.
TWI825378B (zh) 2013-06-17 2023-12-11 美商優力竟股份有限公司 用於關節健康之組合物及方法
WO2015015509A2 (en) * 2013-08-02 2015-02-05 Council Of Scientific & Industrial Research Ulmoside-a: useful for prevention or cure of metabolic diseases
WO2015021512A1 (en) 2013-08-16 2015-02-19 Horizon Science Pty Ltd Sugar cane derived extracts and methods of treatment
US9486580B2 (en) 2014-01-31 2016-11-08 Aseko, Inc. Insulin management
US9898585B2 (en) 2014-01-31 2018-02-20 Aseko, Inc. Method and system for insulin management
AU2015277265B2 (en) * 2014-06-16 2018-03-01 Unigen, Inc. Compositions and methods for managing or improving bone disorders, cartilage disorders, or both
US10583161B2 (en) * 2014-06-16 2020-03-10 Unigen, Inc. Compositions and methods for managing or improving bone disorders, joint disorders, cartilage disorders, or a combination thereof
CN104083390A (zh) * 2014-06-28 2014-10-08 广西大学 6,7-二羟基-5-β-D-吡喃葡萄糖-4`-β-O-D-吡喃葡萄糖黄酮在制备抗炎药物中的用途
US11081226B2 (en) 2014-10-27 2021-08-03 Aseko, Inc. Method and controller for administering recommended insulin dosages to a patient
US9892234B2 (en) 2014-10-27 2018-02-13 Aseko, Inc. Subcutaneous outpatient management
CN104721210B (zh) * 2015-03-16 2017-10-13 中国药科大学 千层纸素苷在制备抗肿瘤转移药中的应用
EP3337402A4 (en) 2015-08-20 2019-04-24 Aseko, Inc. THERAPY ADVISER FOR THE MANAGEMENT OF DIABETES
CN106727492A (zh) * 2016-12-22 2017-05-31 黄冈师范学院 一种多甲氧基黄酮在制备治疗皮肤乳头状瘤的药物上的应用
EP3638277A4 (en) * 2017-06-15 2021-03-17 Sami Labs Limited COMPOSITIONS AND PROCEDURES FOR INHIBITING BETA SECRETASE
US20210052543A1 (en) * 2018-01-09 2021-02-25 Brigham Young University Compositions and Methods for Treating Pain with Wogonin
CN108610394B (zh) * 2018-05-07 2021-08-31 深圳市维琪医药研发有限公司 一种拟肽类化合物的制备纯化方法以及应用
CN111803632B (zh) 2019-04-09 2022-04-29 北京五和博澳药业股份有限公司 黄酮多酚类药物自乳化组合物、其制备方法、药物组合物及用途
US11351102B2 (en) * 2019-08-26 2022-06-07 Sami-Sabinsa Group Limited Plant actives and their anti-pollution effects thereof
CA3187750A1 (en) 2020-07-30 2022-02-03 Mesfin Yimam A standardized bioflavonoid composition for regulation of homeostasis of host defense mechanism
CN112156120B (zh) * 2020-11-09 2021-11-02 中国科学院新疆理化技术研究所 一种帚枝香青正丁醇提取物的用途
DE202022106782U1 (de) 2022-12-03 2022-12-19 Mohammed Azeemuddin Antiurolithiatische, antiosteoporotische, antidiabetische und entzündungshemmende Zusammensetzung eines Polykräuterextraktes

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1093914A (zh) * 1993-07-04 1994-10-26 钟定铨 万应喉风散及其制造方法
US6093403A (en) * 1997-08-01 2000-07-25 Phytocell Research, Inc. Sugar imbalance and diabetes treating herbal formulation

Family Cites Families (203)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3686872A (en) * 1970-06-30 1972-08-29 Anthony James Whitworth Soil grouting process
US3706581A (en) * 1970-10-05 1972-12-19 Borden Co Soil grouting process and composition
US4035510A (en) 1976-09-15 1977-07-12 Scott Eugene J Van Treatment of acne utilizing N-methyldiethanolamine
US4201776A (en) 1977-01-31 1980-05-06 The Green Cross Corporation Food additive for reinforcing foods deficient in fiber content
GB2024817B (en) 1978-03-15 1982-09-22 Wellcome Found Flavan derivatives
US4268517A (en) * 1979-08-30 1981-05-19 Continental Pharma Pharmaceutical composition and therapeutical method for treating degenerative affections of the articular cartilage
JPS5738721A (en) 1980-08-20 1982-03-03 Wataru Sakai Production of bamboo extract having effect for hemorrhoids
JPS57109720A (en) * 1980-12-22 1982-07-08 Continentalfuaama Medicine containing (+)-catechine and/or its salt for degenerated disease of articular gristle
US4374824A (en) * 1981-01-27 1983-02-22 Krishan Dyal Mathur Dentifrice
GB2115409B (en) 1982-02-24 1985-08-07 Zyma Sa Novel crystal modifications of (+)-catechin
JPS6150921A (ja) 1984-08-20 1986-03-13 Ichimaru Fuarukosu Kk バイカリンの精製化法
JPS6183179A (ja) 1984-09-28 1986-04-26 Otsuka Pharmaceut Co Ltd 新規フラボン誘導体
JPS61161219A (ja) 1985-01-08 1986-07-21 Osaka Chem Lab アトピ−性皮膚炎症用化粧料組成物
JPS61233627A (ja) 1985-04-10 1986-10-17 Agency Of Ind Science & Technol 肥満細胞脱顆粒抑制剤
JPS61238719A (ja) 1985-04-17 1986-10-24 Shiseido Co Ltd 頭髪化粧料
JPH0755895B2 (ja) 1985-08-29 1995-06-14 サンスター株式会社 歯磨組成物
US4627977A (en) 1985-09-13 1986-12-09 Colgate-Palmolive Company Anticalculus oral composition
JPS6327435A (ja) 1986-07-18 1988-02-05 Ichimaru Pharcos Co Ltd バイカレイン高含有エキスの抽出法
WO1988000970A2 (en) 1986-08-08 1988-02-11 Regents Of The University Of Minnesota Method of culturing leukocytes
US5156835A (en) 1987-01-30 1992-10-20 Colgate-Palmolive Company Antibacterial antiplaque oral composition
IN168400B (zh) 1987-01-30 1991-03-23 Colgate Palmolive Co
CA1308661C (en) 1987-06-26 1992-10-13 Masayasu Kurono AGENT FOR INHIBITING BINDING OF 5.alpha.-DIHYDRO-TESTOSTERONE WITH ANDROGEN RECEPTOR AS WELL AS PROCESS FOR OBTAINING SAME
US5098709A (en) 1987-07-21 1992-03-24 Kang Kwon J Method of administrating a fused salt from natural substances, namely ginkgo, persimmon, pine, and bamboo in the treatment of inflammations
JPH0662408B2 (ja) 1987-10-01 1994-08-17 太陽化学株式会社 抗う蝕及び抗歯周病組成物
FR2628317B1 (fr) * 1988-03-09 1991-11-08 Lvmh Rech Composition a base de phases lamellaires lipidiques hydratees ou de liposomes contenant un extrait de scutellaria, ou au moins un flavonoide tel que baicaleine ou baicaline et composition cosmetique ou pharmaceutique, notamment dermatologique, a activite anti-allergique, anti-inflammatoire ou anti-vieillissement, l'incorporant
US4965067A (en) 1988-08-10 1990-10-23 The Proctor & Gamble Company Oral compositions
US4942333A (en) 1988-12-05 1990-07-17 North American Philips Corporation Shadow mask with border pattern
JPH0755895Y2 (ja) 1989-04-04 1995-12-25 函館製網船具株式会社 多段式養殖籠
US4946684A (en) 1989-06-20 1990-08-07 American Home Products Corporation Fast dissolving dosage forms
FR2651132B1 (fr) * 1989-08-30 1993-01-08 Pacific Chem Co Ltd Agents de protection des cellules contre les especes chimiques a oxygene actif et leur preparation.
JPH03240725A (ja) * 1990-02-15 1991-10-28 Senjiyu Seiyaku Kk メイラード反応阻害剤
JPH03251518A (ja) 1990-02-26 1991-11-11 Ichimaru Pharcos Co Ltd 竹から抽出されたフケ菌発育阻害成分を含有する皮膚・頭皮・頭髪剤
JP3133095B2 (ja) * 1990-04-25 2001-02-05 兆岐 史 消化器病変組織の硬化剤
JP2704783B2 (ja) 1990-05-23 1998-01-26 長谷川香料株式会社 飲食品のフレーバー劣化防止方法
CN1028604C (zh) 1990-06-13 1995-05-31 成都中医学院 一种中药鲜竹沥的制备方法
US5585371A (en) 1990-08-29 1996-12-17 Humanetics Corporation Treatment of immune system with Δ5-androstenes
US5096701A (en) 1990-12-18 1992-03-17 The Procter & Gamble Company Oral compositions
JP3802555B2 (ja) 1991-12-17 2006-07-26 フイズ テクノロジーズ リミテッド 潰瘍予防及び治療組成物並びに方法
JPH05271088A (ja) 1991-12-27 1993-10-19 Ruibosuteii Japan:Kk 皮膚疾患・免疫反応による組織障害改善治療剤
FR2687572B1 (fr) 1992-02-26 1995-06-09 Oreal Utilisation de certains flavonouides dans des compositions cosmetiques, et procede de protection de la peau, ses phaneres et des compositions cosmetiques.
JPH05331061A (ja) 1992-06-01 1993-12-14 Tsumura & Co アポトーシス誘起剤
JPH05331161A (ja) 1992-05-27 1993-12-14 Tsumura & Co クロモン誘導体及び該化合物を有効成分とするアルドー スリダクターゼ阻害剤
US5605929A (en) * 1992-05-27 1997-02-25 Arch Development Corp. Methods and compositions for inhibiting 5α-reductase activity
JPH08104268A (ja) 1992-07-23 1996-04-23 Joji Maruyama 自転車の駐輪装置
US5650432A (en) * 1995-03-24 1997-07-22 Jlb, Inc. Method of treating or preventing non-viral microbial infection
US5320830A (en) 1992-12-30 1994-06-14 The Procter & Gamble Company Oral compositions
US5364845C1 (en) 1993-03-31 2002-09-10 Nutramax Lab Inc Glusosamine chondroitin and manganese composition for the protection and repair of connective tissue
JPH0710768A (ja) 1993-05-24 1995-01-13 Suntory Ltd マメ科植物抽出物を有効成分とするヒアルロニダーゼ阻害剤
CN1096680A (zh) 1993-06-19 1994-12-28 金赞星 治疗脑血管病的药
JP3529811B2 (ja) 1993-06-30 2004-05-24 三省製薬株式会社 皮膚外用剤
JPH0725761A (ja) 1993-07-09 1995-01-27 Kureha Chem Ind Co Ltd 軟骨保護剤
GB9317071D0 (en) 1993-08-17 1993-09-29 Univ Strathclyde Flavonoids
CN1101856A (zh) * 1993-10-20 1995-04-26 宋海 一种治疗烧、烫伤的中药烫可喷
JP3811198B2 (ja) 1993-11-17 2006-08-16 株式会社創研 米からの抗アレルギー剤
JP3222672B2 (ja) 1993-12-16 2001-10-29 三井農林株式会社 タンパク質合成阻害剤
CN1043406C (zh) 1993-12-27 1999-05-19 尚庆英 复方清带散的制备方法
JPH07223941A (ja) 1994-02-14 1995-08-22 Nippon Ham Kk 抗補体作用物質
JP3412228B2 (ja) 1994-02-23 2003-06-03 松下電器産業株式会社 ガス遮断装置
JPH07242555A (ja) 1994-03-08 1995-09-19 Suntory Ltd グルコシルトランスフェラーゼ阻害剤およびこれを有効成分として含有する抗う蝕剤並びに抗う蝕性食品
JP2711630B2 (ja) 1994-04-07 1998-02-10 株式会社大阪薬品研究所 皮膚外用剤
EP0768079B1 (en) 1994-06-30 2003-05-28 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Hair growth stimulant
TW235922B (en) 1994-07-06 1994-12-11 Amboo Devise Co Ltd A production process of deodorant
JPH0826969A (ja) 1994-07-15 1996-01-30 Osaka Yakuhin Kenkyusho:Kk 化粧料組成物
KR960003725A (ko) 1994-07-16 1996-02-23 신국현 황금의 후라보노이드 성분으로 된 백내장 치료제
JPH08104628A (ja) * 1994-10-04 1996-04-23 Sumitomo Pharmaceut Co Ltd マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤
US5545411A (en) * 1994-12-16 1996-08-13 Bristol-Myers Squibb Company Method for lowering viscosity by use of gum acacia
KR960040370A (ko) 1995-05-01 1996-12-17 강상모 알콜 장해 예방 및 치료제 조성물
US5589160A (en) 1995-05-02 1996-12-31 The Procter & Gamble Company Dentifrice compositions
CA2175985A1 (en) 1995-05-10 1996-11-11 Yoichi Kiyosuke Pharmaceutical composition containing substance inhibiting hsp47 production
JP3488325B2 (ja) 1995-09-28 2004-01-19 株式会社大和生物研究所 笹茶及びその製造方法
GB2306321A (en) * 1995-10-24 1997-05-07 Anne Child The use of (+)-catechin in the treatment or prophylaxis of connective tissue disorders
JPH09227374A (ja) 1996-02-28 1997-09-02 Taiyo Kagaku Co Ltd ストレスタンパク質産生抑制組成物
CN1159019C (zh) 1996-04-02 2004-07-28 火星有限公司 可提取物化合物以及其制备方法和用途
JPH09278662A (ja) 1996-04-10 1997-10-28 Nof Corp 抗アレルギー剤
JPH1025238A (ja) 1996-07-10 1998-01-27 Mikimoto Pharmaceut Co Ltd 皮膚外用剤
US5773014A (en) 1996-10-07 1998-06-30 Bioetica, Inc. Compositions and methods for inhibiting the formation of unwanted skin pigmentation
JPH10130162A (ja) 1996-10-31 1998-05-19 Kanebo Ltd ヒアルロン酸分解阻害剤、ヒアルロン酸異常分解疾患治療剤および化粧料
US5817299A (en) 1996-11-01 1998-10-06 E-L Management Corp. Non-chemical sunscreen composition
US6197808B1 (en) * 1996-11-18 2001-03-06 Cancer Instititute (Hospital), Chinese Academy Of Medical Sciences Methods for treating hyperplasia
JP3213557B2 (ja) * 1996-11-18 2001-10-02 三井農林株式会社 茶カテキンを有効成分として含有する尖圭コンジローマ治療剤
US5968973A (en) 1996-11-18 1999-10-19 Cancer Institute (Hospital), Chinese Academy Of Medical Sciences Method for treating hyperplasia
JPH10167960A (ja) 1996-12-12 1998-06-23 Les-Bell:Kk 肝細胞ガン再発抑制剤
JPH10182415A (ja) 1996-12-20 1998-07-07 Rashieru Seiyaku Kk 化粧料組成物
US5804168A (en) 1997-01-29 1998-09-08 Murad; Howard Pharmaceutical compositions and methods for protecting and treating sun damaged skin
US5962517A (en) * 1997-01-31 1999-10-05 Murad; Howard Pharmaceutical compositions and methods for treating acne
CN1189365A (zh) 1997-01-31 1998-08-05 雷学军 抗艾滋病病毒、梅毒螺旋体、淋菌、滴虫的药物
IN186803B (zh) * 1997-02-05 2001-11-10 Panacea Biotec Ltd
GB9704904D0 (en) 1997-03-10 1997-04-30 Riley Fletcher Foundation The Essential oil composition
US5766614A (en) 1997-03-20 1998-06-16 Yong; Liu Burn treatment compositions containing herbal mix
WO1998042363A1 (fr) 1997-03-21 1998-10-01 Shiseido Company, Ltd. Immunostimulants
JPH10287528A (ja) 1997-04-07 1998-10-27 Rashieru Seiyaku Kk 化粧料組成物
JP4231559B2 (ja) * 1997-04-23 2009-03-04 オリザ油化株式会社 リポキシゲナーゼ阻害剤
PL187310B1 (pl) 1997-04-29 2004-06-30 Antoni Gwardys Naturalny preparat przeciwutleniający
US6243841B1 (en) * 1997-05-30 2001-06-05 Texas Instruments Incorporated Automated test and evaluation sampling system and method
US5886155A (en) 1997-06-18 1999-03-23 Bioresources International Inc. Purification of miraculin glycoprotein using tandem hydrophobic interaction chromatography
IN1997DE01715A (zh) 1997-06-24 2015-07-31 Council Scient Ind Res
KR19990015612A (ko) 1997-08-07 1999-03-05 한영복 황백피와 마타리 식물의 혼합추출물을 함유하는 c형 간염 치료제조성물
US5886029A (en) * 1997-09-05 1999-03-23 Dhaliwal; Kirpal S. Method and composition for treatment of diabetes
WO1999018688A1 (en) 1997-10-02 1999-04-15 Nikko Co., Ltd. Apparatus for protecting against radiowave transmission from a mobile communication device
CN1062753C (zh) 1997-10-21 2001-03-07 陈新学 防治眼睛疾病的药物
JP4738592B2 (ja) 1997-10-31 2011-08-03 アーチ・デヴェロップメント・コーポレイション 5α−還元酵素活性を調節するための方法及び組成物
US6696484B2 (en) * 1997-10-31 2004-02-24 University Of Chicago Office Of Technology And Intellectual Property Method and compositions for regulation of 5-alpha reductase activity
JPH11140497A (ja) 1997-10-31 1999-05-25 Amyuure:Kk カテキン入り石鹸
ID23921A (id) 1997-11-04 2000-05-25 Pfizer Prod Inc Penggantian indazola bioisostere katekol pada senyawa-senyawa aktif untuk terapi
US6221341B1 (en) 1997-11-19 2001-04-24 Oraceutical Llc Tooth whitening compositions
US6083921A (en) * 1998-01-12 2000-07-04 Xu; Kai Jian Pharmaceutical compositions and method of using same
US5922756A (en) 1998-02-14 1999-07-13 Chan; Marion Man-Ying Method of inhibiting nitric oxide synthase
CN1066055C (zh) 1998-03-17 2001-05-23 浙江农业大学 从竹叶中提取黄酮类化合物浸膏或粉剂的生产方法
US5908628A (en) 1998-05-01 1999-06-01 Hou; Liping Compositions with analgesic, antipyretic and antiinflammatory properties
EP0956867A1 (de) * 1998-05-12 1999-11-17 Franz-Peter Dr. Liebel Verwendung von Flavonoidglykosiden, Gerbstoffen und Mikroorganismen zur Therapie und Prophylaxe des Diabetes mellitus
FR2778663B1 (fr) 1998-05-15 2001-05-18 Coletica Nouveaux esters de flavonoides,leur utilisation en cosmetique, dermopharmacie, en pharmacie et en agro-alimentaire
US6043694A (en) 1998-06-24 2000-03-28 Siemens Aktiengesellschaft Lock arrangement for a calibrated DLL in DDR SDRAM applications
JP2000044481A (ja) 1998-07-30 2000-02-15 Sunstar Inc 皮膚外用剤
US6080401A (en) * 1998-11-19 2000-06-27 Reddy; Malireddy S. Herbal and pharmaceutical drugs enhanced with probiotics
JP4507027B2 (ja) * 1998-12-04 2010-07-21 明治乳業株式会社 Mmp阻害剤
US6194469B1 (en) 1998-12-11 2001-02-27 Board Of Trustees Operating Michigan State Univeristy Method for inhibiting cyclooxygenase and inflammation using cherry bioflavonoids
US20020098207A1 (en) * 1999-02-08 2002-07-25 Daniel H. Maes Cholesterol sulfate compositions for enhancement of stratum corneum function
US6264926B1 (en) 1999-02-12 2001-07-24 Council Of Scientific And Industrial Research Formulation useful as a natural herbal tooth powder
US6241972B1 (en) 1999-02-19 2001-06-05 Block Drug Company, Inc. Oral care formulation for the treatment of sensitivity teeth
KR100317112B1 (ko) 1999-03-18 2001-12-22 한영복 지모와 황백피의 혼합 수추출물을 포함하는 염증 및 통증 치료용조성물 및 그 제조 방법
EP1093376A1 (en) 1999-04-08 2001-04-25 Metagenics, Inc. Composition and method for treatment of inflammation and pain in mammals
US6333304B1 (en) 1999-04-20 2001-12-25 Teresa K. Bath Therapeutic compositions containing glucosamine, collagen and a bioflavanol for repair and maintenance of connective tissue
AU4550100A (en) 1999-05-05 2000-11-21 Herzog, Leslie J. Food product
JP4082823B2 (ja) 1999-05-06 2008-04-30 日本メナード化粧品株式会社 光毒性抑制剤
JP4521894B2 (ja) * 1999-05-28 2010-08-11 明治乳業株式会社 マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤
JP2003501381A (ja) * 1999-06-07 2003-01-14 ユニバーシティ・オブ・シェフィールド 関節炎の処置
KR20010017481A (ko) 1999-08-11 2001-03-05 신상국 여드름 제거용 음료 조성물 및 그 제조방법
JP2001187744A (ja) 1999-10-19 2001-07-10 Tasuku Okuda 細胞活性化剤及びこれを用いた製品
US6264995B1 (en) * 1999-10-19 2001-07-24 Thomas Newmark Herbal composition for reducing inflammation and methods of using same
WO2001030341A1 (fr) 1999-10-25 2001-05-03 Japan As Represented By Director General Of Agency Of National Cancer Center Inhibiteurs de l'expression de la cyclo-oxygenase-2
KR100390639B1 (ko) 2000-01-12 2003-07-07 김미정 대나무 잎 추출물을 유효성분으로 첨가한 식품조성물의 제조방법
US6248341B1 (en) 2000-01-14 2001-06-19 Color Access, Inc. Method of treating topical angiogenesis-related disorders
JP2001220353A (ja) 2000-02-07 2001-08-14 Noevir Co Ltd ホスフォリパーゼa2阻害剤
US6290995B1 (en) * 2000-02-08 2001-09-18 Zhao Xinxian Plant drug for preventing cancer II
KR100364383B1 (ko) 2000-02-10 2002-12-18 김호철 신경보호작용을 갖는 황금추출물 및 이를 함유하는 약학적제제
EP1127572A3 (en) * 2000-02-25 2003-05-02 Basf Aktiengesellschaft Use of flavones for treating cycloxygenase-2 mediated diseases
US20020086070A1 (en) * 2000-03-11 2002-07-04 Kuhrts Eric Hauser Anti-inflammatory and connective tissue repair formulations
CN1436074A (zh) 2000-04-11 2003-08-13 宝生物工程株式会社 治疗剂
US20030170186A1 (en) 2000-04-18 2003-09-11 Bernadette Geers Novel flavone glycoside derivatives for use in cosmetics, pharmaceuticals and nutrition
US20020016358A1 (en) 2000-04-19 2002-02-07 Nof Corporation Cosmetic composition
US6475530B1 (en) * 2000-05-31 2002-11-05 Eric H. Kuhrts Methods and compositions for producing weight loss
JP4719372B2 (ja) 2000-06-21 2011-07-06 花王株式会社 Ppar依存的遺伝子転写活性化剤
US6319523B1 (en) 2000-06-29 2001-11-20 James H. Zhou Composition and method for inhibiting oral bacteria
ATE372764T1 (de) 2000-07-26 2007-09-15 Hououdou Co Ltd Antipruritische zusammensetzungen und die wundheilung fördernde zusammensetzungen
WO2002009699A2 (en) 2000-07-28 2002-02-07 Immupharm Aps Method of treating symptoms of common cold, allergic rhinitis and infections relating to the respiratory tract
JP2002053484A (ja) * 2000-08-07 2002-02-19 Asahi Breweries Ltd リパーゼ阻害剤およびそれを含む飲食品
KR100417791B1 (ko) 2000-08-14 2004-02-11 미즈코리아 주식회사 항균 및 미용기능을 갖는 생약추출물과 이를 함유한 제품
CN1285202A (zh) 2000-08-26 2001-02-28 田积天 火清正阳帖
KR20020031608A (ko) 2000-10-19 2002-05-03 이응세 항균효과가 우수한 황금 추출물, 그의 제조방법 및 그를포함하는 약학적 조성물
JP4708675B2 (ja) 2000-11-03 2011-06-22 プロテオテック・インコーポレーテッド ウンカリア・トメントーサおよび関連植物からアミロイド阻害化合物を単離する方法ならびに単離した化合物の使用
FR2816839B1 (fr) 2000-11-20 2003-09-26 Schwartz Laboratoires Robert Produit preparant et protegeant la peau contre les rayons uv, agissant a l'encontre du vieillissement cellulaire et excercant une action immunostimulante
CA2431044A1 (en) 2000-12-13 2002-06-20 University Of Rochester Oral compositions and use thereof
JP2004517838A (ja) * 2000-12-15 2004-06-17 ファルマシア・コーポレーション 非食用植物抽出物による選択的cox−2阻害
EP1401460A2 (en) * 2000-12-15 2004-03-31 Pharmacia Corporation Selective cox-2 inhibition from plant extracts
US6555573B2 (en) * 2000-12-21 2003-04-29 The Quigley Corporation Method and composition for the topical treatment of diabetic neuropathy
US20020146467A1 (en) 2001-02-08 2002-10-10 Jung Kyu Yong Herbal composition for the prevention and treatment of dementia
US6391346B1 (en) * 2001-04-05 2002-05-21 Thomas Newmark Anti-inflammatory, sleep-promoting herbal composition and method of use
US6387416B1 (en) * 2001-04-05 2002-05-14 Thomas Newmark Anti-Inflammatory herbal composition and method of use
JP4901025B2 (ja) 2001-06-22 2012-03-21 株式会社ナリス化粧品 エラスターゼ阻害剤
WO2003002134A1 (en) 2001-06-27 2003-01-09 Unigen Pharmaceuticals, Inc. Method for generating, screening and dereplicating natural product libraries for the discovery of therapeutic agents
US6685971B2 (en) 2001-06-28 2004-02-03 Rongxiang Xu Method and composition for repairing and promoting regeneration of mucosal tissue in the gastrointestinal tract
DE10133203A1 (de) 2001-07-07 2003-01-16 Beiersdorf Ag Catechine oder Extrakte von grünem Tee enthaltende kosmetische und dermatologische Zubereitungen zur Behandlung und aktiven Prävention trockener Haut und anderer negativer Veränderungen der physiologischen Homöostase der gesunden Haut
CN1395383A (zh) 2001-07-10 2003-02-05 颜森辉 智能型全方位专家管理系统
DE10139793A1 (de) 2001-08-14 2003-02-27 Beiersdorf Ag Verwendung von Wogonin zur Herstellung kosmetischer oder dermatologischer Zubereitungen zur Prophylaxe und Behandlung von entzündlichen Hautzuständen und/oder zum Hautschutz bei empfindlich determinierter und trockener Haut
US7338971B2 (en) 2001-08-30 2008-03-04 El-Naggar Mawaheb M Treatment of inflammatory, cancer, and thrombosis disorders
KR100486763B1 (ko) 2001-09-07 2005-05-03 학교법인고려중앙학원 항산화 활성이 있는 맹종죽엽 추출물 및 그 제조방법
JP2003081746A (ja) 2001-09-12 2003-03-19 Pola Chem Ind Inc メラノサイトのデンドライトの伸長抑制剤及びそれを含有する化粧料
US6740343B2 (en) 2001-09-17 2004-05-25 Phytos, Inc. Standardized extracts of Scutellaria lateriflora
US20040185124A1 (en) 2002-10-24 2004-09-23 Hiromichi Hayashi Health food and antitumor agent
US20040057908A1 (en) 2001-12-13 2004-03-25 Bowen William H. Oral compositions and use thereof
US20030125264A1 (en) 2001-12-29 2003-07-03 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Methods For Treating Wounds
JP2003212786A (ja) 2002-01-16 2003-07-30 Univ Nihon 竹の抽出成分を有効成分とする皮膚外用薬
JP2003212771A (ja) 2002-01-23 2003-07-30 Taiyo Kagaku Co Ltd 抗ナイセリア菌組成物
US20030166583A1 (en) 2002-02-22 2003-09-04 Oliver Yoa-Pu Hu Dermal cytochrome P450 1A inhibitors and enhancers
US20050096281A1 (en) 2002-03-01 2005-05-05 Unigen Pharmaceuticals, Inc. Formulation of a mixture of Free-B-Ring flavonoids and flavans for use in the prevention and treatment of cognitive decline and age-related memory impairments
US7972632B2 (en) 2003-02-28 2011-07-05 Unigen Pharmaceuticals, Inc. Identification of Free-B-Ring flavonoids as potent COX-2 inhibitors
US20030165588A1 (en) 2002-03-01 2003-09-04 Unigen Pharmaceuticals, Inc. Identification of free-B-ring flavonoids as potent COX-2 inhibitors
US7108868B2 (en) 2002-03-22 2006-09-19 Unigen Pharmaceuticals, Inc. Isolation of a dual cox-2 and 5-lipoxygenase inhibitor from acacia
US7615239B2 (en) 2002-04-15 2009-11-10 Tetsuo Santo Tea for treating dermatitis comprising herbal extracts
US8945518B2 (en) 2002-04-30 2015-02-03 Unigen, Inc. Formulation of dual eicosanoid system and cytokine system inhibitors for use in the prevention and treatment of oral diseases and conditions
EP2108370A1 (en) 2002-04-30 2009-10-14 Unigen Pharmaceuticals, Inc. Formulation of a mixture of free-B-ring flavonoids and flavans as a therapeutic agent
US8034387B2 (en) 2002-04-30 2011-10-11 Unigen, Inc. Formulation of a mixture of free-B-ring flavonoids and flavans for use in the prevention and treatment of cognitive decline and age-related memory impairments
CN1511549A (zh) 2002-12-27 2004-07-14 张小丽 含有黄芩的抗肿瘤、抗炎症及肿瘤预防药物的组合物
JP2004244385A (ja) 2003-02-14 2004-09-02 Pigeon Corp 防齲蝕性を有する乳幼児用の口腔内洗浄液
WO2004075844A2 (en) 2003-02-26 2004-09-10 Unigen Pharmaceuticals, Inc. Formulation for use in the prevention and treatment of carbohydrate induced diseases and conditions
BRPI0408814A (pt) 2003-03-27 2006-04-04 Unigen Inc composição farmacêutica, e, alimento para o cuidado da saúde
BRPI0409179A (pt) 2003-04-04 2006-05-02 Unigen Pharmaceuticals Inc formulação de inibidores duplos de ciclooxigenase (cox) e lipoxigenase (lox) para cuidados com a pele de mamìferos
US7225870B2 (en) 2003-05-01 2007-06-05 Weatherford/Lamb, Inc. Hydraulic tools for setting liner top packers and method for cementing liners
CN1266144C (zh) 2003-09-01 2006-07-26 上海凯曼生物科技有限公司 黄芩甙和黄芩甙元的用途和剂型
EP1684737A4 (en) * 2003-11-07 2009-11-11 Oaky Natural Co Ltd PHARMACEUTICAL COMPOSITION CONTAINING GAIACOL DERIVATIVES AND SYRINGOL DERIVATIVES EXTRACTED FROM NATURAL VEGETABLE VINEGAR
KR100465113B1 (ko) 2004-01-15 2005-01-14 주식회사 유니젠 대나무 추출물 또는 이로부터 분리된 트리신을 포함하는조성물
KR100522579B1 (ko) 2004-04-30 2005-10-19 (주) 한약마을 항스트레스 효과를 갖는 황금 및 오미자 혼합 추출물을함유하는 약학조성물
KR100720971B1 (ko) 2004-06-11 2007-05-22 주식회사 유니젠 대나무 또는 대나무 추출물을 포함하는 안드로젠 효능성조성물
US20060008749A1 (en) * 2004-07-08 2006-01-12 Frank Sobel Method for manufacturing of a mask blank for EUV photolithography and mask blank
KR100545304B1 (ko) 2004-09-01 2006-05-08 주식회사 유니젠 아선약을 포함하는 운카리아 속 식물, 또는 이의 황금및/또는 녹차의 배합물을 포함하는 사이클로옥시게나제및/또는 5-리폭시게나제 억제용 조성물
US20060140881A1 (en) 2004-12-22 2006-06-29 Guofeng Xu Oral care compositions containing flavonoids and flavans
US8895084B2 (en) 2004-12-23 2014-11-25 Colgate-Palmolive Company Oral care composition containing extract of unoxidized Camellia
CN101175406B (zh) 2005-03-10 2012-11-21 尤尼根公司 作为治疗剂的无取代b环类黄酮和黄烷的混合物制剂
KR100720973B1 (ko) 2005-03-18 2007-05-22 주식회사 유니젠 천연물 유래 아이소오리엔틴을 포함하는 히스타민 억제용약학 조성물
CN1686187A (zh) 2005-03-23 2005-10-26 贵阳高新瑞得科技开发有限公司 小儿清肺化痰泡腾颗粒及其制法
KR100761248B1 (ko) 2006-10-12 2007-10-04 주식회사 유니젠 대나무 및 황금 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피성피부염 치료를 위한 조성물
US9136202B2 (en) 2012-04-17 2015-09-15 Qualcomm Incorporated Enhanced package thermal management using external and internal capacitive thermal material
US10447702B2 (en) 2017-03-20 2019-10-15 Screening Room Media, Inc. Digital credential tiers

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1093914A (zh) * 1993-07-04 1994-10-26 钟定铨 万应喉风散及其制造方法
US6093403A (en) * 1997-08-01 2000-07-25 Phytocell Research, Inc. Sugar imbalance and diabetes treating herbal formulation

Also Published As

Publication number Publication date
BRPI0309689A2 (pt) 2019-03-12
US9655940B2 (en) 2017-05-23
AU2003228777A1 (en) 2003-11-17
ES2330097T3 (es) 2009-12-04
US7514469B2 (en) 2009-04-07
WO2003092599A3 (en) 2004-03-11
US9849152B2 (en) 2017-12-26
CA2703698A1 (en) 2003-11-13
AU2003228777C1 (en) 2009-08-13
CN101837003A (zh) 2010-09-22
US20030216481A1 (en) 2003-11-20
EP1503778A4 (en) 2007-01-03
JP4723239B2 (ja) 2011-07-13
AU2003228777B2 (en) 2009-02-26
NZ535988A (en) 2005-09-30
ATE438393T1 (de) 2009-08-15
EP1503778B1 (en) 2009-08-05
CA2484192C (en) 2012-10-02
US20140178509A1 (en) 2014-06-26
RU2379031C2 (ru) 2010-01-20
CA2703698C (en) 2016-11-22
HK1073247A1 (en) 2005-09-30
US7674830B2 (en) 2010-03-09
JP2011068662A (ja) 2011-04-07
DK1503778T3 (da) 2009-11-16
HK1146712A1 (en) 2011-07-08
CN100544715C (zh) 2009-09-30
RU2004135069A (ru) 2005-07-10
JP2005529898A (ja) 2005-10-06
CN1649611A (zh) 2005-08-03
US20060177528A1 (en) 2006-08-10
WO2003092599A2 (en) 2003-11-13
CA2484192A1 (en) 2003-11-13
US20170071997A1 (en) 2017-03-16
BRPI0309689B1 (pt) 2021-06-29
EP2108370A1 (en) 2009-10-14
KR20040025884A (ko) 2004-03-26
US9370544B2 (en) 2016-06-21
DE60328676D1 (de) 2009-09-17
US20030232763A1 (en) 2003-12-18
EP1503778A2 (en) 2005-02-09
KR100621234B1 (ko) 2006-09-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101837003B (zh) 作为治疗剂的包含无取代b环类黄酮和黄烷混合物的组合物
US9168242B2 (en) Isolation of a dual COX-2 and 5-lipdxygenase inhibitor from Acacia
CN1798568B (zh) 用于哺乳动物皮肤护理的双重环氧合酶(cox)以及脂氧合酶(lox)抑制剂的组合物
CN1845750B (zh) 用于预防及治疗认知衰退和年龄相关的记忆障碍的无取代b环类黄酮和黄烷混合物的组合物
Mongalo et al. Ziziphus mucronata Willd.(Rhamnaceae): it's botany, toxicity, phytochemistry and pharmacological activities
Usha et al. Pomegranate peel and its anticancer activity: A mechanism-based review
Melfi et al. Nature as a source and inspiration for human monoamine oxidase B (hMAO-B) inhibition: A review of the recent advances in chemical modification of natural compounds
Chen et al. Ethnomedicinal, Phytochemical, and Pharmacological Properties of Diospyros mollis Griff.: A Review
Rajagopal Pharmacology of Pterocarpus marsupium Roxb

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1146712

Country of ref document: HK

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: GR

Ref document number: 1146712

Country of ref document: HK

CX01 Expiry of patent term
CX01 Expiry of patent term

Granted publication date: 20130904